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3248 次 RT-PCR逆轉(zhuǎn)錄技術(shù)詳解 2022-12-27
前言RT-PCR就是逆轉(zhuǎn)錄PCR（Reverse transcription PCR）或稱為反轉(zhuǎn)錄PCR（Reverse transcription-PCR，RT-PCR），是以RNA為材料應(yīng)用于PCR擴增中的一種實驗方法。首先通過逆轉(zhuǎn)錄酶將總RNA或信使R
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1450 次 PCR蓋緊蓋子試劑蒸發(fā)問題詳解 2022-12-6
導(dǎo)讀在PCR實驗中，我們加完反應(yīng)體系后，都會認(rèn)真仔細(xì)的蓋好蓋子，并反復(fù)確認(rèn)已經(jīng)蓋好了蓋子，以避免出現(xiàn)試劑蒸發(fā)的情況�？墒怯袝r候我們也會有一些疑惑：明明已經(jīng)確認(rèn)蓋子蓋緊了，實驗結(jié)束后，還
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3895 次 熒光定量PCR對照詳解 2022-11-4
前言吾日三省吾身，定量實驗做對照了嗎？在熒光定量PCR實驗中遇到?jīng)]有曲線、曲線異常等情況，我們總是會在第一時間去看陽性對照和陰性對照的擴增情況來分析原因。由此可見，實驗中做對照的重要性
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2160 次 PCR耗材選擇的問答詳解 2022-10-25
導(dǎo)讀俗話說的好，工欲善其事，必先利其器。耗材的選擇對得到滿意的PCR實驗結(jié)果至關(guān)重要。在分析PCR結(jié)果時，我們往往側(cè)重于對引物、酶的濃度、溫度和時間的分析，卻忽略了PCR耗材也是影響因素之一
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1655 次 多重PCR技術(shù)要點解析 2022-10-20
多重PCR概述多重PCR(multiplex PCR)，又稱多重引物PCR或復(fù)合PCR，它是在同一PCR反應(yīng)體系里加上二對以上引物，同時擴增出多個核酸片段的PCR反應(yīng)，其基本原理與常規(guī)PCR相同，區(qū)別在于多重PCR反應(yīng)體
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2212 次 Taq酶選型三要素：擴增效率、酶動力、靈敏度 2022-9-5
導(dǎo)讀目前國內(nèi)市場上銷售的熱啟動Taq酶的品牌很多，但真正高質(zhì)量的熱啟動Taq酶并不多，面對這么多的熱啟動Taq酶產(chǎn)品，我們應(yīng)如何選擇？首先，選擇擴增效率高的熱啟動Taq酶耐受性好的Taq酶反應(yīng)體系
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3749 次 qPCR體系優(yōu)化和常見問題解析大全 2022-8-15
前言聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是用于擴增特定DNA片段的分子生物學(xué)實驗技術(shù)。實時熒光定量PCR（以下簡稱qPCR）作為第二代PCR技術(shù)，自1996年推出以來，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)分析、病原微生物檢測、
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3760 次 普通PCR引物與qPCR引物的對比與選擇詳解 2022-8-3
導(dǎo)讀說起引物，大家都再熟悉不過了。引物，在核苷酸聚合作用的起始時，可以刺激合成另一種大分子，并與反應(yīng)物以共價鍵形式連接的序列。在核酸化學(xué)中，引物是一段短的單鏈RNA或DNA片段，可結(jié)合在
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4025 次 熒光定量PCR實驗中熒光標(biāo)記的選擇詳解 2022-7-22
熒光定量PCR技術(shù)是將常規(guī)的PCR和熒光檢測技術(shù)相結(jié)合，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，以此實現(xiàn)對初始模板的定量分析。熒光定量PCR技術(shù)作為當(dāng)今生物學(xué)研究的重要手段之一，在基礎(chǔ)科學(xué)、生
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1391 次 qPCR實驗之核酸提取MIQE明確的要點詳解 2022-6-22
前言MIQE是描述評估qPCR實驗所需的最小信息，該指南是稿件投稿時需要同時提交的一個清單。通過作者提供相關(guān)的實驗條件和實驗特點，審稿人可以評價實驗所用方法的可靠性。另外提供詳細(xì)的實驗所用
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1164 次 qPCR實驗中安全科學(xué)地取材操作詳解 2022-6-10
規(guī)劃一個qPCR實驗時，最先碰到的問題就是研究目的和材料的選擇。要想做好一個qPCR實驗首先要根據(jù)目的選好材料。以目標(biāo)為導(dǎo)向的取材研究目標(biāo)的設(shè)立是非常重要的一個起始環(huán)節(jié)，所以對于樣本取材要
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2893 次 如何處理實時熒光定量PCR的數(shù)據(jù)詳解 2022-6-6
實時熒光定量PCR數(shù)據(jù)中的基本概念：在整個擴增過程中會出現(xiàn)基線期，指數(shù)期，線性期和平臺期。其中在基線期和指數(shù)增長期，擴增產(chǎn)物都是以指數(shù)級增長，但是在基線期我們沒辦法檢測；而到了線性期和
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2105 次 PCR原理、PCR擴增影響因素及預(yù)防詳解 2022-5-10
PCR簡介聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR)是利用一段DNA為模板，在DNA聚合酶和核苷酸底物共同參與下，將該段DNA擴增至足夠數(shù)量，以便進行結(jié)構(gòu)和功能分析的一種反應(yīng)。PCR擴增原理核
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5618 次 qPCR擴增過程中影響Ct值的因素及解決辦法詳解 2022-4-27
導(dǎo)讀Ct值是熒光定量PCR重要的結(jié)果呈現(xiàn)形式，它被用于計算基因表達(dá)量差異或者基因拷貝數(shù)。那么熒光定量的Ct值多大被認(rèn)為是合理？如何保證Ct值的有效范圍呢？ Ct值以及Ct值的作用：Ct值概念：也稱
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3160 次 實驗過程中核酸降解的預(yù)防手段與方法 2022-4-14
導(dǎo)語在實驗過程中，最心累的莫過于好不容易提取的核酸卻降解了。那么核酸為什么會發(fā)生降解呢，我們又該如何預(yù)防呢？關(guān)于核酸降解，你了解多少呢？讓我們一起對核酸降解一探究竟吧。 什么是核酸
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1895 次 移取PCR Master Mix對qPCR結(jié)果的準(zhǔn)確性的影響 2022-3-30
Overview定量聚合酶鏈反應(yīng)（qPCR）分析具有高靈敏度，這是其成功并廣泛應(yīng)用于科學(xué)實驗室的最重要原因之一。然而，包括移液技術(shù)在內(nèi)的許多因素都會對qPCR分析的結(jié)果產(chǎn)生影響。在進行基于PCR原理的
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1092 次 如何改進qPCR數(shù)據(jù)報告 2022-2-24
關(guān)于實時熒光定量PCR技術(shù)，最常見的應(yīng)用是通過RT-qPCR進行基因表達(dá)分析、疾病診斷和管理（如病毒定量）、食品檢測（如轉(zhuǎn)基因或過敏原分析）以及動物或植物育種等研究。這種方法非常靈敏，因此為
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3382 次 影響qPCR最終效果的六個要素分析與解決方法 2021-12-14
實時熒光定量PCR：在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團（探針或染料），利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR反應(yīng)過程，最后通過Cq或Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線對起始模板進行絕對定量或相對定量分析。而評估熒光定量P
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7056 次 qPCR擴增曲線的問題綜述與解決方法總結(jié) 2021-12-1
大家好！首先跟大家做一個自我介紹：我是擴增曲線，來自熒光定量PCR，是用于描述qPCR動態(tài)進程的曲線，我有兩種形態(tài)，一種是線性圖譜：橫坐標(biāo)是循環(huán)數(shù)，縱坐標(biāo)是熒光強度值；另一種是對數(shù)圖譜：橫
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1515 次 Azure Cielo™實時熒光定量PCR系統(tǒng)在檢測低拷貝端�；虻膽�(yīng)用 2021-11-24
我們都知道在實時定量PCR（qPCR）中，可以通過Cq值和標(biāo)準(zhǔn)曲線得出樣本的初始拷貝數(shù)。但Cq值與樣品中靶標(biāo)的拷貝數(shù)有關(guān)，也會受到PCR反應(yīng)的效率和儀器檢測靈敏度的影響。高靈敏度的儀器可以減少檢
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