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抗體術(shù)語(yǔ)Affinity與Avidity的基本特性和區(qū)別

瀏覽次數(shù):160 發(fā)布日期:2024-12-30  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

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Affinity與Avidity是用來(lái)描述抗體與其抗原之間結(jié)合強(qiáng)度的術(shù)語(yǔ)。雖然它們經(jīng)常被混用,但它們還是有區(qū)別的。理解Affinity 與Avidity如何決定抗體的性能以及它們可能如何受到實(shí)驗(yàn)條件的影響,對(duì)于產(chǎn)生可靠的免疫測(cè)定結(jié)果非常重要。

抗體基礎(chǔ)知識(shí)
抗體在B細(xì)胞表面表達(dá),B細(xì)胞是參與適應(yīng)性免疫的主要細(xì)胞類型之一。因?yàn)槊總(gè)B細(xì)胞必須表達(dá)一個(gè)獨(dú)特的抗體以供個(gè)體發(fā)起有效的免疫反應(yīng),所以個(gè)體內(nèi)存在數(shù)量龐大的抗體。抗體多樣性是通過(guò)三種主要機(jī)制實(shí)現(xiàn)的——V(D)J重組、連接多樣性和體細(xì)胞高頻突變——后者在適應(yīng)性免疫反應(yīng)展開(kāi)時(shí)產(chǎn)生更高親和力的抗體(affinity maturation,親和力成熟)。Affinity和Avidity是定義抗體-抗原相互作用強(qiáng)度的兩個(gè)關(guān)鍵屬性,但是他們有不同的含義。

什么是Affinity?
Affinity,也稱為結(jié)合親和力,是指抗體上的抗原結(jié)合位點(diǎn)(互補(bǔ)位點(diǎn))與抗原上的表位之間的相互作用強(qiáng)度。重要的是,它指的是互補(bǔ)位點(diǎn)與表位接觸殘基之間單個(gè)鍵的強(qiáng)度。Affinity是由非共價(jià)相互作用介導(dǎo)的,包括氫鍵、靜電鍵、范德華力和疏水相互作用,由平衡解離常數(shù)(KD)定義。KD是抗體與其靶標(biāo)結(jié)合的速率與抗體-抗原復(fù)合物解離的速率之比。高親和力抗體具有低KD值,其特點(diǎn)是快速的目標(biāo)識(shí)別(高Kon)和強(qiáng)穩(wěn)定性的抗體-抗原復(fù)合物(低Koff)。

什么是Avidity?
Avidity,也稱為功能性親和力,代表抗體-抗原相互作用的整體強(qiáng)度,受三個(gè)因素的影響——結(jié)合親和力(Affinity)、價(jià)數(shù)和抗體與抗原的結(jié)構(gòu)排列。在討論價(jià)數(shù)時(shí),重要的是要記住這不僅指抗體上的抗原結(jié)合位點(diǎn)的數(shù)量,還包括互補(bǔ)位點(diǎn)上參與的殘基數(shù)量。舉例來(lái)說(shuō),雖然整個(gè)IgG分子是雙價(jià)的,F(xiàn)ab片段是單價(jià)的,自然存在的IgA(二聚體)和IgM(五聚體)分別有4個(gè)和10個(gè)結(jié)合位點(diǎn),每個(gè)抗體的互補(bǔ)決定區(qū)(CDRs)通常包含多個(gè)參與抗原結(jié)合的殘基;所有這些相互作用共同貢獻(xiàn)于Avidity。

抗體-抗原復(fù)合物的結(jié)構(gòu)排列會(huì)對(duì)Avidity產(chǎn)生重大影響。當(dāng)實(shí)驗(yàn)條件(如溫度或pH值波動(dòng))導(dǎo)致抗體或抗原構(gòu)象發(fā)生輕微變化時(shí),這可能會(huì)影響結(jié)果。

還有哪些特性影響抗體性能?
除了Affinity與Avidity之外,還有兩個(gè)抗體的基本特性決定了它們的性能。第一個(gè)是特異性,即抗體如何區(qū)分一個(gè)抗原和另一個(gè)抗原。高親和力和低親和力抗體可以共享類似的特異性;然而,免疫系統(tǒng)傾向于擴(kuò)大產(chǎn)生高親和力抗體的B細(xì)胞。另一個(gè)特性是選擇性,它描述了抗體在異質(zhì)混合物中如何有效地與其抗原結(jié)合。

實(shí)驗(yàn)方面的考量
抗體的Affinity 、Avidity、特異性和選擇性都可能受到實(shí)驗(yàn)條件的影響,這強(qiáng)調(diào)了抗體選擇和測(cè)定優(yōu)化的關(guān)鍵重要性。使用抗體進(jìn)行研究時(shí)需要考慮的因素包括抗原結(jié)構(gòu)(例如,它是天然還是變性的)、樣本中抗原的數(shù)量、抗體濃度、緩沖液組成以及孵化溫度和時(shí)間。為了避免產(chǎn)生誤導(dǎo)性數(shù)據(jù),建議研究人員從值得信賴的供應(yīng)商那里購(gòu)買(mǎi)經(jīng)過(guò)良好表征的抗體,并先在他們自己的模型系統(tǒng)中測(cè)試這些抗體,然后再將其用于正規(guī)科學(xué)研究。

參考文獻(xiàn):
Fernández-Quintero, M.L., Pomarici, N.D., Math, B.A. et al. Antibodies exhibit multiple paratope states influencing VH–VL domain orientations. Commun Biol 3, 589 (2020).

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