結腸癌是常見的發(fā)生于結腸部位的消化道惡性腫瘤，好發(fā)于直腸與乙狀結腸交界處，以40～50歲年齡組發(fā)病率最高，男女之比為2～3：1，其發(fā)病率占胃腸道腫瘤的第3位。結腸癌主要為腺癌、黏液腺癌、未分化癌，大體形態(tài)呈息肉狀、潰瘍型等。慢性結腸炎患者、結腸息肉患者、男性肥胖者等為易感人群。

結腸腫瘤癌細胞的原位移植動物模型在一定程度上可以模擬人體結腸癌的發(fā)生發(fā)展，為人類結腸癌的發(fā)生、發(fā)展、生物學特性以及治療藥物的研究提供了良好的平臺。

結腸癌原位移植模型介紹
與異位移植相比，結腸癌原位移植可以進一步反映腫瘤的真實情況，提高腫瘤模型的可靠性。在原位移植模型中可誘導轉(zhuǎn)移，表明腫瘤細胞和器官特異性因子可以相互作用，與結腸癌的發(fā)生存在關聯(lián)；原位移植還可以模擬腫瘤的免疫微環(huán)境。因此，大多數(shù)基于異位模型的結果都需要通過原位移植模型來進一步驗證。結腸癌原位生長可以更好地模擬腫瘤細胞在體內(nèi)生長的微環(huán)境，并且對藥物療效的預測更為準確。

賽業(yè)生物在免疫缺陷小鼠上成功移植的人源細胞系超200種，包括皮下、靜動脈或原位等接種部位，在原位移植方面，已有結腸癌、肺癌、肝癌等多癌種的成功案例。

結腸原位手術建模位點摸索
小鼠結腸壁菲薄、纖細，致使結腸壁原位注射手術難度較大。在人體解剖學概念中，血管、淋巴管和神經(jīng)進出腸壁的部位稱為系膜緣，此處腸壁與兩層腹膜圍成腸系膜三角。對應于人體解剖學概念中的"系膜緣"，在小鼠解剖學上稱為"腸系膜附著處"。但小鼠解剖學上沒有"系膜三角"的概念，小鼠盲腸系膜附著處的腸壁與兩層腹膜圍成的三角形區(qū)域定義為"盲腸系膜三角"，此處腸壁無漿膜覆蓋，有血管、淋巴管和神經(jīng)在此處進出。

通過手術暴露小鼠盲腸，將熒光標記的結腸癌細胞接種于盲腸系膜三角，建立小鼠結腸癌原位種植模型。

盲腸系膜三角內(nèi)組織疏松，注射后形成的水皰沿盲腸系膜附著處呈條帶狀分布，張力小，不易發(fā)生滲漏，腫瘤位于盲腸系膜一側，沿盲腸軸位分布，加之盲腸腸腔寬大，短期內(nèi)不易發(fā)生腸腔梗阻。盲腸系膜三角處的腸壁無漿膜覆蓋，接種的結腸癌細胞易于生長。盲腸系膜動、靜脈和淋巴管在盲腸系膜三角進出腸壁，血供豐富，血液回流于門靜脈系統(tǒng)，該部位腫瘤較易侵犯腸系膜血管和淋巴管，使結腸癌發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移，尤其是肝轉(zhuǎn)移發(fā)生率高。

結腸癌模型的腫瘤組織在腹腔內(nèi)發(fā)生肝、脾、橫膈、腸系膜淋巴結等多處轉(zhuǎn)移，其轉(zhuǎn)移路徑符合人結腸癌轉(zhuǎn)移特點，能完全模擬結腸癌自然轉(zhuǎn)移發(fā)生過程。

結腸癌原位移植模型構建案例
1.HCT116-luc細胞株

小鼠結腸癌細胞HCT116-luc結腸原位移植腫瘤活體熒光成像圖、熒光值變化圖和生存曲線圖

結果顯示HCT116-luc在C-NKG上容易成瘤，熒光信號值最高可達10¹⁰；小鼠最高生存期是27天，生存中位數(shù)是26天，生存周期較短，腫瘤組織在腹腔內(nèi)轉(zhuǎn)移，增殖一定時間（D25）后腫瘤組織內(nèi)部有鈣化，相應的小鼠熒光信號變?nèi)酢?/span>

2.HCT15-luc細胞株

小鼠結腸癌細胞HCT15-luc結腸原位移植腫瘤活體熒光成像圖、熒光值變化圖和生存曲線圖

結果顯示HCT15-luc在C-NKG上容易成瘤，熒光信號值最高可達10⁸。小鼠最高生存期是39天，生存中位數(shù)是35天，生存周期較短，腫瘤組織在腹腔內(nèi)轉(zhuǎn)移。

3.DLD-1-luc細胞株

小鼠結腸癌細胞DLD-1-luc結腸原位移植腫瘤活體熒光成像圖、熒光值變化圖和生存曲線圖

結果顯示DLD-1-luc在C-NKG上容易成瘤，熒光信號值最高可達10⁹。小鼠最高生存期是63天，生存中位數(shù)是59天，腫瘤組織在腹腔內(nèi)轉(zhuǎn)移。