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新冠疫苗接種者體內(nèi)RBD抗體及中和抗體檢測方法和結(jié)果分析

瀏覽次數(shù):7916 發(fā)布日期:2021-2-22  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

新冠疫苗保護(hù)性能評估
為了應(yīng)對新冠疫情威脅,目前已經(jīng)有很多國家開始了疫苗接種工作,但接種新冠疫苗后,產(chǎn)生的保護(hù)效果并不確定,評估新冠疫苗有效性的重要指標(biāo)之一就是接種者體內(nèi)中和抗體的含量。針對大規(guī)模疫苗接種后的人群,使用簡單、快速的膠體金免疫層析法,可快速評估每個接種者體內(nèi)的抗RBD抗體及中和抗體的水平。

 

RBD結(jié)合抗體

采用膠體金免疫層析技術(shù),通過雙抗原夾心法測試RBD結(jié)合抗體:取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區(qū),血清會在毛細(xì)作用下向前層析,結(jié)合墊上的膠體金會溶解,然后和血清一起向前移動。血清到達(dá)檢測區(qū)后,膠體金標(biāo)記的S-RBD、血清中的抗體與檢測線上包被的S-RBD形成復(fù)合物,表現(xiàn)為檢測線顯色,血清中的抗體含量與檢測線顯色強(qiáng)度成正相關(guān)。反應(yīng)結(jié)束后,直接肉眼觀察顯**況或采用膠體金檢測儀進(jìn)行測試。通過檢測線和質(zhì)控線上膠體金顯色強(qiáng)弱,可判斷RBD抗體的含量。該方法可檢測血清、血漿及其他分泌物中含有可與RBD相互作用的任何抗體,并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。

 

膠體金免疫層析檢測RBD結(jié)合抗體

 

應(yīng)用場景

血清中RBD抗體篩查、早期患者血清學(xué)診斷及疫苗臨床效果評價—抗RBD總抗體檢測。

 

測試結(jié)果

標(biāo)記: 膠體金標(biāo)記S-RBD (b46003P)和膠體金標(biāo)記兔IgG (0295P)包被: C線為羊抗兔IgG (0295G),T線為S-RBD (46003P/46005P)

 

備注:“+++”表示反應(yīng)很強(qiáng);“++”表示反應(yīng)較強(qiáng);“+”表示反應(yīng)較弱;“±”反應(yīng)很弱;“-”表示無反應(yīng)。

 

RBD中和抗體

采用膠體金免疫層析法的競爭法測試RBD中和抗體:取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區(qū),血清會在毛細(xì)作用下向前層析,結(jié)合墊上的膠體金會溶解,然后和血清一起向前移動。血清到達(dá)檢測區(qū)后,膠體金標(biāo)記的S-RBD與檢測線上包被的ACE2結(jié)合,并被固定在檢測線上,表現(xiàn)為檢測線顯色,而血清中的中和抗體會與檢測線上的ACE2競爭結(jié)合S-RBD,從而導(dǎo)致固定在檢測線上的S-RBD減少,檢測線顯色下降。反應(yīng)結(jié)束后,直接肉眼觀察顯**況或采用膠體金檢測儀進(jìn)行測試。通過檢測線和質(zhì)控線上膠體金顯色強(qiáng)弱,可判斷中和抗體抑制效果。該方法可檢測血清、血漿中可阻斷RBD-ACE2相互作用的任何抗體,并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。

 

膠體金免疫層析檢測RBD中和抗體

 

應(yīng)用場景

疫苗臨床效果評價、康復(fù)者血清中保護(hù)性抗體水平檢測—模擬病毒侵襲細(xì)胞過程,通過阻斷RBD與ACE2的結(jié)合間接評價機(jī)體內(nèi)抗RBD中和性抗體的水平。

 

測試結(jié)果

標(biāo)記: 膠體金標(biāo)記RBD (46003P)和膠體金標(biāo)記兔IgG (0295P)包被: C線為羊抗兔IgG (0295G),T線為Human ACE2 (46001P/46002P)

 

備注:“+++”表示反應(yīng)很強(qiáng);“++”表示反應(yīng)較強(qiáng);“+”表示反應(yīng)較弱;“±”反應(yīng)很弱;“-”表示無反應(yīng)。

 

由此可見,陰性血清無中和活性,而陽性血清中含有中和性抗體,血清稀釋倍數(shù)在1:200時可完全阻斷RBD與ACE2的結(jié)合。

來源:上海雅吉生物科技有限公司
聯(lián)系電話:021-34661275
E-mail:58268971@qq.com

標(biāo)簽: 新冠疫苗 抗體檢測 RBD
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