熒光素衍生物具有高吸收率，出色的熒光量子產(chǎn)率和良好的水溶性，是流式細(xì)胞儀和免疫熒光法等生物檢測中最常用的熒光標(biāo)記之一。最廣泛使用的熒光素包括用于標(biāo)記蛋白質(zhì)（特別是抗體）的異硫氰酸熒光素（FITC）和用于標(biāo)記肽和寡核苷酸的羧基熒光素（5-FAM和5（6）-FAM）。 我們提供各類的熒光素染料，底物和結(jié)合物，以及一系列具有改良特性的卓越iFluor™熒光標(biāo)記染料，這些染料針對細(xì)胞標(biāo)記和檢測進行了優(yōu)化。

 

光譜性質(zhì)：

 

表1. 5-異硫氰酸熒光素（5-FITC）的光譜性質(zhì)
 

指標(biāo)	數(shù)值
激光線：	488 nm激光
篩選器集：	FITC
Ex / Em（nm）：	494/525 nm
消光系數(shù)（ε）：	75,000 cm-1 M -1
量子產(chǎn)率（Φ）：	0.79

 

       圖1. 5-異硫氰酸熒光素（5-FITC）* CAS 3326-32-7 *（Cat：121）的激發(fā)和發(fā)射光譜。

 

 

 

       iFluor™488-FITC：AlexaFluor®488的卓越替代品

 

 

 

       盡管基于熒光素的染料和綴合物有亮綠色熒光，但仍可能會限制其在某些應(yīng)用中的使用。具有相同光譜特性的iFluor™488染料可在較寬的摩爾范圍內(nèi)產(chǎn)生更亮，更光穩(wěn)定的結(jié)合物，且對pH值不敏感。iFluor™488染料分子能以高摩爾比與生物分子結(jié)合，同時產(chǎn)生最小的自發(fā)淬滅（圖2和圖3）。

 

 

       圖2. 用GAM IgG-FITC和GAM IgG-iFluor™488標(biāo)記的HeLa細(xì)胞之間的熒光強度比較。

 

 

       圖3. iFluor™488山羊抗小鼠IgG和FITC山羊抗小鼠IgG的光漂白速率的比較。HeLa細(xì)胞的微管蛋白用iFluor™488 GAM-IgG（頂部）或FITC GAM-IgG（底部系列）標(biāo)記。在Keyence X710熒光顯微鏡上以60秒的間隔拍攝圖像。TFI代表由ImageJ軟件計算的總熒光強度。

 

       表2. 用于標(biāo)記生物分子的可用iFluor™488反應(yīng)染料

 

產(chǎn)品	化學(xué) 反應(yīng)性	反應(yīng) 部分	Ex （nm）	Em （nm）	ε1	規(guī)格	貨號
iFluor™488琥珀酰亞胺酯	胺	琥珀酰亞胺酯	491	516	75000	1mg	1023
iFluor™488馬來酰亞胺	硫醇	馬來酰亞胺	491	516	75000	1mg	1062
iFluor™488炔烴	疊氮化物	炔烴	491	516	75000	1mg	999
iFluor™488胺	醛，羧酸，酮	胺	491	516	75000	1mg	1072
iFluor™488疊氮化物	炔烴	疊氮化物	491	516	75000	1mg	1000
iFluor™488酰肼	醛，羧酸，酮	酰肼	491	516	75000	1mg	1082

 

       注意：ε= 在其最大吸收波長處的摩爾消光系數(shù)（單位= cm -1 M -1）

 

       1. 熒光素相關(guān)產(chǎn)品

 

       我們提供廣泛的熒光素產(chǎn)品選擇，包括反應(yīng)性熒光素和熒光素衍生物，用于標(biāo)記抗體，核酸和其他生物分子，結(jié)合物，指示劑以及用于檢測細(xì)胞，組織勻漿和溶液中酶活性的底物。

 

       熒光素標(biāo)準(zhǔn)品：

 

產(chǎn)品名稱	貨號
熒光素* CAS 2321-07-5 *	1
熒光素，二鈉鹽* CAS 518-47-8 *	2

 

       FRET組件：
 

產(chǎn)品名稱	貨號
FMOC-Lys（5-FITC）-OH（普通供體染料）	5070
FMOC-Lys（TQ2）-OH（熒光素淬滅染料）	5256
FMOC-Asp（TQ2）-OH（熒光素淬滅染料）	5206
FMOC-Glu（TQ2）-OH（熒光素淬滅染料）	5236

 

       熒光素前體：

 

產(chǎn)品名稱	貨號
4-氟間苯二酚* CAS＃：103068-41-3 *	4022
2,4-二氟間苯二酚* CAS 195136-71-1 *	4023

 

       DNA測序構(gòu)建塊

 

產(chǎn)品名稱	貨號
	207
	208

 

       校準(zhǔn)品

 

產(chǎn)品名稱	貨號
AMP-熒光素共軛物校準(zhǔn)物	13610
GMP-熒光素共軛物校準(zhǔn)物	13611

 

       2. 反應(yīng)性熒光素染料

 

       反應(yīng)性熒光素和熒光素衍生物廣泛用于共價標(biāo)記生物分子，例如抗體，碳水化合物，核酸，蛋白質(zhì)，肽和寡核苷酸。熒光素綴合物可產(chǎn)生強烈的明亮和穩(wěn)定的綠色熒光，當(dāng)與藍(lán)色，黃色或紅色熒光探針結(jié)合使用時，通常用作檢測酶活性或在彩色熒光研究中提供對比的底物。熒光素和熒光素衍生物很容易在各種染料標(biāo)記化學(xué)中用到，主要包括：

 

       琥珀酰亞胺酯/ NHS酯-用于標(biāo)記抗體，蛋白質(zhì)，肽，胺修飾的寡核苷酸和其他生物分子上的游離胺（-NH？）

       馬來酰亞胺-用于標(biāo)記抗體，蛋白質(zhì)和肽上的巰基

       疊氮化物-通過點擊化學(xué)方法（click chemistry）標(biāo)記乙烯基

       炔烴-通過點擊化學(xué)方法標(biāo)記疊氮化物

       酰肼-用于標(biāo)記醛基和酮基

       羧酸-用碳二亞胺預(yù)活化后標(biāo)記胺，或用于醇的酯化

       胺-用于標(biāo)記各種親電子化合物，例如活化的酯

       四嗪-用于通過反電子需求Diels-Alder反應(yīng)標(biāo)記反式環(huán)辛烯（TCO）化合物

        亞磷酰胺-標(biāo)記寡核苷酸

 

 

 

       表3. 反應(yīng)性熒光素和熒光素衍生物（可用于標(biāo)記生物分子）

 

產(chǎn)品	化學(xué) 反應(yīng)性	反應(yīng) 部分	Ex （nm）	Em （nm）	ε1	規(guī)格	貨號
5（6）-FAM，SE * CAS 117548-22-8 *	胺	琥珀酰亞胺酯	493	517	83000	25mg	110
5（6）-FAM * CAS 72088-94-9 *	碳二亞胺預(yù)活化后的胺	羧酸	493	517	83000	1g	100
5（6）-FAM乙二胺	醛，羧酸，酮	乙二胺	493	517	83000	100mg	123
SE，5-FAM	胺	琥珀酰亞胺酯	493	517	83000	10mg	113
5-FAM-X，SE * CAS 148356-00-7 *	胺	琥珀酰亞胺酯	493	517	83000	5mg	113
5-FAM疊氮化物	炔烴	疊氮化物	493	517	83000	10mg	131
5-FAM炔烴	疊氮化物	炔烴	493	517	83000	10mg	132
5-FAM * CAS 76823-03-5 *	碳二亞胺預(yù)活化后的胺	羧酸	493	517	83000	100mg	103
5-FAM乙二胺	醛，羧酸，酮	乙二胺	493	517	83000	100mg	124
6-FAM，SE * CAS 92557-81-8 *	胺	琥珀酰亞胺酯	493	517	83000	10mg	116

 

       3. 熒光素標(biāo)記的酶底物

 

       熒光素和熒光素衍生物經(jīng)常用于制備用于檢測細(xì)胞和溶液中酶活性的熒光底物。當(dāng)被目的酶水解時，熒光素修飾的底物顯示出與酶活性成線性比例的熒光強度增加。AAT Bioquest提供了多種熒光素修飾的底物，用于檢測胱天蛋白酶，蛋白酶，肽酶，磷酸酶等的活性。

 

       表4. 可用熒光素標(biāo)記的酶底物
 

產(chǎn)品	生物功能	Ex（nm）	Em（nm）	規(guī)格	貨號
FDG [熒光素二-β-D-吡喃半乳糖苷]	β-半乳糖苷酶底物	498	517	1g	14001
FDP [二氟熒光素，四銨鹽] * CAS 217305-49-2 *	磷酸酶底物	498	517	5mg	11600
FCB [Fluoresceindi-β-D-cellobioside]	纖維素酶（例如β-葡萄糖苷酶，內(nèi)切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶）底物	498	517	1mg	14025
酪蛋白，F(xiàn)ITC綴合	通用蛋白酶底物	498	517	5mg	13440
FAM-VAD-FMK	多聚半胱氨酸蛋白酶抑制劑（胱天蛋白酶1、2、3、6、8、9或10）	493	517	25 tests	13470
FITC-C6-DEVD-FMK	Caspase 3底物	491	516	100ug	13408
FITC-C6-D（OMe）E（OMe）VD（OMe）-FMK	Caspase 3底物	491	516	100ug	13417
FITC-C6-LEHD-FMK	Caspase 9底物	491	516	100ug	13409
FDGlcU [熒光素二-β-D-葡糖醛酸苷]	β-葡萄糖醛酸酶底物	498	517	1mg	14002
葡萄糖-UDP-熒光素結(jié)合物	葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶底物	498	517	100ug	11705

 

       4. 熒光素標(biāo)記的綴合物

 

       熒光素標(biāo)記的綴合物因其亮綠色熒光和出色的光穩(wěn)定性而在生物成像和生物標(biāo)記中具有廣泛的應(yīng)用。熒光素衍生物可以標(biāo)記抗體，鏈霉親和素，鬼筆環(huán)肽， Annexin v，右旋糖酐和其他生物分子，以研究細(xì)胞凋亡，標(biāo)記細(xì)胞器或通過放大微弱信號來提高測定靈敏度。

 

       表5.可用熒光素標(biāo)記的熒光綴合物。
 

產(chǎn)品	生物功能	Ex（nm）	Em（nm）	規(guī)格	貨號
生物素-4-熒光素* CAS 1032732-74-3 *	以高親和力與鏈霉親和素四聚體結(jié)合	492	518	5mg	3006
Annexin V，F(xiàn)ITC標(biāo)記	檢測細(xì)胞表面的磷脂酰絲氨酸	491	516	100 tests	20030
鬼筆環(huán)肽-熒光素結(jié)合物	標(biāo)記肌動蛋白絲（F-肌動蛋白）	498	517	300 tests	23101
FITC-鏈霉親和素偶聯(lián)物	間接結(jié)合生物素化的一抗，放大信號	491	516	1mg	16910
熒光素生物素	以高親和力與鏈霉親和素四聚體結(jié)合	498	517	5mg	3017
FITC山羊抗小鼠IgG（H + L）	間接檢測小鼠一抗	491	516	1mg	16852
FITC山羊抗小鼠IgG（H + L）*交叉吸附*	間接檢測小鼠一抗	491	516	1mg	16860
FITC山羊抗兔IgG（H + L）	間接檢測兔一抗	491	516	1mg	16868
FITC山羊抗兔IgG（H + L）*交叉吸附*	間接檢測兔一抗	491	516	1mg	16876
FITC-葡聚糖結(jié)合物（平均分子量=〜20K）	心血管，微循環(huán)，灌注，細(xì)胞膜通量示蹤劑	491	516	25mg	21700

       5. 熒光素指示劑

 

       熒光素指示劑是生物化學(xué)和細(xì)胞研究中的重要工具。它們已用于熒光成像的所有主要類型，包括流式細(xì)胞儀，熒光顯微鏡和基于熒光板的分析。AAT Bioquest提供了多種熒光素指示劑，可用于測量細(xì)胞的pH值，鈣濃度，細(xì)胞增殖，細(xì)胞活力等。

 

       表6.可用的熒光素指示劑

產(chǎn)品	生物功能	Ex （nm）	Em（nm）	規(guī)格	貨號
FDA [氟乙酸甘油酯] * CAS 596-09-8 *	細(xì)胞活力指標(biāo)	498	517	1g	22020
熒光素二辛酸酯[熒光素二辛酸酯]	細(xì)胞活力指標(biāo)	498	517	100mg	22019
熒光素二辛酸酯*水溶性*	細(xì)胞活力指標(biāo)	498	517	5mg	22018
CFSE [5-（和6）-羧基熒光素二乙酸酯，琥珀酰亞胺酯] * CAS 150347-59-4 *	細(xì)胞增殖指標(biāo)，細(xì)胞活力指標(biāo)	498	517	25mg	22022
CDCFDA，SE [5-（和-6）-羧基-2'，7'-二氯熒光素二乙酸酯，琥珀酰亞胺酯] *混合異構(gòu)體*	細(xì)胞增殖指標(biāo)，細(xì)胞活力指標(biāo)	498	517	25mg	22026
ReadiUse™CFSE [5-（和6）-羧基熒光素二乙酸酯，琥珀酰亞胺酯] * CAS 150347-59-4 *	細(xì)胞增殖指標(biāo)，細(xì)胞活力指標(biāo)	498	517	5 x 500mg	22028
CDCFDA [5-（and-6）-Carboxy-2'，7'-dichlorofluorescein diacetate] *混合異構(gòu)體*	細(xì)胞活力指標(biāo)	498	517	100mg	22025
CFDA [5-（和6）-羧基熒光素二乙酸酯] *混合異構(gòu)體*	細(xì)胞活力指標(biāo)	498	517	100mg	22021
二乙酸二氫熒光素[二乙酸氟樹脂] * CAS 35340-49-9 *	細(xì)胞活力指標(biāo)，氧化還原指標(biāo)	498	517	100mg	15203
BCECF，AM	細(xì)胞滲透性pH指示劑	504	527	1mg	21202

 

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