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Buccutite™-全新一代的蛋白交聯(lián)技術(shù)的原理與運(yùn)用

瀏覽次數(shù):1560 發(fā)布日期:2020-8-5  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
       Buccutite™交聯(lián)技術(shù)提供了一種將蛋白質(zhì)與另一種大分子(例如抗體或酶)偶聯(lián)的有效方法。與常用的SMCC交聯(lián)技術(shù)相比,Buccutite™交聯(lián)技術(shù)更結(jié)實(shí),產(chǎn)率更高,它利用兩個獨(dú)特的排他性的接頭:Buccutite™MTA 和Buccutite™ FOL,每個基團(tuán)末端都具有一個與胺反應(yīng)的基團(tuán),該基團(tuán)專門與所需標(biāo)記蛋白質(zhì)上的伯胺反應(yīng)。另一端包含我們專有的Buccutite™反應(yīng)性基團(tuán),該基團(tuán)僅結(jié)合其各自的Buccutite™MTA / FOL交聯(lián)劑對應(yīng)物具有高度親和力。當(dāng)兩種基團(tuán)同時存在時,兩種結(jié)合物會在Buccutite™反應(yīng)位點(diǎn)共價(jià)連接在一起,形成蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)結(jié)合物。
 
 
       我們的Buccutite™交聯(lián)技術(shù)提供了最方便,最有效的交聯(lián)方法,以高共軛產(chǎn)率連接兩種生物分子。我們的方法使用一對交聯(lián)劑:Buccutite™MTA和Buccutite™FOL。MTA被添加到一個分子上,而FOL被添加到另一分子。通過混合Molecule-1-Buccutite™MTA和Molecule-2-Buccutite™FOL引發(fā)交聯(lián)反應(yīng)。該交聯(lián)反應(yīng)在極其溫和和中性的條件下發(fā)生,不需要催化劑,這些獨(dú)立產(chǎn)品可以適應(yīng)研究人員的特定材料和要求。
 
       目前,我們提供獨(dú)立的Buccutite™MTA和Buccutite™FOL試劑,以擴(kuò)展Buccutite™交聯(lián)技術(shù)的應(yīng)用,MTA被添加到一個分子,而FOL被添加到另一分子,然后通過混和1分子的Buccutite™MTA和1分子的Buccutite™FOL引發(fā)交聯(lián)反應(yīng),共軛試劑類型包括NHS酯,scavengers和Dye 650。
 
       1. 單獨(dú)的Buccutite™FOL和MTA產(chǎn)品:
 
貨號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格
5350 Buccutite™FOL,NHS酯 2 umoles
5355 Buccutite™MTA,NHS酯 2 umoles
5360 Buccutite™FOL scavengers 2 umoles
5365 Buccutite™MTA scavengers 2 umoles
5370 Buccutite™MTA-Dye 650 2 umoles
5372 Buccutite™FOL-Dye 650 2 umoles
       
       2. HRP抗體偶聯(lián)試劑盒
 
       Buccutite™過氧化物酶(HRP)標(biāo)記抗體試劑盒可用于制備辣根過氧化物酶(HRP)可直接標(biāo)記含有游離氨基基團(tuán)的蛋白質(zhì),肽和其它配體綴合物。我們試劑盒中提供的HRP已通過我們專有的鏈接器Buccutite™FOL進(jìn)行了預(yù)激活,可以直接用于綴合。整個過程僅需要兩次簡單的混合,而無需進(jìn)一步純化。Buccutite™FOL活化的HRP在極溫和的中性條件下無需催化劑即可輕松與Buccutite™MTA分子發(fā)生反應(yīng)。
 
       Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯(lián)試劑盒
 
貨號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格
5503 Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯(lián)試劑盒*針對標(biāo)記100 ug蛋白進(jìn)行了優(yōu)化* 1 kit
5504 Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯(lián)試劑盒*針對標(biāo)記1 mg蛋白進(jìn)行了優(yōu)化* 1 kit
5505 Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯(lián)試劑盒*針對標(biāo)記25 ug蛋白進(jìn)行了優(yōu)化* 2次標(biāo)記
 
       3. 快速標(biāo)記和交聯(lián)試劑盒
 
       抗體樣本快速標(biāo)記步驟
 
       Buccutite™快速標(biāo)記和交聯(lián)試劑盒提供了一種快速,簡單和有效的技術(shù),可以在微量的抗體上標(biāo)記PE,APC或串聯(lián)染料。它利用兩個獨(dú)立的接頭Buccutite™MTA和Buccutite™FOL。這些接頭被分別標(biāo)記到藻膽蛋白或目的抗體上,并且當(dāng)混合時會牢固結(jié)合在一起,從而形成抗體-藻膽蛋白偶聯(lián)物。
 
 
Buccutite™交聯(lián)技術(shù)用于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)綴合的簡單過程
 
       (1)快速蛋白質(zhì)交聯(lián)試劑盒
 
 
快速蛋白質(zhì)交聯(lián)試劑盒中Buccutite™生物綴合系統(tǒng)的原理圖
 
       使用我們專有的一對交聯(lián)劑:Buccutite™MTA和Buccutite™FOL,Buccutite™快速蛋白質(zhì)交聯(lián)試劑盒(Cat# 1315)旨在提供一種簡便方法來生產(chǎn)高產(chǎn)率的偶聯(lián)抗體。有效的系統(tǒng)可以簡化如下:將MTA添加到一種蛋白質(zhì)中,而將FOL添加到另一種蛋白質(zhì)中。蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)交聯(lián)反應(yīng)是通過將Protein-1-Buccutite™MTA和Protein-2-Buccutite™FOL混合而引發(fā)的。
 
       (2)快速抗體標(biāo)記試劑盒
 
       Buccutite™快速標(biāo)記試劑盒,以促進(jìn)PE與抗體和其他蛋白質(zhì)(例如鏈霉親和素和其他輔助試劑)的結(jié)合,Buccutite™快速抗體標(biāo)記試劑盒提供了一種強(qiáng)大而便捷的方法來標(biāo)記您的抗體。標(biāo)記好的抗體適用于WB,ELISA和IHC應(yīng)用。每個試劑盒均提供預(yù)活化的APC或PE,以促進(jìn)與抗體和其他蛋白質(zhì)(如鏈霉親和素和其他輔助試劑)的結(jié)合。我們的預(yù)活化材料已準(zhǔn)備好進(jìn)行共軛,比傳統(tǒng)繁瑣的基于SMCC的共軛化學(xué)具有更高的產(chǎn)率。該試劑盒包括一個反應(yīng)緩沖液,每個足以進(jìn)行2個標(biāo)記反應(yīng)。整個過程僅需要兩次簡單的混合,而無需進(jìn)一步純化。任何新抗體的最佳比例都必須通過實(shí)驗(yàn)確定,但是每個試劑盒都包含一個協(xié)議,其中推薦量供用戶參考根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)進(jìn)行調(diào)整。
 
       用于快速標(biāo)記和交聯(lián)試劑盒的快速抗體標(biāo)記試劑盒:
 
貨號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 Ex Em
1310 Buccutite™快速PE抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)可標(biāo)記100 ug抗體的微尺度優(yōu)化* 2次標(biāo)記 565 575
1312 Buccutite™快速PE抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)標(biāo)記25 ug抗體的微級優(yōu)化* 2次標(biāo)記 565 575
1311 Buccutite™快速APC抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)可標(biāo)記100 ug抗體的微尺度優(yōu)化* 2次標(biāo)記 651 662
1313 Buccutite™快速APC抗體標(biāo)記試劑盒*經(jīng)過微尺度優(yōu)化,可標(biāo)記每個反應(yīng)25 ug抗體* 2次標(biāo)記 651 662
 
       (3)快速串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒:
 
       PE和APC偶聯(lián)的串聯(lián)染料經(jīng)常在流式細(xì)胞儀和其他應(yīng)用中使用,因?yàn)樗鼈儗τ诙鄥?shù)可視化非常有用。由于串聯(lián)染料可以被同一激光激發(fā),但有不同的發(fā)射結(jié)果,因此使用串聯(lián)染料可以提高實(shí)驗(yàn)效率。所有的Buccutite™快速串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒都具有相同的激發(fā)波長,PE綴合物為575 nm,APC綴合物為651 nm,但發(fā)射光譜范圍不同,這取決于每個試劑盒的次級配對染料。
 
       PE快速偶聯(lián)串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒:
 
貨號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 Ex Em
1318 Buccutite™PE-Texas紅色串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)可標(biāo)記100 ug抗體的微量優(yōu)化* 2次標(biāo)記 565 600
1343 Buccutite™PE-Texas Red Tandem抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)標(biāo)記25 ug抗體的微量優(yōu)化* 2次標(biāo)記 565 600
1322 Buccutite™PE-Cy5串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)可標(biāo)記100 ug抗體的微量優(yōu)化* 2次標(biāo)記 565 674
1340 Buccutite™PE-Cy5串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒*優(yōu)化用于每次反應(yīng)標(biāo)記25 ug抗體的微級* 2次標(biāo)記 565 674
1316 Buccutite™PE-Cy5.5串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)可標(biāo)記100 ug抗體的微量優(yōu)化* 2次標(biāo)記 565 700
1341 Buccutite™PE-Cy5.5串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒*優(yōu)化用于每次反應(yīng)標(biāo)記25 ug抗體的微量分析儀* 2次標(biāo)記 565 700
1317 Buccutite™PE-Cy7串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)可標(biāo)記100 ug抗體的微量優(yōu)化* 2次標(biāo)記 565 780
1342 Buccutite™PE-Cy7串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)標(biāo)記25 ug抗體的微級優(yōu)化* 2次標(biāo)記 565 780
 
       APC快速偶聯(lián)串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒:
 
貨號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 EX EM
1320 Buccutite™APC-Cy5.5串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)可標(biāo)記100 ug抗體的微量優(yōu)化* 2次標(biāo)記 651 700
1350 Buccutite™APC-Cy5.5串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)標(biāo)記25 ug抗體的微量優(yōu)化* 2次標(biāo)記 651 700
1321 Buccutite™APC-Cy7串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)可標(biāo)記100 ug抗體的微量優(yōu)化* 2次標(biāo)記 651 780
1351 Buccutite™APC-Cy7串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒*優(yōu)化用于每次反應(yīng)標(biāo)記25 ug抗體的微量分析儀* 2次標(biāo)記 651 780
1319 Buccutite™APC-iFluor™700串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)可標(biāo)記100 ug抗體的微量優(yōu)化* 2次標(biāo)記 651 713
1347 Buccutite™APC-iFluor™700串聯(lián)抗體標(biāo)記試劑盒*針對每次反應(yīng)標(biāo)記25 ug抗體的微級優(yōu)化* 2次標(biāo)記 651 713
 
       (4)預(yù)活化的ReadiUse™單獨(dú)和串聯(lián)染料
 
       同時我們也提供預(yù)活化的PE和APC,以促進(jìn)其與抗體和其他蛋白質(zhì)(如鏈霉親和素和其他輔助試劑)的結(jié)合。我們的預(yù)活化ReadiUse™染料比傳統(tǒng)的基于SMCC的綴合物具有更高的產(chǎn)率。此外,我們的預(yù)活化染料通過在蛋白質(zhì)中含量豐富的氨基與每個目標(biāo)蛋白質(zhì)進(jìn)行結(jié)合,而SMCC技術(shù)的目標(biāo)是必須通過還原抗體來產(chǎn)生巰基。
 
       使用Buccutite™技術(shù)ReadiUse™預(yù)活化PE和APC染料
 
貨號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 Ex Em
2560 ReadiUse™預(yù)活化PE 1 mg 565 575
2561 ReadiUse™預(yù)激活A(yù)PC 1 mg 651 713
 
       使用Buccutite™技術(shù)ReadiUse™預(yù)活化PE和APC串聯(lián)染料
 
 
       4. Bucculite™dU摻入細(xì)胞增殖熒光成像試劑盒
 
 
用Bucculite™dU摻入的細(xì)胞增殖熒光成像試劑盒(貨號:22320)檢測到S期Hela細(xì)胞。
 
       監(jiān)測細(xì)胞增殖是評估細(xì)胞活力,細(xì)胞周期和遺傳毒性的最可靠方法之一。一種檢測細(xì)胞增殖的可靠方法是在細(xì)胞周期的S期過程中,在存在胸腺嘧啶核苷的情況下檢測DNA合成。Bucculite™dU摻入細(xì)胞增殖測定試劑盒使用FOL-dU(胸苷的類似物)。FOL-dU在DNA合成過程中被摻入細(xì)胞DNA中。固定后,通過我們的Buccutite™標(biāo)記技術(shù)用MTA-iFluor™共軛物標(biāo)記摻入的FOL-dU。根據(jù)所使用的試劑盒,可以在Cy5,TRITC或FITC通道中可視化細(xì)胞中形成的熒光團(tuán)標(biāo)記的DNA。
 
       該Bucculite™的dU摻入細(xì)胞增殖試劑盒提供了一種可替代基于BrdU抗體的檢測和EdU點(diǎn)擊化學(xué)檢測的方法,該檢測方法無銅且對環(huán)境友好,對于在單細(xì)胞水平上測量活性DNA合成非常有效。
 
       Bucculite™dU摻入細(xì)胞增殖熒光成像試劑盒:
 
貨號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 Ex Em
22305 Bucculite™dU摻入細(xì)胞增殖熒光成像試劑盒*綠色熒光* 200 Tests 491 518
22315 Bucculite™dU摻入細(xì)胞增殖熒光成像試劑盒*紅色熒光* 200 Tests 555 565
22320 Bucculite™dU摻入細(xì)胞增殖熒光成像試劑盒*深紅色熒光* 200 Tests 649 664
       
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