SDS-PAGE凝膠制備試劑盒說明書
瀏覽次數(shù):2240 發(fā)布日期:2020-7-7
來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
SDS-PAGE凝膠制備試劑盒說明書
|
P1200-25T |
P1200-50T |
保存條件 |
30%制膠液(29:1) |
100mL |
100mL×2 |
4℃,避光 |
1.5mol/LTris(pH8.8) |
100mL |
100mL×2 |
常溫 |
1.0mol/LTris(pH6.8) |
30mL |
60mL |
常溫 |
PAGE膠凝固劑 |
1g |
2g |
干粉4℃;溶液-20℃ |
10%SDS |
5mL |
10mL |
常溫 |
PAGE膠促凝劑 |
0.8mL |
1.5mL |
4℃,避光 |
產(chǎn)品簡介:
本公司生產(chǎn)的SDS-PAGE凝膠制備試劑盒是按照經(jīng)典方法配制而成。本試劑盒提供了配制SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑,用戶只需自備制膠器具和蒸餾水,即可配制PAGE膠。本試劑盒可配制不同規(guī)格、不同聚合度的PAGE膠(即聚丙烯酰胺凝膠) 約25/50塊。
注意事項:
1. PAGE膠促凝劑和10%PAGE膠凝固劑最后加,在加入前需混勻前面所加試劑。10%PAGE膠凝固劑溶液在4℃有效期為一周; PAGE膠促凝劑易揮發(fā),使用后請蓋緊瓶蓋。在常溫下膠30分鐘內(nèi)可以凝固,如溫度過低,可放37℃溫箱凝固。灌完分離膠后,輕輕的加1mL ddH2O封上層,膠凝固后可見到分界線。灌濃縮膠前,先傾去水層,再用吸水紙吸干。濃縮膠灌好后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后,放入電泳液中(讓電泳液漫過加樣孔),輕輕的撥出梳子,可防加樣孔變形。
2. 配制量可按上表等比加減。如果所用膠濃度與上面不同,可自行調(diào)整,主要是調(diào)整30% 制膠液的量(需要濃度×總體積/30%),最后用水補足總體積。
配膠說明:
1. 先在PAGE膠凝固劑干粉中加入蒸餾水或去離子水(每克PAGE膠凝固劑需加水10mL)配置成10%溶液,將溶液分裝成小體積后凍存于-20℃,制備凝膠時融化后使用。4℃保存有效期為一周。檢測SDS溶液是否澄清,若出現(xiàn)絮狀物或沉淀可放37℃片刻至溶解,不影響效果。
2. 根據(jù)目標(biāo)蛋白分子量大小,選取凝膠濃度,按下表配制。先配分離膠,再配濃縮膠。
|
分離膠15% |
分離膠12% |
分離膠10% |
分離膠8% |
濃縮膠5% |
總體積 |
10mL |
10mL |
10mL |
10mL |
5mL |
30% 制膠液(29:1) |
5mL |
4mL |
3.3mL |
2.7mL |
0.83mL |
1M Tris-HCl (PH6.8) |
0 |
0 |
0 |
0 |
0.625mL |
1.5M Tris-HCl(PH8.8) |
2.5mL |
2.5mL |
2.5mL |
2.5mL |
0 |
10%SDS |
100μL |
100μL |
100μL |
100μL |
50μL |
10%PAGE膠凝固劑 |
100μL |
100μL |
100μL |
100μL |
75μL |
PAGE膠促凝劑 |
10μL |
10μL |
10μL |
10μL |
7.5μL |
ddH2O |
2.3mL |
3.3mL |
4.0mL |
4.6mL |
3.42mL |
最佳分離范圍 |
10-40kD |
12-60 kD |
20-80 kD |
30-90kD |
— |
注意:
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。