非小細(xì)胞肺癌（nonsmall‐cell lung carcinomas，NSCLC）約占所有肺癌的80%，并且大多數(shù)患者發(fā)現(xiàn)時已處于中晚期，5年生存率很低。對于NSCLC，靶向治療是臨床上一種理想的治療方式。表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）是目前治療NSCLC的一個重要靶點，然而相關(guān)靶點藥物如EGFR酪氨酸激酶抑制劑有可能導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的耐藥性突變。因此，實時監(jiān)測突變在治療過程中十分必要。傳統(tǒng)活檢方法無法用于實時監(jiān)測，而可視作腫瘤組織替代品的循環(huán)腫瘤細(xì)胞（circulating tumor cells，CTC）有著實現(xiàn)實時監(jiān)測的潛力。

 

 

關(guān)于CTC細(xì)胞檢測，CellSearch系統(tǒng)是唯一的美國 FDA批準(zhǔn)的CTC計數(shù)系統(tǒng)，但是它仍然難以用于NSCLC患者CTC的分析。近日，日本科學(xué)家借助On-chip Sort流式分選儀在Cancer Science雜志上發(fā)表了有關(guān)NSCLC患者CTC細(xì)胞檢測的文獻(xiàn)《Isolation and molecular analysis of circulating tumor cells from lung cancer patients using a microfluidic chip type cell sorter》。研究認(rèn)為，使用On-chip Sort是檢測和捕獲NSCLC患者CTC細(xì)胞的有效方法。

首先，研究人員將不同數(shù)量的各種腫瘤細(xì)胞系混合摻入血液中，并使用On-chip Sort檢測并分離CTC細(xì)胞。分離得到CTC細(xì)胞中，EGFR突變的檢測成功率為100％。之后，研究人員采集了30個NSCLC患者的外周血，并使用On-chip Sort和CellSearch以盲目的方式計算CTC細(xì)胞數(shù)量。結(jié)果顯示，30名患者中有22名（73.3％）患者使用On-chip Sort確定為CTC陽性，但只有9名（30％）使用CellSearch系統(tǒng)確定為CTC陽性。并且對這9例CellSearch確認(rèn)為陽性的患者，On-chip Sort也確認(rèn)為陽性。說明在NSCLC患者CTC細(xì)胞檢測中，On-chip Sort比CellSearch系統(tǒng)有更高的靈敏度，一些無法通過CellSearch檢測到的CTC細(xì)胞可以使用On-chip Sort檢測到。

 

 

此外，研究人員使用熒光顯微鏡觀察了On-chip Sort分選捕獲的細(xì)胞（這些細(xì)胞在分選之前已經(jīng)標(biāo)記了靶向腫瘤細(xì)胞標(biāo)志物的熒光抗體 ）。結(jié)果顯示，分選得到的細(xì)胞與腫瘤標(biāo)志物熒光抗體結(jié)合，說明分選得到的是CTC細(xì)胞。

 

 

總結(jié)：

      On-chip Sort可以準(zhǔn)確分離捕獲NSCLC患者的CTC細(xì)胞，且可用于后續(xù)的腫瘤細(xì)胞DNA檢測，以實現(xiàn)EGFR突變的實時監(jiān)測。此外，基于On-chip Sort的CTC細(xì)胞分析方法在細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析、免疫細(xì)胞化學(xué)、熒光原位雜交檢測等方面提供了獨特的優(yōu)勢。最重要的是，此方法可用于評估EGFR蛋白表達(dá)水平的變化，在NSCLC患者CTC細(xì)胞診斷方面有著很大的臨床潛力。

關(guān)于On-chip Sort流式分選儀

 

 

技術(shù)革新

● 創(chuàng)新：采用微流控專利技術(shù)；

● 無損傷：低壓氣體推動分選；

● 零污染：一次性芯片全封閉，無臨床污染；     

● 無限制：分選時對鞘液沒有要求（可使用海水、培養(yǎng)液、油等）；

 

應(yīng)用領(lǐng)域

● CTC分選與鑒定；

● 神經(jīng)細(xì)胞分選與鑒定；

● 細(xì)菌、微生物、霉菌分選與活力測定；

● 精子分選；

● 血細(xì)胞分選與鑒定；

● 干細(xì)胞研究（iPSES細(xì)胞）；

● 藥物機理研究；

● ……

※獲得諾貝爾醫(yī)學(xué)獎的京都大學(xué)iPS研究院等多數(shù)客戶在使用