大鼠(AMA)ELISA試劑盒技術(shù)原理
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產(chǎn)品名稱:大鼠(AMA)ELISA試劑盒技術(shù)原理
英文名稱:Rat Anti-myocardial antibody,AMA ELISA Kit
產(chǎn)品編號:QY-SZ2127
產(chǎn)品性狀:液體
產(chǎn)品用途:科研實驗專用
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
客服電話:021-51867124 QQ:3063139112 郵件:3063139112@qq.com
實驗原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
試劑盒組成:
封板膜:2片(48)/2片(96)
說明書:1份
密封袋:1個
標(biāo)準(zhǔn)品:2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存
酶標(biāo)包被板:1×481×962-8℃保存
樣品稀釋液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
顯色劑A液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
顯色劑B液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
終止液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存
標(biāo)本的采集及保存
1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。
4. 細(xì) 胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右 (2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組 織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
實驗結(jié)果不理想請及時與客服或技術(shù)支持聯(lián)系,我們可以幫您一起分析實驗結(jié)果。
如果僅憑實驗數(shù)據(jù)無法判斷,您可以將試劑盒發(fā)回給我們進(jìn)行售后檢測。
如果是試劑盒本身的質(zhì)量問題,可以為您退換貨;
如果是實驗操作的問題,技術(shù)人員可以給您一些改進(jìn)的建議。