洛美沙星檢測(cè)卡使用說明書
(膠體金法)
1、 原理及用途
本產(chǎn)品應(yīng)用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成,用于快速檢測(cè)畜牧、水產(chǎn)等養(yǎng)殖業(yè)中的洛美沙星(Lomefloxacin,
LOM)殘留。
樣本溶液滴入金標(biāo)微孔后,樣本溶液中的洛美沙星與金標(biāo)抗體相結(jié)合,從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上洛美沙星偶聯(lián)物結(jié)合。
2、 技術(shù)指標(biāo)
2.1組織樣本檢測(cè)下限:
5ppb(ng/ml)
3、 試劑盒組成
名稱 |
10T/盒 |
20T/盒 |
檢測(cè)卡(含金標(biāo)微孔) |
10個(gè) |
20個(gè) |
提取劑B |
30ml×2 |
30ml×3 |
溶解劑 |
30ml×1 |
30ml×2 |
Nacl |
25ml×1 |
25ml×2 |
LOM復(fù)溶液 |
4ml×1 |
8ml×1 |
說明書 |
1份 |
1份 |
4、 需要的器材和試劑
4.1 儀器:均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl
5、 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5.2 配液:無
5.3 樣本前處理步驟:
5.3.1魚蝦組織
(建議蝦要去掉頭和殼后徹底清洗干凈,魚要去鱗后取魚背部油脂較少的部位進(jìn)行實(shí)驗(yàn),樣本應(yīng)當(dāng)避光冷藏保存)
1.魚、蝦、畜禽肉、雞肉等去皮,用均質(zhì)器均質(zhì)樣本,取3g去脂肪組織樣本,加入到配套的15ml離心管中。
2.向離心管中準(zhǔn)確加入提取劑B 4ml,加入Nacl溶液2ml,將瓶塞蓋緊密封,劇烈振蕩3分鐘,4000rpm離心3分鐘。
3.用吸管取分層后的上層清液(切勿吸取下層)2ml±0.2ml加入到配套5ml離心管中,用氮吹儀或吹風(fēng)機(jī)吹干(離心管管底有部分顆粒狀未吹干黃色油脂屬正常現(xiàn)象).
4. 向吹干的離心管中加入1mL溶解劑,劇烈振蕩復(fù)溶離心管底及內(nèi)壁固體殘留物,然后加入0.3mL配套稀釋液,充分混勻30s后靜置1分鐘至明顯分層;
5. 吸取120ul分層后的下層溶液,此溶液即為待檢液;
6、 實(shí)驗(yàn)步驟
6.1 撕開檢測(cè)卡鋁箔包裝袋,取出檢測(cè)卡,放于平整、潔凈的臺(tái)面上。
6.2 取已準(zhǔn)備好的待測(cè)樣本溶液120ul(5-6滴)加入到金標(biāo)微孔中,等待反應(yīng)2分鐘后,用滴管吹打至完全溶解孔內(nèi)紫紅色物質(zhì),再等待2分鐘,吸取孔內(nèi)90ul(4-5滴)溶液滴加到加樣孔中,加樣后開始計(jì)時(shí);
6.3 按室溫下放置5-8分鐘判斷結(jié)果,其他時(shí)間結(jié)果判讀無效。
7、 結(jié)果判斷
陰性 陽性 無效
陰性:在檢測(cè)窗內(nèi),對(duì)照線(C)出現(xiàn)紫紅色線,檢測(cè)線(T)顯色與對(duì)照線一致或更深,表示樣品中濃度低于檢測(cè)限,或不含有。
陽性:在檢測(cè)窗內(nèi),對(duì)照線(C)出現(xiàn)紫紅色線,檢測(cè)線(T)不顯色或比對(duì)照線淺(備注:5分鐘后,T線明顯顯綠色的可判定為陽性),表示樣品中濃度高于檢測(cè)限。
無效:在檢測(cè)窗內(nèi),對(duì)照線(C)不出現(xiàn)紫紅色線。
8、 注意事項(xiàng)
8.1 過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
8.2 檢測(cè)卡從冰箱中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開,打開的檢測(cè)卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。
8.3 不要觸摸檢測(cè)卡中央的白色膜面。
8.4 取液滴管不可混用,以免交叉污染。
8.5 待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細(xì)菌污染,否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異,F(xiàn)象,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定。
9、 貯藏及保存期
儲(chǔ)藏條件:試劑盒于2-30℃干燥環(huán)境下保存。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。