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“魚”與“熊掌”兼得--淺談DeltaVision Elite活細胞成像系統(tǒng)

瀏覽次數(shù):4579 發(fā)布日期:2014-4-23  來源:東勝創(chuàng)新

我們知道以往的固定組織或固定細胞成像揭示了非常多的自然秘密,給了我們很大的啟示,但現(xiàn)在的科學(xué)研究則希望在最真實的條件下觀察細胞。縱觀顯微鏡的發(fā)展歷史,直到15年前,科學(xué)家主要還是處理死細胞,F(xiàn)在,活細胞研究的重要性已經(jīng)越來越被意識到。


加拿大McGill大學(xué)成像實驗室主任Claire M. Brown表示:“要達到這個研究目的,我們非常需要一個不損壞細胞的封閉環(huán)境、且具有比較理想的成像條件。這一條件尤其對于進行動態(tài)、三維成像的多標(biāo)記樣品來說尤其重要!弊屓烁吲d的是,近年來在光學(xué)設(shè)計、高靈敏檢測器、優(yōu)選探針和先進軟件方面的改善,使得這一切成為可能。今天的活細胞工作站,不僅僅限于觀察,目前的趨勢已經(jīng)從結(jié)構(gòu)或細胞器的分析,轉(zhuǎn)向了功能的相互影響觀察研究。

現(xiàn)在,科學(xué)家可以便利的購買到活組織應(yīng)用的整合新設(shè)備,而不用將系統(tǒng)簡單的拼湊在一起。如GE公司的活細胞工作站DeltaVision Elite提供適用于活細胞成像的高分辨率、高靈敏度、全自動化設(shè)備。通過對活細胞進行實時、長時間的成像,觀察細胞內(nèi)的動態(tài)變化過程,如細胞的有絲分裂、鈣火花傳導(dǎo)、細胞運動和遷移等。同時,搭載全內(nèi)發(fā)射熒光模塊(TIRF)對分子和膜運輸之間的囊泡轉(zhuǎn)運、相互作用成像尤其有用;搭載單分子成像技術(shù),如PALM,STORM等,可實現(xiàn)超高分辨率成像,分辨率可達20nm。在照明波動中,DeltaVision Elite通過TruLight均一照明光學(xué)系統(tǒng),控制光照的強度和均一性。計算機對這些變量的完全控制,確保了精確的、可重復(fù)的成像效果。

DeltaVision Elite通過專利的InsightSSI光源,大幅度的降低光毒性和光損傷,實現(xiàn)對活細胞長達500小時的連續(xù)成像;同時,專利的還原型迭代去卷積技術(shù)保證高分辨率、高靈敏度的圖像獲取。這一系列的專利設(shè)計在保證高質(zhì)量圖像的同時,實現(xiàn)了對活細胞的長時間連續(xù)成像,“魚”與“熊掌”兼而得之。


正在分裂的Hela細胞,其中綠色標(biāo)記微管蛋白,紅色標(biāo)記染色體


另外,專利的UltimateFocus自動對焦系統(tǒng)通過遠紅外激光實時監(jiān)測蓋玻片和物鏡鏡頭之間的距離,保持成像焦平面的穩(wěn)定,防止長時間time-lapse成像過程中跑焦現(xiàn)象的發(fā)生;罴毎囵B(yǎng)環(huán)境控制系統(tǒng)能夠?qū)崟r控制細胞培養(yǎng)的溫度、濕度和CO2濃度,以及整個成像系統(tǒng)的溫度穩(wěn)定性,保證成像的精確和可重復(fù)性。功能強大的SoftWoRx圖像處理軟件能夠?qū)崿F(xiàn)XYZ-λ(波長)-T(時間)-P(位置)六維活細胞成像、Time-Lapse成像、去卷積、三維重建、視頻電影制作、多點觀察、細胞跟蹤、共定位分析、FRET/FRAP/TIRF成像、熒光強度定量分析等。

目前,活細胞成像方面的進展仍然在不斷涌現(xiàn)?焖俚摹⒉粩喔纳频膭討B(tài)分析方法,將對活細胞內(nèi)部的功能蛋白質(zhì)進行更好的研究。成像專家也在進一步推動原位成像的真實性。人們不僅想去觀察一個動物體中的一個細胞,并且用顯微鏡進行成像,而且也期望看到全貌。你將會看到越來越多的整體動物的成像。對活細胞成像來說,能同時進行多通道成像,并且區(qū)別多重?zé)晒庑盘枌⒆兊迷絹碓街匾?

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