ELISpot實驗操作流程介紹
ELISPOT全名為酶聯(lián)免疫斑點檢測，英文：Enzyme-linked Immunospot Assay。它結(jié)合了細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)（即ELISA技術(shù)），能夠在單細(xì)胞水平檢測細(xì)胞因子的分泌情況。其技術(shù)原理，一句話概括就是：用抗體捕獲培養(yǎng)中的細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，并以酶聯(lián)斑點顯色的方式將其表現(xiàn)出來。
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將細(xì)胞因子特異性單克隆抗體包被于乙醇處理過的PVDF膜板上。具體板子處理和包被方法請參考： |
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將細(xì)胞加入到酶標(biāo)孔中，不同組加不同的刺激劑或者不加刺激劑。 具體細(xì)胞處理方法請參考： |
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細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子與包被抗體結(jié)合。 |
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將多余細(xì)胞除去并洗板后，將生物素標(biāo)記的檢測抗體加入到酶標(biāo)孔中。 | ||
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加入連霉親和素標(biāo)記的酶偶聯(lián)物 |
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加入底物 |
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使用酶聯(lián)免疫斑點讀板儀讀取斑點并分析。信息來源： | ||
閱讀原文：http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2014040021.html
