摘要 目的 :探討5-羥色胺選擇性重?cái)z取抑制劑(SSRI)氟西汀和帕羅西汀對(duì)藥物(MA) 誘導(dǎo)的條件性位置偏愛(ài)效應(yīng)(CPP)的影響。

方法 :采用傾向性實(shí)驗(yàn)程序�！醀istar 大鼠腹腔注射 MA (0. 5 mg ·kg- 1)并訓(xùn)練8d ,d9

測(cè)定大鼠對(duì)伴藥盒的偏愛(ài)效應(yīng)及測(cè)試前30 min 注射不同劑量 (2. 5 - 10. 0 mg ·kg- 1) 氟西汀和帕羅西汀對(duì)該效應(yīng)的影響。

結(jié)果 : 0. 5 mg ·kg- 1的 MA 可以誘導(dǎo)大鼠對(duì)伴藥盒產(chǎn)生顯著的條件性位置偏愛(ài);測(cè)試前注射氟西汀和帕羅西汀均可劑量依賴(lài)性地降低MA 誘導(dǎo)的條件性位置偏愛(ài)效應(yīng)的表達(dá)。

結(jié)論 : 氟西汀和帕羅西汀對(duì) MA 的強(qiáng)化效應(yīng)有抑制作用,提示該類(lèi)藥物有治療藥物精神依賴(lài)性的潛力。

關(guān)鍵詞 右旋藥物，氟西汀，帕羅西汀，條件性位置偏愛(ài)

以藥物 (met hamp hetamine , MA , 俗稱(chēng)冰毒) 為代表的苯丙胺類(lèi)興奮劑在全球的濫用迅速蔓延[1],嚴(yán)重地危害著青少年的身心健康, 因此迫切需要研究其成癮的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制和有效治療方法。中腦邊緣系統(tǒng)多巴胺水平增加是苯丙胺類(lèi)藥物獎(jiǎng)賞效應(yīng)的主要神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)。但是近年來(lái)非多巴胺能神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)[如興奮性氨基酸、抑制性氨基酸、組織胺、5-羥色胺(5-HT)和去甲腎上腺素等在藥物獎(jiǎng)賞效應(yīng)中的作用也引起研究者的關(guān)注[2]。5-HT是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的一種重要神經(jīng)遞質(zhì)。研究表明, 5 - HT 對(duì)苯丙胺類(lèi)興奮劑的獎(jiǎng)賞效應(yīng)有調(diào)節(jié)作用。直接在伏核內(nèi)注射5-HT或促進(jìn)5-HT釋放藥物芬氟拉明(fenfluramine) 能夠降低苯丙胺的條件性獎(jiǎng)賞效應(yīng)[3 ]。氟西汀可以降低大鼠對(duì)獎(jiǎng)賞性大腦刺激的敏感性[4],降低大鼠苯丙胺自身給藥時(shí)的攝藥量[5,6 ]。由于MA比苯丙胺對(duì)5-HT能神經(jīng)系統(tǒng)有更強(qiáng)的作用[7,8],因此,作者認(rèn)為5-HT選擇性重?cái)z取抑制劑(SSRI)-氟西汀(fluoxetine)和帕羅西汀(paroxetine)可能具有調(diào)節(jié)MA 獎(jiǎng)賞效應(yīng)的能力。本文探討了這兩種藥物對(duì)MA 誘導(dǎo)的大鼠條件性位置偏愛(ài)效應(yīng)(CPP)的影響。

1 材料與方法

1. 1 動(dòng)物

Wistar大鼠90只,♂,體重160-180g ,購(gòu)自北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。將動(dòng)物隨機(jī)分組,每組7-8只。實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物在清潔飼養(yǎng)室適應(yīng)7d ,每天抓取一次。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中飲水及進(jìn)食自由。

1. 2 試劑

藥物, 鹽酸氟西汀粉, 鹽酸帕羅西汀粉。以上藥品均用生理鹽水溶解,給藥體積為1ml·kg-1。

1. 3 實(shí)驗(yàn)裝置

CPP 實(shí)驗(yàn)箱主要由隔音箱、位置偏愛(ài)盒(中間由隔板分為等體積的兩個(gè)盒,一側(cè)為黑盒、光滑地板,一側(cè)為白盒、粗糙地板)和計(jì)算機(jī)組成。

1. 4 方法

CPP實(shí)驗(yàn)分為3個(gè)階段: 預(yù)測(cè)試階段、訓(xùn)練階段和測(cè)試階段。

1. 4. 1 預(yù)測(cè)試階段 將偏愛(ài)盒中間隔板打開(kāi),把大鼠放入中間地帶,讓其在偏愛(ài)盒中自由跑動(dòng)15min每天1次,連續(xù)3d。d3用計(jì)算機(jī)記錄50只大鼠在白盒和黑盒的平均停留時(shí)間,確定大鼠的天然偏愛(ài)傾向。然后以非天然偏愛(ài)盒為伴藥盒訓(xùn)練大鼠。

1. 4. 2 訓(xùn)練階段 用隔板封閉黑白盒通道。對(duì)照組動(dòng)物連續(xù)8 d ip 生理鹽水,隔天放入伴藥盒或另一側(cè);MA 組大鼠隔天ip MA 放入伴藥盒,或ip 生理鹽水放入另一側(cè)。動(dòng)物每次在盒中停留時(shí)間為30 min。

1. 4. 3 測(cè)試階段 在訓(xùn)練完成后的d2 進(jìn)行測(cè)試。測(cè)試前將隔板打開(kāi),使大鼠能夠在黑白盒內(nèi)自由移動(dòng)記錄動(dòng)物不給藥狀態(tài)下在白盒內(nèi)的停留時(shí)間 (如預(yù)測(cè)試階段) 。

1. 5 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1. 5. 1 MA 誘導(dǎo)的CPP效應(yīng) 將動(dòng)物分為4組。一組為對(duì)照組,其它3組為MA組,后者分別ip 0.25mg ·kg-1,0.5mg·kg-1,1.0 mg·kg-1的MA。訓(xùn)練完成后的d2測(cè)量動(dòng)物在伴藥盒的停留時(shí)間,評(píng)價(jià)不同劑量MA 誘導(dǎo)大鼠CPP 效應(yīng)的強(qiáng)度。選擇使動(dòng)物對(duì)伴藥盒有明顯偏愛(ài)效應(yīng)的藥物劑量進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn) 。

1. 5. 2 氟西汀和帕羅西汀對(duì) MA 誘導(dǎo)的 CPP 效應(yīng)

表達(dá)的影響 將大鼠分為7組, 按1.5.1中得出的最佳劑量MA訓(xùn)練動(dòng)物。測(cè)試前30 min分別ip生理鹽水(1ml·kg-1)、氟西汀(2. 5 mg ·kg- 1, 5. 0mg ·kg- 1和 10. 0 mg ·kg- 1) 和帕羅西汀 (2. 5mg ·kg- 1, 5. 0 mg ·kg- 1和10.0 mg·kg-1),記錄大鼠在伴藥盒內(nèi)的停留時(shí)間。

1. 6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用 SPSS 統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行單因素方差分析和 t 檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2. 1 大鼠對(duì)位置偏愛(ài)盒的天然偏愛(ài)

在預(yù)測(cè)試階段的 d3 進(jìn)行測(cè)定 , 大鼠在白盒和黑盒的停留時(shí)間分別為 219. 5 s ±s 126. 0 s 和680. 5 s ±s 126. 0 s ( P < 0. 01) , 表明大鼠對(duì)黑盒有天然偏愛(ài),所以采用傾向性實(shí)驗(yàn)程序,在訓(xùn)練階段以大鼠非天然偏愛(ài)的白盒為伴藥盒。

2. 2 MA 誘導(dǎo)大鼠 CPP 效應(yīng)

訓(xùn)練8d后 ,對(duì)照組 (生理鹽水組) 大鼠在白盒的平均停留時(shí)間為187. 7 s ±s 94. 5 s ,而注射不同劑量 MA (0. 25 - 1. 0 mg ·kg- 1, ip ) 的大鼠在白盒的平均停留時(shí)間分別為 454. 1 s ±s 267. 9 s (0. 25mg ·kg- 1, P < 0. 05) 、654. 5 s ±s 73. 7 s (0. 5mg ·kg- 1, P < 0. 01) 和 478. 4 s ±s 198. 3 s (1. 0mg ·kg- 1, P < 0. 05) (圖 1) ,表明動(dòng)物已對(duì)白盒產(chǎn)生 CPP[ F (3 , 27) = 9. 538 , P < 0. 01 ]。其中 0. 5mg ·kg- 1的MA產(chǎn)生的CPP效應(yīng)最明顯, 因此以下實(shí)驗(yàn)采用的MA劑量為0.5 mg·kg-1。

2. 3 氟西汀和帕羅西汀對(duì) MA CPP 效應(yīng)表達(dá)的影

響如圖2所示,測(cè)試前30 min ip生理鹽水后,用0. 5 mg ·kg-1的MA訓(xùn)練的大鼠在白盒的平均停留時(shí)間為634. 8 s ±s 118. 7 s ,表明實(shí)驗(yàn)動(dòng)物已穩(wěn)定建立了對(duì)伴藥盒的偏愛(ài)效應(yīng); 提前 30 min 注射氟西汀劑量依賴(lài)性地降低 MA 誘導(dǎo)的 CPP 效應(yīng)的表達(dá) [ F (3 ,24) = 3. 573 , P < 0. 05 ] , 動(dòng)物在白盒的平均停留時(shí)間分別為449. 0 s ±s 261. 3 s (2. 5 mg ·kg- 1, P < 0. 05) 、 375. 2 s ±s 210. 7 s (5. 0 mg ·kg- 1, P < 0. 05)和 294. 0 s ±s 296. 5 s (10. 0 mg ·kg- 1, P < 0. 01) 。同樣,提前 30 min 注射帕羅西汀也劑量依賴(lài)性地降低 MA 誘導(dǎo)的 CPP 效應(yīng)的表達(dá)[ F (3 , 24) = 7. 787 , P < 0. 01 ] , 動(dòng)物在白盒的平均停留時(shí)間分別為 469. 4 s ±s 277. 8 s (2. 5 mg ·kg- 1, P < 0. 05) 、348. 8 s ±s 272. 3 s (5. 0 mg ·kg- 1, P < 0. 01)和 148. 2 s ±s 131. 8 s (10. 0 mg ·kg- 1, P < 0. 01) 。

3 討論

CPP 實(shí)驗(yàn)是一種用于評(píng)價(jià)藥物精神依賴(lài)性潛力的有效方法, 也可用于研究藥物依賴(lài)性的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制或篩選治療藥物依賴(lài)的有效藥物[9]。ip0.5mg ·kg-1的MA可以誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生對(duì)伴藥盒的CPP效應(yīng),證明該藥具有一定程度的精神依賴(lài)性;一旦建立了穩(wěn)定的CPP效應(yīng),測(cè)試前30 min ip 氟西汀和帕羅西汀劑量依賴(lài)性地減少大鼠在白盒的停留時(shí)間, 表明這兩種藥物具有降低MA CPP 效應(yīng)表達(dá)的作用, 因此增加突觸間隙5-HT濃度能夠降低MA的獎(jiǎng)賞效應(yīng)。中腦邊緣多巴胺系統(tǒng)的多巴胺釋放是苯丙胺類(lèi)興奮劑產(chǎn)生條件性獎(jiǎng)賞效應(yīng)的重要神經(jīng)基礎(chǔ)。

5-HT遞質(zhì)系統(tǒng)和多巴胺系統(tǒng)間存在著相互作用即來(lái)源于內(nèi)側(cè)和背側(cè)中縫核的5 - HT 能神經(jīng)元與中腦來(lái)源的多巴胺能神經(jīng)元有軸突- 軸突連接; 5-HT對(duì)多巴胺介導(dǎo)的行為有拮抗作用, 伏核內(nèi)注射5-HT能夠抑制苯丙胺引起的條件性獎(jiǎng)賞效應(yīng)[7]。5 -HT 重?cái)z取抑制劑不僅能降低成癮動(dòng)物對(duì)苯丙胺的攝入量,也能降低成癮動(dòng)物對(duì)可卡因的攝入量[10],提示5 - HT 對(duì)中樞興奮劑的獎(jiǎng)賞效應(yīng)具有調(diào)節(jié)作用。氟西汀和帕羅西汀是臨床上治療抑郁性疾病的有效藥物, 并且未見(jiàn)濫用報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)證明這兩種藥物能夠劑量依賴(lài)性地抑制MA 誘導(dǎo)的CPP 效應(yīng)表明它們能夠降低 MA 的獎(jiǎng)賞效應(yīng), 因此具有治療藥物成癮的潛在應(yīng)用價(jià)值。