細胞療法新技術(shù)之ACTL療法的簡介、機制及DC細胞的相關(guān)作用
ACTL靶向性抗腫瘤免疫技術(shù)，簡稱ACTL技術(shù)，是目前使用的最新的抗腫瘤生物治療技術(shù)。ACTL腫瘤細胞靶向治療技術(shù)臨床應(yīng)用的典型例子為斯坦曼教授自身晚期胰腺癌的治療和蘋果公司喬布斯晚期胰腺癌的治療。目前已經(jīng)獲得多個歐美及國際專利。
此療法具有多方面優(yōu)點：①AAV病毒是經(jīng)過認證的病毒載體，具有良好的安全性；②腫瘤抗原決定簇誘導(dǎo)CTL精確靶向腫瘤細胞，病毒載體轉(zhuǎn)染效率高，具有高效精準的特性；③適應(yīng)癥廣。因此對于腫瘤的精準治療是集多種優(yōu)勢于一體的細胞治療技術(shù)。
02 ACTL療法機制
基本流程通過采集患者的免疫細胞，在體外用攜帶腫瘤相關(guān)抗原基因的基因工程載體感染單核細胞，在細胞因子的誘導(dǎo)作用下分化為樹突狀細胞（DC細胞），激活細胞毒性T淋巴細胞（CTL細胞），使其在回輸患者體內(nèi)后可以精準識別腫瘤細胞，達到殺傷的目的，而對正常組織細胞無作用。其中CTL的殺傷機制是釋放穿孔素，顆粒酶，裂解靶細胞，通過FasL介導(dǎo)靶細胞的凋亡（如圖1）。
圖1：ACTL療法流程及機制
03 DC細胞作用和培養(yǎng)
DC細胞的功能特點：DC細胞作為抗原提呈細胞，擁有強大的抗原提呈能力，將抗原提呈給免疫細胞激活先天性和適應(yīng)性免疫，是免疫系統(tǒng)的“司令塔”。
DC細胞的培養(yǎng)：
在ACTL療法中，會進行DC的分離培養(yǎng)，目前DC可以從骨髓、外周血和臍帶血的DC前體細胞定向誘導(dǎo)、分化并擴增而得，其中外周血由于取材簡單，所用的細胞因子組合少，是獲取DC的較好途徑。
DC的分化發(fā)育需要多種細胞因子的刺激和培養(yǎng)，GM-CSF能夠促進DC生成，是最早被鑒定出對DC有作用的因子之一，能增殖DC的抗原提呈功能，有助于DC的存活。IL-4作用是促進DC前體細胞分化為CD14-/CD1a-未成熟DC細胞，同時抑制DC前體細胞向巨噬細胞分化，若培養(yǎng)體系中不加IL-4，單核細胞將分化為巨噬細胞。GM-CSF和IL-4的共同作用可使單核細胞定向分化為未成熟的DC。TNF-α/IL-1β/IL-6這三種因子使未成熟的DC分化為成熟的DC，可在無血清的條件下誘導(dǎo)DC的完全成熟，從而制備出可應(yīng)用于臨床的DC。IFN-γ加入可以促進DC的成熟。（如圖2）
圖2：DC分化成熟過程
同立海源生物可提供用于單核細胞分化為DC細胞的GM-CSF, IL-4, TNFα , IL-6, IFN-γ等一系列的細胞因子
細胞因子TNFα(Cat.No.GMP-TL303)在代謝抑制劑放線菌素D存在下，用L929細胞進行細胞毒性測定，比活性＞1.0×107 IU/mg。
細胞因子GM-CSF(Cat.No.GMP-TL302)用TF-1細胞進行細胞增殖實驗測定，有高活性和批次間穩(wěn)定性特點，比活性＞5.0×106 IU/mg。
細胞因子IL-6(Cat.No.GMP-TL512)在刺激TF-1細胞增殖實驗中，顯示出高活性，其比活性＞2.0×107 IU/mg。
完善的GMP質(zhì)量管理體系保證產(chǎn)品的安全性、有效性
❖ SDS-PAGE＞95%
❖ 內(nèi)毒素＜0.1EU/μg
❖ DNA殘留≤100pg/ml
❖ 蛋白殘留≤100pm
❖ 支原體、無菌、外源因子檢測
❖ 理化性質(zhì)，符合規(guī)定
同立海源生物依托B+A級潔凈車間，自主研發(fā)多款可用于T細胞、NK細胞、CIK等免疫細胞和iPSC為代表的干細胞熱門應(yīng)用領(lǐng)域相關(guān)產(chǎn)品，如IL-7, IL-15, IL-21等高活性的GMP級別細胞因子，產(chǎn)品已通過美國FDA備案，可更好的助力臨床研究及IND申報，為您的CAR-T, CAR-NK工藝保駕護航。
