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MSC間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)注意事項及實驗數(shù)據(jù)分享

瀏覽次數(shù):1349 發(fā)布日期:2024-3-11  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
MSC:間充質(zhì)干細(xì)胞,是一群貼壁生長、形態(tài)類似于成纖維細(xì)胞的多能成體干細(xì)胞,存在于臍帶、骨髓和脂肪組織等多種組織中,并且可以分化成多種不同的組織。
 

Q:為什么培養(yǎng)的MSC細(xì)胞會卷邊?
A:細(xì)胞的鋪瓶密度不均勻,把培養(yǎng)瓶放到培養(yǎng)箱的時候可以按照十字法輕輕晃一下,更均勻。

Q:為什么不同品牌的培養(yǎng)基培養(yǎng)效果不一樣?
A:首先,各個品牌的試劑盒使用說明和成分都不同程度有所差異,部分國產(chǎn)品牌的鋪瓶密度在1E4-2E4個/cm2,需要大的細(xì)胞起始量。

同立海源生物的MSC試劑盒套裝建議的鋪瓶密度按照不同的傳代數(shù),P1-P3代4E3-6E3個/cm2,P3-P5代6E3-8E3個/cm2。建議的鋪瓶體積:5mL/T25瓶, 13mL/T75瓶, 30mL/T175瓶。

Q:添加物有絮狀物怎么處理?
A:可以離心去除,3000rpm, 5min

Q:關(guān)于MSC培養(yǎng)的其它注意事項?
A:添加物不要反復(fù)凍融。培養(yǎng)基提前放到室溫。

實驗數(shù)據(jù)分享
1、樣本:凍存的P1代MSC細(xì)胞;
2、實驗組:同立海源生物MSC無血清培養(yǎng)基;對照組:國產(chǎn)競品MSC無血清培養(yǎng)基;
3、傳代時間:72h;
4、鋪瓶密度:P3代以前,4E3-6E3個/cm2,P3代以后,8E3個/cm2;
5、結(jié)論:同立海源生物MSC無血清培養(yǎng)基較競品有更優(yōu)異的擴增倍數(shù)。P2-P3代同立海源生物的擴增倍數(shù)約是競品的3倍(同立海源生物擴增12倍,競品擴增4倍)。相同的鋪瓶密度等實驗條件下,同立海源生物收獲的細(xì)胞數(shù)更多,擴增倍數(shù)更高,為客戶節(jié)約更多成本。
 

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圖1 MSC擴增倍數(shù)對比
 

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圖2 MSC細(xì)胞狀態(tài)
 


臨床研究

  • 在肝炎、肝硬化、肝衰竭等肝病的患者中,MSC可以改善免疫調(diào)節(jié),可激活不同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞功能,維持免疫抑制,進而抑制肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展。

  • 進行疾病治療研究,MSC治療激素耐藥的急性GVHD已經(jīng)進入臨床試驗研究。


干細(xì)胞藥物
至今有1500+關(guān)于MSCs的臨床試驗在Clinicaltrials.gov上注冊,目前全球范圍內(nèi)批準(zhǔn)的符合藥品定義的MSCs產(chǎn)品約10種,適應(yīng)癥包括移植物抗宿主病等。
 

圖片


AMMS®MSC試劑盒套裝2.0適用于原代及凍存間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)擴增,成分明確,穩(wěn)定性高,操作簡單,無需添加谷氨酰胺,無血清,無異源成分,擴增效率高,表型穩(wěn)定。該產(chǎn)品已通過美國FDA的DMF備案(035589),干細(xì)胞藥物臨床實驗最佳選擇。

關(guān)于同立海源
北京同立海源生物科技有限公司,專注細(xì)胞和基因治療(CGT)GMP級原料試劑研發(fā)及生產(chǎn),為CGT用戶提供產(chǎn)品與服務(wù)的整體解決方案。產(chǎn)品涉及細(xì)胞分選磁珠試劑、真核/原核重組蛋白、無血清培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒等。

公司建有3200m2的研發(fā)實驗室及GMP級潔凈車間,包括細(xì)胞分選磁珠開發(fā)平臺、真核與原核蛋白表達工程平臺、無血清培養(yǎng)基開發(fā)平臺,通過ISO13485和ISO9001雙質(zhì)量體系認(rèn)證,部分產(chǎn)品已獲美國FDA DMF

來源:北京同立海源生物科技有限公司
聯(lián)系電話:4000105556
E-mail:cuilimei@seafrom.cn

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