重組抗體的優(yōu)勢及應用
瀏覽次數(shù):6122 發(fā)布日期:2021-3-10
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重組抗體在實驗中的優(yōu)勢可以說是十分突出,也成為了越來越多科研人員的選擇。今天,就讓我們來深入了解一下重組抗體及其優(yōu)勢。
01什么是重組抗體?它們是如何產生的?
重組抗體的生產是在體外完成的,具體來講就是將免疫特異性重鏈和輕鏈抗體基因克隆到高效表達載體,再將這些載體引入表達宿主(例如細菌、酵母或哺乳動物)中,用于生產重組抗體。通常使用傳統(tǒng)單克隆抗體的地方都可以使用重組抗體。
相比之下,單克隆抗體,通常是使用免疫動物的 B 細胞制備永生雜交瘤細胞,分泌所需的抗體。雖然這項技術可大量生產一致性高、特異性強、靈敏度高的單克隆抗體,但是,隨著時間的推移,雜交瘤細胞系會出現(xiàn)遺傳漂變,導致生產的抗體出現(xiàn)輕微變化。目前,高難度靶點,如毒素、核苷酸和膜結合蛋白的抗體很難用這種體外模型生產出來。
02重組抗體的優(yōu)點
重組抗體克服了傳統(tǒng)抗體生產的局限性,可實現(xiàn)最高水平的批間一致性、較高的可重復性,且特異性已經(jīng)確認,且可保證長期供應。
由于重組抗體是從一組獨特的基因表達形成的,所以重組抗體的生產是可控且可靠的?梢员苊怆s交瘤生產過程中的一些問題,如基因丟失、基因突變及細胞系漂移。因此,抗體的批間一致性非常高,可以為您提供研究或藥物研發(fā)研究所需的高可重復性結果。
圖 1.在 western blot 中利用多個樣本類型對我們的抗 Bcl-XL 重組兔單克隆抗體 — ☞
ab178844(左)和引用度較高的競爭產品 Bcl-XL 兔多克隆抗體進行了對比檢測?纯次覀兊☞
蛋白質印跡實驗方案。
采用重組技術,更容易通過抗體工程提高抗體靈敏度。所需克隆的選擇過程發(fā)生在雜交瘤和重組克隆階段,這樣我們能夠選擇最優(yōu)的抗體質量。
為了確保特異性,我們進行了基因敲除驗證,提高您對結果的信任。以下案例證明,
基因敲除樣本沒有出現(xiàn)預期的分子量條帶,因此重組抗體與其他類型抗體之間的特異性存在差異:
圖 2.我們利用基因敲除樣本和野生型樣本對我們的重組 TLE 1 抗體 [EPR9386(2)](左)和單克隆 TLE 1 [OTI1F5] 抗體進行了測試。
由于抗體基因是單獨分離的且序列已知,所以可以進行任何規(guī)模的抗體表達,并且,可以保證抗體長期供應。對長期研究或者針對多個樣本使用同一抗體的研究而言,重組抗體會很棒。
一旦分離出產生抗體的基因,就可以實現(xiàn)無動物成分體外生產。對于使用我們的噬菌體展示技術產生的抗體,其基因也可以用無動物成分的程序分離。
03客戶為什么喜愛我們的重組抗體
50,000 多篇出版物刊載了我們的重組抗體。
- “在長期研究或像我們這樣的服務實驗室中,我們經(jīng)常對許多樣本使用同一抗體。這種情況下,批間一致性非常重要。每次收到新批次的抗體,我都會檢測我的實驗方案。我喜歡 Abcam RabMAb® 的一個原因是,它們總能得出相同的結果,因此,幾乎不需要優(yōu)化。”
- “相較多克隆抗體而言,所有的重組抗體都可以得出漂亮的特異性條帶。它們的質量和得到的實驗結果始終一致,而且用到的蛋白量很少。”
- “之前,我們嘗試過多種 H3K27M 抗體,但有時很難區(qū)分表達 H3K27M 的陽性細胞和非特異性信號。這種抗體(H3K27M RabMAb®)檢測 H3K27M 蛋白時的特異性更強、靈敏度更高,且背景非常低。”
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