PCR方法在人類及動植物疾病基因診斷、食品分析和環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域發(fā)揮著舉足輕重的作用，其靈敏度高、特異性好，是目前最精準的基因診斷方法。然而PCR方法操作起來較復(fù)雜，對儀器和人員要求比較高，不適合基層或現(xiàn)場快速診斷，因此在國內(nèi)的推廣速度并不是很快。

2000年日本學(xué)者Notomi在Nucleic Acids Res雜志上公開了一種新的基因診斷技術(shù)，即 LAMP (Loop-mediated isothermal amplification),中文名為“環(huán)介導(dǎo)等溫擴增反應(yīng)”，受到了世衛(wèi)組織WHO、各國學(xué)者和相關(guān)政府部門的關(guān)注，短短幾年，該技術(shù)已成功地應(yīng)用于SARS、禽流感、HIV等疾病的檢測中，在這次甲型H1N1流感事件中，日本榮研化學(xué)公司接受WHO的邀請進行H1N1 LAMP試劑盒的研制。通過榮研公司近十年的推廣，LAMP技術(shù)已廣泛應(yīng)用于日本國內(nèi)各種病毒、細菌、寄生蟲等引起的疾病檢測、食品化妝品安全檢查及進出口快速診斷中，并得到了歐美國家的認同。LAMP方法的優(yōu)勢除了高特異性、高靈敏度外，操作十分簡單，對儀器設(shè)備要求低，一臺水浴鍋或恒溫箱就能實現(xiàn)反應(yīng)，結(jié)果的檢測也很簡單，不需要像PCR那樣進行凝膠電泳，LAMP反應(yīng)的結(jié)果通過肉眼觀察白色渾濁或綠色熒光的生成來判斷，簡便快捷，適合基層快速診斷。

可以預(yù)見，在未來的基因診斷領(lǐng)域，LAMP方法將占據(jù)大壁江山。
目前，在萬方數(shù)據(jù)庫搜索LAMP文章424篇之多。

 

榮研公司在其網(wǎng)站上提供免費的LAMP引物設(shè)計軟件，一次LAMP反應(yīng)只需要30～60min就能完成，因此針對特定病原的LAMP診斷試劑盒研發(fā)周期較其他的基因診斷方法如PCR、熒光定量PCR等短。配套使用榮研公司提供的LAMP 反應(yīng)液和實時渾濁儀將大大提高研發(fā)效率。

LAMP方法優(yōu)點：靈敏度高（比傳統(tǒng)的PCR方法高2～5個數(shù)量級）；反應(yīng)時間短（30～60min就能完成反應(yīng)）；臨床使用不需要特殊的儀器（試劑盒研發(fā)階段推薦用實時渾濁儀）；操作簡單（不論是DNA還是RNA，檢測步驟都是需將反應(yīng)液、酶和模板混合于PCR管中，置于水浴鍋或恒溫箱中63℃左右保溫30～60min，肉眼觀察結(jié)果）。

LAMP方法缺點：靈敏度高，一旦開蓋容易形成氣溶膠污染，加上目前國內(nèi)大多數(shù)實驗室不能嚴格分區(qū)，假陽性問題比較嚴重，因此我們強烈推薦在進行試劑盒的研發(fā)過程中采用實時渾濁儀，不要把反應(yīng)后的PCR管打開；引物設(shè)計要求比較高，有些疾病的基因可能不適合LAMP方法。

 

目前國內(nèi)基因診斷常采用PCR方法，涉及到PCR儀，該儀器價格國產(chǎn)和進口價格不一，便宜的2～3萬也能買到，貴的20多萬。條件比較好的實驗室和國家機構(gòu)也有嘗試熒光定量 PCR方法的，該方法技術(shù)含量高，必須使用熒光定量PCR儀，價格在20～70萬不等。

LAMP產(chǎn)品在臨床診斷中是不需要特殊儀器的，但臨床使用的成品試劑盒有賴于和國內(nèi)擁有毒株的老師合作開發(fā)針對中國國情的疾病LAMP引物，在研發(fā)過程中由于涉及引物的選擇，引物濃度的調(diào)整，及反應(yīng)溫度和時間的優(yōu)化，需要用一種量化的方式去幫助研究者分析選擇數(shù)據(jù)，因此我們推薦用榮研公司的專利產(chǎn)品LA320C實時渾濁儀。

 

本產(chǎn)品操作方面的便捷性

LAMP方法較其他基因診斷方法，其最大的優(yōu)勢就在于操作的簡便性及對儀器設(shè)備和人員要求低。LAMP操作步驟少，只需按照說明書要求將反應(yīng)液、酶、引物和模板按照規(guī)定的量加入PCR管中，置于水浴鍋或恒溫箱反應(yīng)30～60min，通過肉眼觀察反應(yīng)管是否變?yōu)榘咨珳啙峋湍芘袛嘟Y(jié)果。

 

在日本國內(nèi)，LAMP診斷試劑盒幾乎已經(jīng)取代了傳統(tǒng)的PCR方法，甚至在每個養(yǎng)雞場都配有相關(guān)的LAMP檢測試劑盒。OIE的官方網(wǎng)站上對于很多疾病的檢測方法中，LAMP陸續(xù)成為推薦方法。WHO預(yù)測，到2015年，在疾病的臨床診斷上，LAMP方法將取代目前所用的PCR方法。

 

市場推廣前期：根據(jù)目的不同，主要分為兩類。一是與公司合作開發(fā)試劑盒的實驗室，如CDC、出入境、國家參考實驗室、各高校科研院所及醫(yī)院擁有豐富毒株資源的實驗室。二是廣大科研工作者，由于LAMP方法剛進入中國不久，相關(guān)研究還很少，因此給學(xué)者們發(fā)表高水平文章提供了一個很好的機會和平臺。