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硫酸葡聚糖鈉DSS(4W)誘導結腸炎實驗操作方法

瀏覽次數(shù):589 發(fā)布日期:2024-9-30  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
葡聚糖硫酸鈉(Dextran Sulfate Sodium, DSS)是一種化學合成的多糖硫酸酯,主要由葡糖醛酸單位通過硫酸酯鍵連接而成。其分子式為[C6H7O6Na2O10S]n,分子量在5-500kDa之間。DSS本身對人體幾乎無毒,不能被結腸上皮細胞吸收,但是可以損傷結腸上皮細胞的緊密連接和基底膜,從而增加腸道滲透性,導致腸道菌群和其他抗原進入黏膜下層和體循環(huán),激活免疫炎癥反應,誘導結腸炎癥狀。

硫酸葡聚糖鈉DSS 36000~50000(平均分子量4W) 是常用的一種結腸炎造模劑,可通過損傷結腸上皮細胞,誘導結腸炎癥狀,廣泛用于結腸炎動物模型的建立。

DSS 36000~50000(分子量4W) 誘導結腸炎主要特點如下:
1. 作用機制:DSS不能被結腸上皮細胞直接吸收,但可損傷上皮細胞緊密連接和基底膜,導致腸道滲透性增加,促進腸道菌群和抗原滲入,激活免疫系統(tǒng),誘導炎癥反應。
2. 誘導結腸炎:給予適量DSS可以在小鼠等動物體內(nèi)迅速誘導急性或慢性結腸炎癥狀,表現(xiàn)出典型的體重減輕、稀便、血便、貧血等,病理表現(xiàn)為結腸炎癥滲出和潰瘍。
3. 可控性:DSS誘導的結腸炎癥狀是可逆的,停止DSS治療后可自行愈合。DSS的濃度和給藥劑量可以控制結腸炎的嚴重程度,實現(xiàn)從輕度到高度急性甚至慢性炎癥的誘導。
4. 簡便高效:DSS造模簡單高效,相比之下,需要較長時間誘導的基因敲除等方法更加耗時費力。是結腸炎研究的理想工具。

DSS 36000~50000(平均分子量4W) 誘導結腸炎的典型方案:
1. DSS溶液:DSS粉末用蒸餾水配制成3-5%的溶液,于4°C保存。
2. 給藥方式:在飲用水中添加DSS溶液,使小鼠自由飲用。另外也可灌胃給藥。
3. DSS濃度和時間:3-5%DSS,5-10天,可誘導輕-中度結腸炎;2%DSS,3周左右,可誘導慢性結腸炎。濃度和時間可根據(jù)需要調(diào)整。
4. 評價指標:體重變化、稀便和血便評分、貧血、結腸組織病理學檢查等。

DSS 36000~50000(分子量4W) 誘導結腸炎的操作方法主要如下:
1. DSS溶液的配制:
- DSS粉末于室溫下加熱至全溶,或在60°C水浴中加熱溶解;也可使用磁力攪拌在室溫下溶解。
- 一般配制成3-5%的溶液,除菌過濾后4°C保存,2周內(nèi)使用。
- 確保DSS完全溶解,避免粉末殘留,影響實驗結果。
2. 給藥方式:
- 自由飲用:在飲用水中直接添加DSS溶液,供小鼠自由飲用。此法操作簡單,但DSS攝入量難以準確控制。
- 灌胃給藥:以所需DSS量重組為相應濃度的溶液,每天灌胃給藥1次。此法DSS攝入可控,但對小鼠的創(chuàng)傷較大。
3. DSS處理方案的選擇:
- 急性結腸炎:3-5%DSS,5-10天?烧T導中度至重度急性結腸炎。
- 慢性結腸炎:1-3% DSS,2-4周。通過低劑量長時間的刺激誘導慢性炎癥。
- 濃度和時間可根據(jù)研究需要調(diào)整,從輕度到高度炎癥都可實現(xiàn)。
4. 動物觀察和樣本收集:
- 日常觀察:體重、食欲、糞便狀況等。記錄DSS治療前后的變化。
- 末期處死:收集結腸組織、血液、糞便等樣本用于病理學檢查、生化指標測定等。
- 對照組設置:以PBS代替DSS治療的對照組動物,用于結果比較分析。
5. 結腸炎的評估:體重變化、DSS刺激前后的糞便評分、貧血測試、結腸病理學檢查(炎癥程度、潰瘍數(shù)等)。

常用誘導劑:
HB12089 2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)
HC86040 雨蛙素 Ceruletide
HC80476 半胱胺鹽酸鹽 2-Aminoethanethiol HCl, 用于十二指腸潰瘍造模
HS91679 ;悄懰徕c水合物 Sodium taurocholate hydrate
HS81762 碘乙酸鈉 Sodium iodoacetate,可用于骨關節(jié)炎(OA)動物模型的建立
HT0056 脂多糖LPS Lipopolysaccharides 055:B5
HA1132 硫酸葡聚糖鈉DSS 36000~50000(結腸炎造模用葡聚糖硫酸鈉4W)
來源:上;菡\生物科技
聯(lián)系電話:18018625233
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