豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體檢測卡膠體金法使用說明書
膠體金法
【產(chǎn)品名稱】
通用名:豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體檢測卡(膠體金法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Porcine Circovirus 2 (GICA)
【預(yù)期用途】 豬圓環(huán)病毒病是由豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(Porcine Circovirus 2,PCV2)引起的豬的一種多系統(tǒng)功能障礙性疾病,其臨床表現(xiàn)多種多樣,主要為斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合癥、豬皮炎與腎病綜合征、母豬繁殖障礙等。
本試劑用于檢測豬血液中豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體,可用于豬圓環(huán)病毒Ⅱ型疫苗免疫效果評價。
【原 理】
本試劑采用膠體金免疫層析試驗(GICA)原理制成,樣本加入到加樣孔后與膠體金標(biāo)記物一起沿層析膜移動,若樣本中存在抗PCV2抗體則與膠體金標(biāo)記物及檢測線上的抗原結(jié)合而顯示紫紅色,若樣本中不存在PCV2抗體則不產(chǎn)生顏色反應(yīng)。
【試劑盒組成】
名稱 |
20T/盒 |
40T/盒 |
50T/盒 |
檢測卡(含吸管) |
20T |
40T |
50T |
抗體滴度比色卡 |
1張 |
1張 |
1張 |
說明書 |
1份 |
1份 |
1份 |
【儲存及有效期】 儲存于陰涼干燥處(2-30℃),有效期24個月。
【樣本要求】
1.本檢測卡僅適用于檢測
豬血清/全血樣品。
2.血清:按常規(guī)方法抽取2-3ml血液置潔凈干燥的試管中,靜置約1小時待血液凝固后于4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘(也可將血液靜置約2小時,待血液凝固自然析出血清),分離血清。要求血清清亮,無溶血、無污染。血清樣本短期可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
3.全血:未加抗凝劑的全血樣本應(yīng)在凝固之前檢測;如已發(fā)生部分凝血,請分離血清進行檢測。加抗凝劑的全血樣本請于24小時內(nèi)進行檢測,且勿冷凍;凍融會使紅細(xì)胞破裂溶血,嚴(yán)重影響檢測效果。
【試驗方法】
1.撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上。
2.用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的澄清樣本上清液,垂直而緩慢的滴加6滴(約120ul)到加樣孔內(nèi);全血樣本7滴。
3.室溫下放置10-20分鐘判斷結(jié)果,超過30分鐘的結(jié)果無效。
【結(jié)果判斷】
1.陰性:在觀察孔內(nèi),只有對照線區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫紅色線。
2.陽性:在觀察孔內(nèi),檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現(xiàn)紫紅色線?贵w滴度越高,檢測線(T)顏色越深。
3.無效:在觀察孔內(nèi),對照線區(qū)(C)不出現(xiàn)紫紅色線。
【試驗結(jié)果的解釋】
1 如果該豬未接種過豬圓環(huán)疫苗:
1.1 當(dāng)被檢樣本檢測線(T)處無明顯色帶出現(xiàn),說明被檢測樣本中沒有豬圓環(huán)病毒抗體。如果豬群健康,應(yīng)當(dāng)及時進行豬圓環(huán)疫苗接種。如果出現(xiàn)相應(yīng)急性癥狀,則不能排除有豬圓環(huán)病毒感染。
1.2 當(dāng)被檢樣本檢測線(T)處有明顯色帶出現(xiàn),則該豬有可能為野毒感染或既往感染,需結(jié)合臨床及其他方法進行分析。
2 如果該豬已接種過豬圓環(huán)疫苗:
2.1 當(dāng)被檢樣本檢測線(T)條帶的色澤較對照卡中1:40效價對應(yīng)色澤深時,說明豬圓環(huán)病毒抗體的滴度較高,已達到保護水平。
2.2 當(dāng)被檢樣本檢測線(T)條帶的色澤較對照卡中1:40效價對應(yīng)色澤淺時,說明豬圓環(huán)病毒抗體效價未達到保護滴度,建議進行疫苗補種。
【試驗方法的局限性】
該試驗僅用于定性檢測豬圓環(huán)病毒抗體,根據(jù)檢測線顯色深淺可作抗體水平強、中、弱的粗略評估。
【注意事項】
1.試驗前請仔細(xì)閱讀說明書,本產(chǎn)品提供的各種試劑僅供本實驗用。
2.請勿使用
其他動物血清等非
【樣本要求
】的液體作為陰性對照。
3.過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
4.檢測卡從冰箱中取出時應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開,打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。
5.待檢樣本應(yīng)新鮮清亮,避免使用污染渾濁、嚴(yán)重溶血、大量血脂、異常粘稠的樣本。
6.避免接觸檢測卡上加樣孔和檢測窗處的層析膜。
7.試驗的廢棄物應(yīng)視為污染物,并按當(dāng)?shù)叵嚓P(guān)規(guī)定妥善處理。