親和層析法(IMAC)是目前最廣泛使用的純化技術(shù),該技術(shù)是基于蛋白表面殘基(組氨酸、半胱氨酸和一些少量的色氨酸等)與過(guò)渡金屬陽(yáng)離子的相互作用而形成螯合,該過(guò)渡金屬 / 蛋白絡(luò)合物再與螯功能基團(tuán)鏈接到瓊脂糖微球上,通常通過(guò)降低 pH值或添加咪唑的方式來(lái)洗脫目標(biāo)蛋白。
低耐壓
ABT 提供兩種螯合微球,使用標(biāo)準(zhǔn)交聯(lián)微球的兩種配基:亞氨基二乙酸(IDA)和次氮基三乙酸(NTA)。
IDA 交聯(lián)瓊脂糖凝膠是由亞氨基二乙酸基團(tuán)通過(guò)間隔臂連接穩(wěn)定的醚鍵組成,IDA 是一種三齒螯合劑,與交聯(lián)的瓊脂糖微球共價(jià)偶聯(lián)。該凝膠載有二價(jià)金屬(Ni 2+ , Cu 2+ , Zn 2+ 或 Co 2+ ), 使得該凝膠(即使可用狀態(tài))成為快速純化帶有組氨酸標(biāo)簽的目標(biāo)蛋白的理想材料。
與其他螯合凝膠相比,如 NTA 瓊脂糖,IDA 具有三個(gè)與金屬離子相互作用的位點(diǎn),而非四個(gè)位點(diǎn)的 NTA。IDA 凝膠通常更易再生,從而可用較低濃度的咪唑更好地洗脫結(jié)合的融合蛋白。
該產(chǎn)品范圍涵蓋四種不同類型的金屬離子和兩種不同密度的基團(tuán)。
- 鎳螯合物可識(shí)別兩個(gè)暴露的目標(biāo)殘基(通常是組氨酸)以實(shí)現(xiàn)有效的蛋白質(zhì)結(jié)合,推薦用于大多數(shù)帶組氨酸標(biāo)簽的蛋白質(zhì)純化。
- 鋅螯合物似乎可以識(shí)別相鄰位置的兩個(gè)暴露的目標(biāo)殘基,建議用于難以分離的蛋白質(zhì)。
- 鈷螯合物可識(shí)別兩個(gè)暴露的目標(biāo)鄰位殘基,這種填料提供了非常好的選擇性。
- 銅螯合物可識(shí)別單個(gè)暴露的目標(biāo)殘留物,這種填料推薦用于難分離的蛋白質(zhì)。
凝膠的選擇取決于每一次純化的目的或優(yōu)先級(jí)(結(jié)合載量 / 特異性)和純化蛋白的類型(純化的難易程度)。
NTA 交聯(lián)瓊脂糖凝膠由用次氮三乙酸(NTA)衍生并負(fù)載二價(jià)鎳離子的瓊脂糖組成,NTA 是一種四配位基的螯合劑,占據(jù)鎳離子配位點(diǎn)中的六個(gè)結(jié)合位點(diǎn)的四個(gè)。其他兩個(gè)配位點(diǎn)通常被可與重組蛋白的組氨酸殘基相互作用的水分子占據(jù),這種結(jié)合最大限度地減少了純化過(guò)程中的金屬脫落。
高耐壓
鎳和鈷是 IMAC 純化中最常用的金屬離子,鎳 /鈷 Rapid Run™ 微球整合了金屬離子結(jié)合的優(yōu)勢(shì)和 Rapid Run™ 凝膠的高流速。這些產(chǎn)品非常適合大規(guī)模的組氨酸標(biāo)簽(His -Tag)蛋白純化。
Nickel Agarose Extrachel™ 是一種預(yù)裝了與配體緊密結(jié)合的鎳離子凝膠,在 20 mM EDTA 中孵育后,鎳仍然與螯合配體結(jié)合。
低耐壓:螯合瓊脂糖微球和預(yù)裝柱
大包裝填料
ABT 提供利用 IMAC 技術(shù)的組氨酸標(biāo)簽(his-tag)蛋白純化填料
- 不同的活化程度以優(yōu)化結(jié)合載量和純化特異性的關(guān)系
- 填料螯合有鎳、銅、鋅或鈷離子,也有無(wú)金屬離子的
- 可用于批量或純化柱純化
預(yù)裝柱
ABT 提供即時(shí)可用的重力柱,預(yù)裝了利用 IMAC 技術(shù)的組氨酸標(biāo)簽(his-tag)蛋白純化填料快速而簡(jiǎn)便的純化
- 快速而簡(jiǎn)便的純化
- 用于重力層析
- 無(wú)需純化系統(tǒng)
- 提供鎳和鈷兩種金屬離子選擇
- 提供 1ml 和 5ml 兩種規(guī)格
低耐壓:鎳NTA瓊脂糖微球和預(yù)裝柱
大包裝填料
鎳 NTA 瓊脂糖填料是由次氮基三乙酸(NTA)衍生,并負(fù)載二價(jià)鎳離子的交聯(lián)瓊脂糖組成。這是還原條件下最常用的 IMAC 填料,因?yàn)轵衔锷嫌兴膫(gè)金屬結(jié)合位點(diǎn),可實(shí)現(xiàn)高蛋白質(zhì)結(jié)合和最小化金屬離子脫落。
- 一步純化
- 高載量
- 原生或變形條件下的純化
- 最小化金屬離子脫離
預(yù)裝柱
5ml 的鎳 NTA 瓊脂糖預(yù)裝柱是預(yù)裝好了的即時(shí)可用的產(chǎn)品,可以用于MPLC、FPLC 和 ÄKTA™ 相關(guān)的設(shè)備上。
ABT 提供1支和5支包裝的 5ml 鎳NTA 瓊脂糖預(yù)裝柱。
高耐壓:Chelating Rapid Run™ 瓊脂糖微球
大包裝填料
鎳、鈷和無(wú)金屬離子的 Rapid Run™ 瓊脂糖微球是專為對(duì)帶有組氨酸標(biāo)簽的蛋白(His-tag)進(jìn)行大規(guī)模下游純化而設(shè)計(jì)的,并且比其他市面產(chǎn)品的流速高 70% 。
- 極易放大且經(jīng)久耐用
- 極高的物理和化學(xué)穩(wěn)定性
- 在最小時(shí)間里達(dá)到優(yōu)異的分辨率
預(yù)裝柱
5ml 的鎳親和預(yù)裝柱用于純化組氨酸標(biāo)簽(his-tag)蛋白。
- 無(wú)需優(yōu)化或改變操作流程
- 優(yōu)異的適應(yīng)性:預(yù)裝柱可用于MPLC、FPLC 和 ÄKTA™ 設(shè)備
- 與市售產(chǎn)品相比,可一步獲取高純度產(chǎn)物
高耐壓:Nickel Rapid Run™
大包裝填料
該填料由帶有次氮基三乙酸(NTA)配基的高度交聯(lián)凝膠制成,該填料可以在含有還原劑的情況下依然具有良好的性能,專為大規(guī)模下游純化組氨酸標(biāo)簽(his-tag)蛋白而設(shè)計(jì)。
高耐壓:Nickel Agarose Extrachel™
大包裝填料
Nickel Agarose Extrachel™ 是一種用聚螯合劑配體制造的高容量凝膠,該產(chǎn)品是專為在 EDTA 和 DTT 存在下工作而開發(fā),不會(huì)造成任何性能上的損失。其特異性和穩(wěn)定性允許一步純化,無(wú)需對(duì)可能會(huì)導(dǎo)致鎳離子脫落的情況的樣品進(jìn)行預(yù)處理。