一,什么是報(bào)告基因
報(bào)告基因:是一種編碼易被檢測(cè)的蛋白質(zhì)或酶的基因,其表達(dá)產(chǎn)物非常容易被鑒定。
傳統(tǒng)基因表達(dá)檢測(cè)方法的問題:
1.通常檢測(cè)基因表達(dá)是通過RT-qPCR或qPCR(mRNA水平)或Western Blot(蛋白水平)
2.操作方法繁瑣,難于檢測(cè)
報(bào)告基因的優(yōu)點(diǎn):
1.蛋白表達(dá)水平檢測(cè)
2.檢測(cè)簡(jiǎn)單,易于定量
二,什么是理想的報(bào)告基因
1.具有酶活性(信號(hào)放大能力
2.蛋白小
3.沒有內(nèi)源性表達(dá),背景低
4.易于定量
5.高靈敏度、線性范圍寬
6.反應(yīng)迅速
三,螢光素酶
在生物醫(yī)藥行業(yè)最主要的報(bào)告基因?yàn)闊晒馑孛笀?bào)告基因。最常見的熒光素酶 (luciferase)基因來源于螢火蟲。螢火蟲螢光素酶在ATP、氧氣和Mg2+存在條件下,催化螢光素的氧化羧化,釋放出光信號(hào),這是任何已知生物發(fā)光系統(tǒng)中效率較高的發(fā)光反應(yīng),因而被設(shè)計(jì)用來檢測(cè)和定量哺乳動(dòng)物細(xì)胞中螢火蟲螢光素酶的表達(dá)。相對(duì)于其他報(bào)告基因,螢光素酶具有諸多優(yōu)勢(shì):檢測(cè)靈敏度高,型號(hào)穩(wěn)定性好,操作方便。
CHASELECTION逐典螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒旨在準(zhǔn)確、靈敏、高效地測(cè)定螢火蟲螢光素酶活性,應(yīng)用高通量藥物篩選、藥物活性檢測(cè)、大規(guī)模啟動(dòng)子功能測(cè)定、信號(hào)通路等研究。
逐典螢光素酶報(bào)告基因
針對(duì)報(bào)告基因檢測(cè)不同的側(cè)重需求,逐典推出了3種檢測(cè)系統(tǒng)。
逐典螢光素酶報(bào)告基因優(yōu)勢(shì):
1. 檢測(cè)靈敏度高,信號(hào)穩(wěn)定性好
HEK293-NFK B-LUC細(xì)胞加入梯度稀釋的TNF 在37C、5%CO條件下刺激6小時(shí)后,分別用增強(qiáng)型、超敏型、穩(wěn)定型檢測(cè)試劑進(jìn)行信號(hào)檢測(cè)。
2. 操作方便
僅需將底物和螢光素酶檢測(cè)緩沖液混合后直接加入到細(xì)胞即可。
3. 穩(wěn)定性好
同時(shí)在10次反復(fù)凍融實(shí)驗(yàn)中,逐典全系列報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒顯示出較強(qiáng)的穩(wěn)定性。