AniView系列多模式動(dòng)物活體成像系統(tǒng)在免疫缺陷猴子模型構(gòu)建中的應(yīng)用
近日，暨南大學(xué)粵港澳中樞神經(jīng)再生研究院廣東省非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室閆森、涂著池研究團(tuán)隊(duì)在嚴(yán)重的聯(lián)合免疫缺陷研究方面取得了新進(jìn)展，相關(guān)研究成果已發(fā)表在國(guó)際期《Signal Transduction and Targeted Therapy》（IF=39.3，一區(qū)Top期刊）。
嚴(yán)重的聯(lián)合免疫缺陷（SCID）包括一系列的遺傳性疾病，會(huì)導(dǎo)致免疫系統(tǒng)的嚴(yán)重惡化。與SCID相關(guān)的關(guān)鍵基因中，IL2RG和RAG1發(fā)揮著關(guān)鍵作用。IL2RG對(duì)T、B和NK細(xì)胞的發(fā)育、分化和功能至關(guān)重要，而RAG1通過在淋巴細(xì)胞成熟過程中促進(jìn)V (D)J重組，在適應(yīng)性免疫中起到重要作用。攜帶這些基因突變的動(dòng)物模型在其免疫系統(tǒng)中表現(xiàn)出明顯的缺陷。非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物（NHPs）是非常適合生物醫(yī)學(xué)研究的模型，因其與人類在基因和生理上具有相似性。胞嘧啶堿基編輯器（CBEs）是精確和有效地修改基因組中的單堿基突變的有力工具，已經(jīng)在人類細(xì)胞、小鼠和作物物種中有成功實(shí)施的案例。
本研究概述了通過使用CBE4max系統(tǒng)使IL2RG和RAG1基因失活來建立免疫缺陷猴子模型。經(jīng)過堿基編輯的猴子表現(xiàn)出嚴(yán)重受損的免疫系統(tǒng)，其特征是淋巴細(xì)胞減少、淋巴器官萎縮和成熟T細(xì)胞缺乏。此外，這些堿基突變的猴子能夠承載和支持人乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，有利于腫瘤生長(zhǎng)�？傊�，作者利用CBE4max系統(tǒng)成功地開發(fā)了一個(gè)具有促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)能力的免疫缺陷猴子模型，可作為推進(jìn)生物醫(yī)學(xué)和轉(zhuǎn)化研究的有價(jià)值的工具，具有巨大的潛力。
本研究概述了通過使用CBE4max系統(tǒng)使IL2RG和RAG1基因失活來建立免疫缺陷猴子模型。經(jīng)過堿基編輯的猴子表現(xiàn)出嚴(yán)重受損的免疫系統(tǒng)，其特征是淋巴細(xì)胞減少、淋巴器官萎縮和成熟T細(xì)胞缺乏。此外，這些堿基突變的猴子能夠承載和支持人乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，有利于腫瘤生長(zhǎng)�？傊�，作者利用CBE4max系統(tǒng)成功地開發(fā)了一個(gè)具有促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)能力的免疫缺陷猴子模型，可作為推進(jìn)生物醫(yī)學(xué)和轉(zhuǎn)化研究的有價(jià)值的工具，具有巨大的潛力。
▲ 圖1 生成堿基編輯猴子過程的示意圖
為了評(píng)估使用堿基編輯猴子作為研究人類腫瘤學(xué)的體內(nèi)模型的可行性，作者將人乳腺癌細(xì)胞（MDA-MB-231-CMV-EGFP-Luc-Puro）引入突變型和野生型猴子。皮下接種1×107細(xì)胞到猴子的腋窩，3周后使用博鷺騰AniView系列多模式動(dòng)物活體成像系統(tǒng)進(jìn)行體內(nèi)腫瘤成像。圖像清楚地顯示了腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的信號(hào)。
▲ 圖2
a.人乳腺癌細(xì)胞在堿基編輯猴子體內(nèi)生長(zhǎng)示意圖
b.熒光顯微鏡圖像顯示人乳腺癌細(xì)胞發(fā)出的GFP信號(hào)
c.動(dòng)物活體成像，觀察腫瘤狀態(tài)
d.對(duì)經(jīng)過堿基編輯的猴子的腫瘤組織的檢查
b.熒光顯微鏡圖像顯示人乳腺癌細(xì)胞發(fā)出的GFP信號(hào)
c.動(dòng)物活體成像，觀察腫瘤狀態(tài)
d.對(duì)經(jīng)過堿基編輯的猴子的腫瘤組織的檢查
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