我們做過(guò)熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè),做過(guò)雙報(bào)告基因檢測(cè),那 6 重報(bào)告基因檢測(cè)排上日程了嗎?他來(lái)了他來(lái)了,BMG LABTECH 帶著 CLARIOstar PLUS 多功能酶標(biāo)儀來(lái)了。CLARIOstar PLUS 光譜掃描功能幫助從 12 個(gè)熒光素酶中找到 6 個(gè)適合多重?zé)晒馑孛阜治觯軌蛱綔y(cè) 5 個(gè)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)反應(yīng)和一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化對(duì)照。
首先,我們使用 CLARIOstar PLUS 發(fā)光光譜掃描功能對(duì) 12 種熒光素酶進(jìn)行了表征,以確定光譜分辨多重信號(hào)的能力。圖 2 顯示了 6 種 D-LUC-(左)和 6 種 CLZN 為底物熒光素酶(右)的結(jié)果。
然后,根據(jù)光譜數(shù)據(jù)以及底物特異性和淬滅能力的結(jié)果,挑選出 6 種熒光素酶進(jìn)行進(jìn)一步測(cè)試。
最后,我們進(jìn)行了驗(yàn)證測(cè)試,檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)證的 siRNA 方法敲除多重螢光素酶測(cè)定的單一成分的直接和間接影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)除了靶基因敲除外,還可以觀察到對(duì)其他成分表達(dá)的明顯影響。
CLARIOstar PLUS 自帶的 LVF 線性漸變?yōu)V光片光柵,不僅可以進(jìn)行熒光光譜掃描,還具備獨(dú)有的化學(xué)發(fā)光光譜掃描能力,是開發(fā)這種多重?zé)晒馑孛笝z測(cè)的理想工具。使用發(fā)光光譜掃描,可以對(duì)多種熒光素酶進(jìn)行表征,以找到可以相互區(qū)分的組別。多色發(fā)射濾光片和試劑注射器的結(jié)合使用,幫助建立了一個(gè)完整的 6 重?zé)晒馑孛笝z測(cè)系統(tǒng)。6 重?zé)晒馑孛笝z測(cè)能極大地?cái)U(kuò)展了我們?cè)u(píng)估 siRNA、配體和化合物處理效果的能力,提供全面理解復(fù)雜生物系統(tǒng)所需的豐富數(shù)據(jù)。
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