緩沖液配制步驟說明
瀏覽次數(shù):198 發(fā)布日期:2023-8-1
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緩沖液(Buffer solution)是一種可抵抗pH值變化的溶液,當(dāng)受到稀釋或向其中添加有限量的酸或堿時(shí),其pH變化不大。它通常由弱酸(Weak acid)與共軛堿(Conjugate base),或弱堿(Weak base)與共軛酸(Conjugate acid)組成。磷酸緩沖鹽溶液(Phosphate Buffered Saline, PBS)是一種生物學(xué)研究中常用的緩沖液,可維持一個(gè)穩(wěn)定的pH環(huán)境。PBS緩沖液由水、氯化鈉、氯化鉀、弱酸KH2PO4和共軛堿Na2HPO4配制而成,通常將pH調(diào)至pH7.4。人體的pH值介于7.35至7.45之間,平均值為7.40。云舟,PBS緩沖液還模擬了人體滲透壓和離子濃度。由于它對細(xì)胞無毒,因此被廣泛用于洗滌細(xì)胞、組織運(yùn)輸和稀釋。尤其在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,常用于胰酶消化細(xì)胞前的細(xì)胞洗滌,徹底去除血清。
除菌如何處理:高壓滅菌
運(yùn)輸條件:室溫
存儲(chǔ)溫度:室溫
pbs緩沖液的配制配方是10X的PBS母液,然后再對其母液進(jìn)行1:10稀釋即可獲得PBS緩沖液。
PBS是磷酸鹽緩沖液(PhosphateBuffer Saline),是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室最常用的緩沖液之一。其主要成分包括:氯化鈉(NaCl)、氯化鉀(KCl)、磷酸氫二鈉(Na2HPO4)和磷酸二氫鉀(KH2PO4)。
配制步驟:
清洗干凈所需燒杯、轉(zhuǎn)子和量筒,向一個(gè)燒杯裝少量去離子水(約100ml)并放入一個(gè)轉(zhuǎn)子后放在稱量天平旁備用;向另一個(gè)燒杯裝約800ml去離子水并在微波爐或者水浴鍋(65°以上均可)中加熱。
注意:由于實(shí)驗(yàn)室所購買的Na2HPO4常常帶有二水、七水或者十二水,與之對應(yīng)的重量分別為1.78g、2.68g、3.58g。
向燒杯中加入預(yù)熱的去離子水,燒杯放置在磁力攪拌器上攪拌溶解。用量筒定容到1L,保存?zhèn)溆谩?br />
取100ml 10X的PBS母液,加入900ml去離子水即可獲得pH=7.4的PBS緩沖液(無需用pH計(jì)校準(zhǔn)PH值)。