A：1.因為目前外泌體的分離手段很難獲得十分純凈而且單一的外泌體樣品，因此要通過多種實驗來評估外泌體樣品的純度和完整性。2.目前沒有任何一個單一實驗可以準(zhǔn)確鑒定外泌體的存在、數(shù)量和完整性。

外泌體的鑒定是為了評估研究者對外泌體分離純化的效果，通過不同的實驗評估富集的外泌體樣品中外泌體的存在、數(shù)量和完整性。這是后續(xù)所有實驗的必要前提。

目前鑒定外泌體主要包括三方面實驗，但是三方面實驗在鑒定外泌體的存在、數(shù)量和完整性上分別存在一些缺陷。

電鏡
可以直觀的看到粒子的形態(tài)，因此可以用于鑒定外泌體的存在和完整性，但是包括支原體、鐵蛋白聚團(tuán)、聚乙二醇蛋白聚團(tuán)、溶酶體等的電鏡圖片與外泌體都十分相似，并且電鏡只能展示局部景象。因此，電鏡成像無法區(qū)分外泌體及形態(tài)相近的納米粒子，且不能反映樣品中的外泌體數(shù)量。

NTA
是一種測算粒子群體直徑分布和粒子數(shù)量的計算方法，它通過光學(xué)原理感知粒子的存在，因此可以確認(rèn)外泌體樣品中的“外泌體”數(shù)量和直徑的群體特征，但是無法確認(rèn)檢測到的粒子是否為外泌體，不能反映粒子形態(tài)，無法將外泌體和其他納米粒子區(qū)分開。因此NTA不能確認(rèn)外泌體的真實存在和外泌體的完整性。

WB
可以鑒定外泌體中存在的特定蛋白，WB檢測外泌體標(biāo)志蛋白可以說明外泌體成分的存在。但是目前的這些標(biāo)志物蛋白只是會在外泌體里富集，而并不是外泌體所特有的，諸如CD63、ALIX等在細(xì)胞中都有，在一些細(xì)胞碎片、溶酶體、胞內(nèi)體中也大量存在。因此，WB僅能證實外泌體成分的存在，無法確認(rèn)外泌體的數(shù)量和完整性。

因此，通過三個實驗的相互佐證來確認(rèn)外泌體的存在、數(shù)量和完整性。當(dāng)且僅當(dāng)三個實驗結(jié)果都正常（即電鏡看到經(jīng)典結(jié)構(gòu)，WB檢測到外泌體標(biāo)志物的富集，NTA測算直徑分布符合外泌體定義），才能確認(rèn)研究者成功的分離純化了外泌體，基于這一成功的分離方法所得到的后續(xù)研究結(jié)果才能認(rèn)為是外泌體相關(guān)的研究結(jié)果。其實，最好完美的鑒定方法應(yīng)當(dāng)是免疫電鏡結(jié)合NTA，但是免疫電鏡的難度過高，因此最終形成了電鏡、NTA和WB三個實驗鑒定外泌體的主流共識。