CPP條件位置偏愛實(shí)驗(yàn)的原理及方法
瀏覽次數(shù):1331 發(fā)布日期:2023-3-7
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cpp條件位置偏愛實(shí)驗(yàn)方法
CPP實(shí)驗(yàn)是評價(jià)覓藥行為或心理渴求的經(jīng)典動物模型,是一種相對簡單的實(shí)驗(yàn)手段。CPP實(shí)驗(yàn)最早報(bào)道見于1940年的黑猩猩嗎啡依賴行為實(shí)驗(yàn),該研究說明嗎啡具有依賴性,能強(qiáng)化動物行為。1957年Beach發(fā)現(xiàn)動物的天然偏好會影響CPP實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1976年Rossi和Reid將停留時(shí)問(Duration Time)作為實(shí)驗(yàn)動物的偏好指標(biāo),到目前為比他們的實(shí)驗(yàn)流程被大家認(rèn)同,并且不斷進(jìn)行修改和完善,自20世紀(jì)80年代以來CPP實(shí)驗(yàn)在藥物濫用研究領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
1.1實(shí)驗(yàn)原理
根據(jù)巴甫洛夫的條件反射學(xué)說,如果把獎賞刺激與某個(gè)特定的非獎賞性條件刺激(如某特定環(huán)境)反復(fù)練習(xí)之后,后者便可獲得獎賞特性。反復(fù)幾次將動物給藥后放在一個(gè)特定的環(huán)境中,如藥物具有獎賞效應(yīng),則特定環(huán)境就會具有了獎賞效應(yīng)的特性,動物在不給藥的情況下依然表現(xiàn)出對該特定環(huán)境的偏愛。
1.2實(shí)驗(yàn)設(shè)備
典型的CPP實(shí)驗(yàn)設(shè)備一般為兩個(gè)或三個(gè)互通的實(shí)驗(yàn)箱,也有四箱或開場式的裝置。每個(gè)箱體設(shè)置的環(huán)境(如箱體顏色、材質(zhì)案有著極大的差異,使動物把不同的環(huán)境線索與給予的實(shí)驗(yàn)處理即非條件刺激進(jìn)行匹配。
1.3實(shí)驗(yàn)方法
CPP實(shí)驗(yàn)主要用嚙齒類動物,如大鼠、小鼠及基因敲除鼠作為研究對象,給藥途徑有腹腔注射、靜脈注射、皮下注射等,主要取決于藥物的特性,以及人類攝藥方式。
CPP實(shí)驗(yàn)一般分為前測、訓(xùn)練和測試。
1.3.1前測階段在正式訓(xùn)練前,去掉箱體之間的隔板,將實(shí)驗(yàn)動物放入實(shí)驗(yàn)箱中使其自由活動,記錄在各箱的停留時(shí)間。這一階段可以使動物熟悉實(shí)驗(yàn)裝置,減少新奇感與應(yīng)激作用,同時(shí)可以測查非條件性偏愛來篩選動物。前測階段在不同實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)各不相同,一般為1-5次,每次10-15分鐘。
1.3.2訓(xùn)練階段箱體之間放置隔板,使動物只能停留在放入的箱體。實(shí)驗(yàn)動物注射藥物后放置在伴藥箱中,20-40分鐘后取出。同天間隔4-8小時(shí)或者第二天的同一時(shí)間進(jìn)行對照實(shí)驗(yàn),
給實(shí)驗(yàn)動物注射對照劑(如生理鹽水),放置在非伴藥箱中,實(shí)驗(yàn)進(jìn)行時(shí)間與前次相同。CPP的形成僅需1一2次訓(xùn)練即可完成,但是多次訓(xùn)練有利于穩(wěn)定實(shí)驗(yàn)動物的狀態(tài)。
1.3.3測試階段訓(xùn)練結(jié)束后,對實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行測試。實(shí)驗(yàn)時(shí)動物不經(jīng)任何藥物處理,將動物放置在過道上,拿走隔板,動物可以在各箱中自由穿梭。測試一般進(jìn)行一次,測試時(shí)間依據(jù)藥物作用時(shí)間而定,一般為15分鐘。
最常用的觀察指標(biāo)是停留時(shí)間,如果實(shí)驗(yàn)動物在給藥箱內(nèi)停留的時(shí)間較長,表示它對該箱有偏愛,說明受試藥物有獎賞作用,動物對其有精神依賴性,反之則認(rèn)為受試藥物有厭惡性。計(jì)算機(jī)輔助CPP實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),可以視頻記錄實(shí)驗(yàn)動物的活動距離和穿梭次數(shù)來衡量動物給藥引起的運(yùn)動活性變化。1984年,Bardo等發(fā)現(xiàn)在大鼠嗎啡誘導(dǎo)的CPP實(shí)驗(yàn)中,與自然消退相比,消退訓(xùn)練后在伴藥箱內(nèi)停留的總時(shí)間不變,而每次進(jìn)入伴藥箱停留的時(shí)間縮短,即穿梭次數(shù)增多,說明自然消退與消退尋練可能對動物的運(yùn)動行為有不同影響。動物在伴藥箱的停留時(shí)間與總活動距離、穿梭次數(shù)之間相關(guān)性很弱,1992年Cun-ningham等學(xué)者將阿片劑注射到伏隔核來對運(yùn)動活性和獎賞相關(guān)反應(yīng)進(jìn)行比較,結(jié)論說明之間無顯著關(guān)聯(lián),這種不相關(guān)或弱相關(guān)現(xiàn)象提示,藥物的獎賞效應(yīng)與運(yùn)動活性可能由不同的腦區(qū)和神經(jīng)機(jī)制控制。