紅細(xì)胞滲透脆性檢測(cè)試劑盒(比色法)使用說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
紅細(xì)胞(Red blood cell,RBC)也稱(chēng)紅血球,是血液中數(shù)量最多的一種血細(xì)胞,脊椎動(dòng)物體內(nèi)通過(guò)RBC運(yùn)送氧氣,RBC同時(shí)還具有免疫功能,在貧血檢查中可通過(guò)紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)來(lái)檢測(cè)紅細(xì)胞膜的缺陷。
雅吉生物紅細(xì)胞孵育滲透脆性檢測(cè)試劑盒(比色法)(Erythrocyte Incubated OsmoticFragility Assay Kit)檢測(cè)原理是將患者血液置于37℃孵育24h,使紅細(xì)胞代謝繼續(xù)進(jìn)行,由于葡萄糖的消耗,儲(chǔ)備的ATP減少,導(dǎo)致需要能量的紅細(xì)胞膜對(duì)陽(yáng)離子的主動(dòng)傳遞受阻,造成鈉離子在紅細(xì)胞內(nèi)聚集,細(xì)胞膨脹,孵育滲透脆性增加,某些有細(xì)胞膜缺陷以及某些酶缺陷的紅細(xì)胞的葡萄糖和ATP很快被耗盡時(shí),孵育滲透脆性明顯增加,該實(shí)驗(yàn)被稱(chēng)為紅細(xì)胞孵育滲透脆性試驗(yàn),主要用于檢測(cè)人、動(dòng)物血液的紅細(xì)胞孵育滲透脆性,并計(jì)算紅細(xì)胞中性脆性(MCF)。 該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
名稱(chēng) |
50T |
Storage |
試劑(A):NaCl Phosphate Buffer |
100ml |
4℃ |
試劑(B):ddH2O |
100ml |
RT |
自備材料:
1、小試管
2、分光光度計(jì)
3、比色杯
操作步驟(僅供參考):
1、取肝素抗凝血2ml ,分成2份,1份立即實(shí)驗(yàn),另1份密閉37C孵育24h后再作實(shí)驗(yàn)。
2、取小試管或恰當(dāng)容器,依次編號(hào),按照下表稀釋成不同濃度。每次檢查應(yīng)設(shè)正常對(duì)照。
試管號(hào) |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
13 |
試劑A(ml) |
3.4 |
3.0 |
2.8 |
2.6 |
2.4 |
2.2 |
2.0 |
1.8 |
1.6 |
1.4 |
1.2 |
0.8 |
0.4 |
試劑B(ml) |
0.6 |
1 |
1.2 |
1.4 |
1.6 |
1.8 |
2.0 |
2.2 |
2.4 |
2.6 |
2.8 |
3.2 |
3.6 |
NACL濃度(g/L) |
8.5 |
7.5 |
7.0 |
6.5 |
6.0 |
5.5 |
5.0 |
4.5 |
4.0 |
3.5 |
3.0 |
2.0 |
1.0 |
3、分別吸取40μl肝素抗凝血加入上述NaCI稀釋液中輕輕混勻,室溫(20°C)靜置30min。
4、將各管再次混勻1次,離心沉淀5min,取上清液。
5、用分光光度計(jì)檢測(cè)540nm波長(zhǎng),以NaCI Phosphate Buffer 作為空白管調(diào)零,測(cè)定
各溶血管的吸光度。
6、計(jì)算溶血百分率∶以1g/L NaCl完全溶血管的吸光度為100%,計(jì)算相應(yīng)氯化鈉濃度
的溶血百分率。溶血百分率(%)=各管吸光值/100%溶血管吸光值×100。
7、計(jì)算紅細(xì)胞中性脆性(MCF)∶以溶血百分率為縱坐標(biāo),以氯化鈉濃度為橫坐標(biāo),作溶血
曲線(xiàn)圖,即為紅細(xì)胞鹽水滲透脆性曲線(xiàn)。在曲線(xiàn)上,50%溶血的氯化鈉濃度為紅細(xì)胞中性脆性(MCF)。
參考區(qū)間︰
未孵育,50%溶血氯化鈉濃度 |
4.00~4.45g/L |
37℃孵育24H,50%溶血氯化鈉濃度 |
4.46~5.9g/L |
注意事項(xiàng):
1、每次檢查應(yīng)設(shè)正常對(duì)照。
2、NaCl Phosphate Buffer pH值及溫度必須恒定,pH改變0.1或溫度改變5%,均可
使結(jié)果偏差0.01%。
3、NaCl Phosphate Buffer采用高純度氯化鈉配制,普通氯化鈉不宜采用。
4、NaCl Phosphate Buffer不要被酸堿污染,同時(shí)注意密閉保存。
5、血液樣品應(yīng)直接滴入液體,不宜沿管壁流入。
6、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期∶12個(gè)月有效,4℃保存。