受傷流血在生活中再平常不過了，基本上很快就會(huì)自愈。不過有這么一群人，卻很難自行止血，甚至自行出血，這是因?yàn)樗麄兓忌狭?ldquo;血友病”。

對血友病的基因治療已有二十多年歷史，近日有一款治療藥物剛成功上市，以2500萬元一劑的價(jià)格一躍成為目前世界上最昂貴的藥物。在這個(gè)研究過程中，自然也少不了動(dòng)物模型的功勞，或許在不久的將來，也會(huì)有越來越多治療血友病的平價(jià)藥物由此產(chǎn)生。

今天就給大家講講血友病及其相關(guān)基因敲除小鼠模型。

什么是血友病
血友病是臨床上常見的伴X遺傳隱性出血性疾病，由F8基因和F9基因突變導(dǎo)致體內(nèi)的凝血因子Ⅷ（Coagulation factor Ⅷ, FⅧ）和凝血因子Ⅸ（Coagulation factor Ⅸ, FⅨ）含量降低或功能異常。80%-85%血友病是由F8異常導(dǎo)致的血友病A，根據(jù)血漿中FⅧ活性水平可將血友病A分為重型（<1%）、中間型（1%~5%）和輕型（>5%）。血友病的主要臨床癥狀為出血表現(xiàn)，患者終身伴有自發(fā)性或外傷后長時(shí)間出血不止的傾向，主要表現(xiàn)為黏膜、肌肉和關(guān)節(jié)出血，甚至顱內(nèi)出血威脅生命。F8基因主要在肝臟中表達(dá)，由于肝臟等組織標(biāo)本不易獲得，目前的研究多使用外周血（即外周血異位轉(zhuǎn)錄本）進(jìn)行F8基因轉(zhuǎn)錄水平的研究。
 

來源：RDDC罕見病數(shù)據(jù)中心

（https://rddc.tsinghua-gd.org/details/gene?gene=GvEJE2）

血友病與基因治療
血友病是先天性出血疾病，凝血因子替代療法已經(jīng)成為預(yù)防和治療出血并發(fā)癥的金標(biāo)準(zhǔn)。然而，常規(guī)靜脈注射給藥的不便以及伴隨關(guān)節(jié)疾病的發(fā)展，人們需要替代治療方案，如延長半衰期的產(chǎn)品，非因子凝血產(chǎn)品，阻斷天然抗凝血?jiǎng)┖突�因治療。而備受矚目則是為血友病患者提供了治愈潛力的基因治療療法，通過在功能基因轉(zhuǎn)移后建立Ⅷ或Ⅸ因子的持續(xù)內(nèi)源性表達(dá)，以取代血友病患者自身的缺陷基因。血友病非常適合進(jìn)行基因治療，因?yàn)檠�液因子水平的小幅增加可與嚴(yán)重感染患者出血表型的顯著改善相關(guān)。例如B型血友病，有研究表明在F9Y38ID小鼠（F9基因的第371位酪氨酸突變?yōu)樘於�氨酸）模型中，體內(nèi)編輯效率為0.56%，即挽救了小鼠的凝血障礙。雖然目前基因治療仍然存在遞送載體和生產(chǎn)工藝優(yōu)化的困難，但該領(lǐng)域正在快速發(fā)展并將改變嚴(yán)重血友病患者的治療模式，同時(shí)也促進(jìn)其他單基因疾病的基因治療的發(fā)展。

賽業(yè)生物血友病小鼠模型
賽業(yè)生物可提供模擬人類A型血友病的動(dòng)物模型（產(chǎn)品編號：C001211，現(xiàn)可提供多周齡多性別F8 KO小鼠現(xiàn)貨），該品系通過基因編輯對C57BL/6J小鼠的F8基因進(jìn)行敲除以達(dá)到蛋白缺失的效果。該疾病模型純合子小鼠可育，純合雌性和半合雄性凝血因子Ⅷ活性與野生型小鼠相比顯著降低，并且凝血時(shí)間延長，表現(xiàn)為典型的A型血友病模型。
 

圖1 F8 KO小鼠FⅧ活性檢測

F8 KO小鼠的FⅧ活性為C57BL/6J野生型小鼠的4%，屬于中度A型血友病模型。（數(shù)據(jù)以 mean±SD表示，***代表p<0.001）

圖2 hFⅧBTX1和hFⅧBTX2基因遞送*
 

18周齡F8 KO小鼠未檢查到FⅧ表達(dá)，F(xiàn)Ⅷ活性為2%；基因遞送后FⅧ表達(dá)量及FⅧ活性均顯著升高。

賽業(yè)生物血液疾病相關(guān)模型