海人酸(kaimic acid, KA)是一 種興奮性氨基酸結(jié)構(gòu)類似物，可誘導(dǎo)神經(jīng)興奮毒性，造成神經(jīng)元細胞死亡，KA模型是模擬人類顳葉癲癇較為理想的動物模型，具有長期的癲癇敏感性，能很好的模擬人類的顳葉癲癇,具有與人類癲癇相似的病理改變和腦電圖改變，而且具有與人類相似的臨床表現(xiàn)，所以KA誘發(fā)的癲癇動物模型被國內(nèi)外廣泛的用于癲癇疾病的實驗研究中。
 

當KA注射劑量過大時死亡率較高，劑量過低時不足以誘發(fā)癲癇發(fā)作以及形成明顯的癇后腦損傷，腦內(nèi)局部給藥相比全身給藥可以省去血-腦脊液屏障的阻隔、減少藥物使用量，還可以減少干擾，所以研究者選擇腦立體定位局部注射KA來制造癲癇模型，通過比較不同劑量KA致癇模型的實驗效果，探索一個合適的注射劑量，為后期的應(yīng)用腦立體定位側(cè)腦室注射KA構(gòu)建癲癇大鼠模型的相關(guān)實驗研究提供參考。

首先將大鼠麻醉固定于腦立體定位儀，參照大鼠腦立體定位圖譜,選擇大鼠右側(cè)側(cè)腦室注射,坐標位置為前囟后1.0mm，中線向右旁開1.5mm，硬腦膜下4.5mm。KA劑量組使用微量注射器分別注射KA  0.5 μg、1 μg、1.5 μg和2 μg (用生理鹽水配制為1 μl), 正常組注射1 μl 生理鹽水，10 min內(nèi)勻速注射完。
 

觀察ＫＡ致癇大鼠的行為學(xué)，并對大鼠癇性發(fā)作強度進行驚厥分級，大鼠造模后第1~7天觀察各組大鼠的一般狀況以及Racine分級,記錄動物死亡數(shù), 統(tǒng)計造模成功率。
 

大鼠造模后第8天，開始進行Morris水迷宮行為學(xué)觀察，選擇將站臺放在第三象限中間，水溫維持在（25士1）℃,實驗共進行6d,包括定位航行試驗和空間搜索試驗。造模后第8~12天的定位航行是把大鼠依次從除第三象限外的其他三個象限面朝池壁放入水池中，記錄每次大鼠找到隱藏在水面下平臺并爬上平臺的時間(逃避潛伏期)�？臻g探索試驗是在造模后第13天時撤去平臺，然后選擇第一象限將大鼠放入水池中，記錄大鼠在60s內(nèi)在目標象限游泳時間以及通過平臺原先位置的次數(shù)。

大鼠于造模第14天經(jīng)苯巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，取腦組織在顯微鏡下觀察海馬的病理學(xué)形態(tài)及神經(jīng)元的缺失情況并照相 。

結(jié)果：

①與正常組比較，注射不同劑量KA模型組均可導(dǎo)致不同程度的腦損傷，KA  1 μg劑量組的造模成功率高于其他各組(P<0.005)。水迷宮實驗在定位航行實驗中，1 μg以上的各劑量組和正常組比較，第4、5天逃避潛伏期出現(xiàn)明顯的延長(P<0.05)，在空間探索實驗中，1 μg以上的各劑量組和正常組比較，穿越原平臺位置次數(shù)明顯減少( P<0.05 );

②與正常組比較, 1 μg以上的各劑量組大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元均出現(xiàn)明顯損傷( P<0.05),大鼠海馬區(qū)MAP2陽性細胞數(shù)降低(P<0.05)。

結(jié)論：KA 1 μg以上的各劑量組相比正常組海馬區(qū)均有不同程度的損傷，但從大鼠的造模成功率相比，注射1 μg比其他組有較大優(yōu)勢，所以將癲癇模型腦內(nèi)注射KA的最佳劑量選定為1 μg,為癲癇動物模型的制備提供參考依據(jù)。

文獻來源：郭振宇、胡蝶、黃鳳等.腦與神經(jīng)疾病雜志2022年第30卷第7期

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