有頭吳腦說行為，大家好，我是吳文遠(yuǎn)。

本文主要探討銀杏內(nèi)脂 GB對(duì)大鼠缺氧模型焦慮樣行為的改善作用。

1材料和方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)成年雄性SD大鼠36只，體質(zhì)量（200±20）g。

1.2試劑與儀器

高原人工實(shí)驗(yàn)艙；EPM實(shí)驗(yàn)儀器（型號(hào)：XR－XG201，上海欣軟信息科技有限公司）；OFT實(shí)驗(yàn)儀器（型號(hào)：XR－XZ301，上海欣軟信息科技有限公司）；SuperMaze動(dòng)物行為學(xué)視頻分析系統(tǒng)（上海欣軟信息科技有限公司）；GB（貨號(hào)：純度＞９８％，上海源葉生物科技有限公司）。

1.3實(shí)驗(yàn)分組

SD大鼠飼養(yǎng)方法及分組將SD大鼠在新環(huán)境下先飼養(yǎng)適應(yīng)3d。所有大鼠均飼養(yǎng)在動(dòng)物房中，保持室內(nèi)溫度（25±1）℃，每天12h晝夜交替，給予同種飼料喂養(yǎng)，可自由進(jìn)食、飲水，采用玉米粒做墊料，每兩天更換一次。實(shí)驗(yàn)時(shí)將大鼠分為3組，分別為平原對(duì)照組、高原缺氧組、GB干預(yù)組，各12只。

1.4模型鼠的制造

GB干預(yù)組大鼠在進(jìn)入高原人工實(shí)驗(yàn)艙之前每天固定時(shí)間給與120mg／kg劑量的GB灌胃，連續(xù)給藥4d后與高原缺氧組大鼠一起進(jìn)入高原人工實(shí)驗(yàn)艙。平原對(duì)照組大鼠一直在動(dòng)物房中常規(guī)條件飼養(yǎng)。高原缺氧模型依托高原人工實(shí)驗(yàn)艙平臺(tái)，以平原常氧條件飼養(yǎng)大 鼠為平原對(duì)照組，以高原人工實(shí)驗(yàn)艙內(nèi)模擬6000ｍ 高原缺氧環(huán)境，高原缺氧組和 GB干預(yù)組在艙內(nèi)6d。

1.5動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)開始之前，徹底清潔實(shí)驗(yàn)裝置，采用窗簾將OFT和EPM與外界環(huán)境分隔開，室內(nèi)暗光（以1.5m距離處能區(qū)分大鼠細(xì)微活動(dòng)的最低亮度為準(zhǔn)）并保持恒亮，室溫20℃左右，測(cè)試過程中保持周圍環(huán)境安靜。設(shè)置好相關(guān)程序參數(shù)，其中攝影記錄為延遲5S記錄，共記錄300s。大鼠出艙后將其放置在實(shí)驗(yàn)室半小時(shí)以適應(yīng)環(huán)境。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，將大鼠背對(duì)實(shí)驗(yàn)者從籠中取出（每次一只大鼠），放入曠場(chǎng)以及十字迷宮裝置的中心，實(shí)驗(yàn)者立刻離開，使用動(dòng)物行為軌跡跟蹤系統(tǒng)采集大鼠在300s內(nèi)的活動(dòng)信息。每只大鼠在完成測(cè)試后，使用75％酒精將設(shè)備擦洗干凈后，再進(jìn)行下一只大鼠的測(cè)試。

1.6實(shí)驗(yàn)中需要記錄的評(píng)價(jià)指標(biāo)

OFT實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)焦慮心理時(shí)，其對(duì)開闊環(huán)境和新異環(huán)境中的恐懼和探究的矛盾心理特性會(huì)反應(yīng)在行為學(xué)上，表現(xiàn)為焦慮越嚴(yán)重，就越傾向于在周邊區(qū)域活動(dòng)，以獲得一種安全感。因此，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)入中央?yún)^(qū)域的次數(shù)越多，在中央?yún)^(qū)域活動(dòng)的時(shí)間越長則說明動(dòng)物的焦慮情緒越低。觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)總路程（ｃM）、進(jìn)入中心區(qū)域時(shí)間（S）、進(jìn)入中心區(qū)域次數(shù)（ｎ）。
EPM實(shí)驗(yàn)主要是利用動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境的探究和對(duì)高懸開臂的恐懼形成矛盾心理來反應(yīng)動(dòng)物的焦慮狀態(tài)。大鼠進(jìn)入開臂時(shí)間和次數(shù)越多，說明大鼠焦慮程度越低，反之則說明其焦慮程度越高。觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)總路程（ｃM）、開臂時(shí)間百分比（％）、開臂次數(shù)百分比（％）。
 

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ｘ珚±S）表示，兩組間比較采用ｔ檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 OFT結(jié)果

由動(dòng)物行為軌跡跟蹤系統(tǒng)采集的大鼠運(yùn)動(dòng)軌跡可以看到高原缺氧組大鼠相較于平原對(duì)照組大鼠在中央?yún)^(qū)域的運(yùn)動(dòng)軌跡明顯減少，而GB干預(yù)組大鼠在中央?yún)^(qū)域的活動(dòng)時(shí)間則和平原對(duì)照組相近。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后可以看出在到運(yùn)動(dòng)總路程、進(jìn)入中心區(qū)域時(shí)間和次數(shù)上，高原缺氧組顯著低于平原對(duì)照組和GB干預(yù)組，組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F＝10.991，P＜0.01），而平原對(duì)照組和GB干預(yù)組之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），GB干預(yù)組與高原缺氧組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。以上結(jié)果說明高原缺氧環(huán)境會(huì)導(dǎo)致大鼠產(chǎn)生焦慮樣行為，而GB的預(yù)給藥可以改善大鼠的焦慮狀態(tài)。

 

由動(dòng)物行為軌跡跟蹤系統(tǒng)采集的大鼠運(yùn)動(dòng)軌跡可以看出高原缺氧組大鼠相較于平原對(duì)照組大鼠在開臂區(qū)的運(yùn)動(dòng)軌跡明顯減少，而GB干預(yù)組大鼠在開臂區(qū)的活動(dòng)時(shí)間則和平原對(duì)照組相近。運(yùn)動(dòng)總路程、開臂區(qū)活動(dòng)時(shí)間百分比和進(jìn)入次數(shù)百分比上，高原缺氧組顯著低于平原對(duì)照組和GB干預(yù)組，組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F＝11.016，P＜0.05），但平原對(duì)照組與GB干預(yù)組之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），GB干預(yù)組與高原缺氧組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

3討論

在OFT中，平原 對(duì)照組大鼠進(jìn)入中央?yún)^(qū)域時(shí)間、次數(shù)以及運(yùn)動(dòng)總路程顯著高于高原缺氧組，在EPM試驗(yàn)中進(jìn)入開臂時(shí)間和次數(shù)百分比 也顯著高于高原缺氧組，組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在 OFT和 EPM試驗(yàn)中，GB干預(yù)組的各項(xiàng)檢測(cè)指 標(biāo)較高原缺氧組有顯著的升高，組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。因此，預(yù)先給予GB可以有效緩解高原缺氧 導(dǎo)致的大鼠焦慮樣行為。