慢性束縛是抑郁癥常用的應(yīng)激模型，可操作性強(qiáng)，重復(fù)性好，可以模擬抑郁癥的核心癥狀——缺乏興趣。本研究從社會應(yīng)激的角度出發(fā)，加入了孤養(yǎng)的應(yīng)激方法，使模型更符合抑郁癥發(fā)病的理論基礎(chǔ)。糖水偏好實(shí)驗(yàn)是評價(jià)興趣缺失的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。本研究結(jié)果顯示，慢性束縛模型組糖水偏愛指數(shù)下降，與正常組相比有顯著性差異，說明抑郁模型成功。

社交回避試驗(yàn)是一種可操作性很強(qiáng)的嚙齒動物社交行為評價(jià)方法。經(jīng)典的方法是三箱社交回避測試。長方形的盒子被兩塊擋板分成三個(gè)盒子，盒子上有門，供動物自由穿梭。該實(shí)驗(yàn)允許受試動物做出接近或逃避的選擇來刺激小鼠，具有較高的靈敏度。動物自由適應(yīng)三個(gè)盒子的環(huán)境后，在兩端的每個(gè)盒子里放一個(gè)鼠籠，其中一個(gè)盒子里裝刺激老鼠，另一個(gè)是空的鼠籠。將受試動物放在中間的箱子里，打開兩邊的門，收集動物接觸受刺激小鼠和空鼠籠的時(shí)間、頻率和潛伏期，以及動物在兩端箱子里的運(yùn)動距離、時(shí)間和進(jìn)入頻率，并據(jù)此描述動物的社會偏好行為。動物行為軌跡分析軟件采用頭-體-尾三點(diǎn)跟蹤法，其精度與攝像頭與被測動物的距離有關(guān)。距離越短，跟蹤越精確。這項(xiàng)研究是基于三箱法，有一些變化。兩個(gè)鼠籠放在一個(gè)方形盒子的對角，方形盒子的長度是三個(gè)盒子結(jié)構(gòu)的1 /2，這樣可以降低攝像頭的高度，動物行為軌跡分析軟件可以更精確地跟蹤動物的頭、身、尾三個(gè)點(diǎn)。 測試方法
將動物隨機(jī)分為正常組和慢性束縛加孤養(yǎng)組，每組10只。在模型組，動物被飼養(yǎng)在一個(gè)籠子里。關(guān)于長期約束的方法，請參考參考文獻(xiàn)。將動物置于50毫升離心管中(在離心管上燒幾十個(gè)直徑為2毫米的孔以通氣)，每天束縛4小時(shí)(10: 00 ~ 14: 00)，共35天。A組:每籠5只正常動物，置于另一個(gè)房間，無任何干預(yù)。造模后進(jìn)行糖水偏好試驗(yàn)和社交回避實(shí)驗(yàn)。

動物行為分析軟件
VisuTrack動物行為跟蹤軟件（上海欣軟，中國）自動實(shí)時(shí)跟蹤動物的軌跡數(shù)據(jù)，計(jì)算動物在箱體內(nèi)的活動情況和接觸行為。

糖水偏愛測試
根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，糖水偏好測試方法分為訓(xùn)練期和測試期。在訓(xùn)練期間，動物在最初的24小時(shí)內(nèi)被給予兩瓶1%蔗糖水、一瓶1%蔗糖水和一瓶純水。測試前不禁食不喝水。在測試期間，動物還被給予一瓶1%的蔗糖水和一瓶純水15小時(shí)。為了避免位置偏好的影響因素，在測試中間，交換兩個(gè)瓶子的位置。測試結(jié)束后，計(jì)算糖水喜好指數(shù)(糖水喜好指數(shù)=糖水消耗量/總液體消耗量× 100%)。

社交回避實(shí)驗(yàn)
動物適應(yīng)試驗(yàn)室1小時(shí)后，進(jìn)行社交回避實(shí)驗(yàn)。根據(jù)文獻(xiàn)記載，首先將動物置于50 × 50 × 50 cm的方形開口箱中，自由適應(yīng)5 min。測試時(shí)，在敞開的箱子的一個(gè)角落里放一個(gè)空的鼠籠，在對面的角落里放一個(gè)同樣的鼠籠，在鼠籠里放一個(gè)陌生人。籠子上有圓孔，實(shí)驗(yàn)小鼠和刺激小鼠可以通過氣味接觸。將實(shí)驗(yàn)大鼠置于開口箱中，用VisuTrack行為追蹤系統(tǒng)記錄實(shí)驗(yàn)大鼠在10分鐘內(nèi)接觸空籠和刺激籠的時(shí)間和頻率，以及首次接觸籠的潛伏期。實(shí)驗(yàn)結(jié)束，取出實(shí)驗(yàn)小鼠，放入籠子。偏好指數(shù)=實(shí)驗(yàn)大鼠暴露于刺激籠子的時(shí)間/暴露于空籠子的時(shí)間。接觸行為為主動嗅聞，定義為實(shí)驗(yàn)小鼠鼻尖與籠子的距離在2 cm以內(nèi)。

總結(jié)
鑒于抑郁癥臨床表現(xiàn)的多樣性，應(yīng)激抑郁動物模型的行為學(xué)評價(jià)也逐漸趨于多樣化，結(jié)合經(jīng)典評價(jià)方法形成了二維評價(jià)體系。社會能力，尤其是社交能力，在應(yīng)激抑郁動物模型的行為評價(jià)中備受關(guān)注，社交回避實(shí)驗(yàn)在應(yīng)激抑郁模型的行為評價(jià)中可能具有與強(qiáng)迫游泳和懸尾實(shí)驗(yàn)同樣重要的價(jià)值。研究表明，社交回避實(shí)驗(yàn)和懸尾實(shí)驗(yàn)有很好的相關(guān)性。另一方面，丙咪嗪、地昔帕明等抗抑郁藥能明顯改善動物模型的社會能力，提示其具有良好的預(yù)測效度。本研究將環(huán)境應(yīng)激和社會應(yīng)激因素相結(jié)合，建立慢性束縛和孤兒養(yǎng)育模型，觀察社會回避實(shí)驗(yàn)對社會行為的影響。結(jié)果表明，慢性束縛模型組受刺激小鼠的探索時(shí)間和次數(shù)明顯減少，探索潛伏期明顯延長，社會偏好指數(shù)明顯下降，表現(xiàn)出一定程度的社會回避。這與Van等人報(bào)道的結(jié)果一致，即簡單的慢性束縛可以導(dǎo)致小鼠的社交回避。

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