人源化小鼠模型作為一個創(chuàng)新型研究平臺，為轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)及臨床前研究提供了特殊的、難以替代的研究角度。
 
但是，對于剛剛接觸這類模型的研究人員而言，難免會產(chǎn)生一些疑問。今天，杰克森實驗室就精選了一些較為常見的問題，幫大家解答！


01、什么是人源化小鼠？
 
“人源化”這個詞有著多重含義。從廣義上說，人源化小鼠是指攜帶有已植入的人體組織或細(xì)胞（例如，植入免疫細(xì)胞或腫瘤組織）或可表達(dá)人基因（以轉(zhuǎn)基因隨機(jī)整合、靶向敲入突變或外顯子交換等方式引入）的小鼠。
 
今天我們提到的人源化小鼠是指已植入從臍帶血分離出的CD34+造血干細(xì)胞 (HSC) 的小鼠。這些被植入的HSC會遷移至宿主小鼠的骨髓中，再經(jīng)多譜系分化，成為各大類免疫細(xì)胞。通過這種方法可以構(gòu)建一個強(qiáng)大的平臺，讓我們可以在小鼠中去研究類人免疫系統(tǒng)。
 
 
02、為什么CD34+造血干細(xì)胞供體很重要？
 
CD34+是一種細(xì)胞表面標(biāo)志物，用于鑒別有多譜系分化潛能的造血干細(xì)胞。此類細(xì)胞多存在于新生兒的臍帶血中。臍帶血供體的變異性是基于CD34+ HSC人源化小鼠的研究中需要面對的一個現(xiàn)實。
 
已有數(shù)據(jù)顯示，來自不同供體的HSC在移植入小鼠后的分化發(fā)育情況往往不同，對免疫檢測點抑制劑或者其他免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑等藥物的應(yīng)答也存在差異。
 
那么，如何在實驗中解決這一問題，避免假陰性的風(fēng)險呢？我們建議實驗人員采用植入取自2～4例臍帶血供體（非混合）的HSC小鼠開展研究，并且每個實驗組應(yīng)包含不同供體。這種方法有助于您根據(jù)已知的變異性進(jìn)行研究設(shè)計，從而更好地檢測療法的應(yīng)答情況。

 
03、JAX通常采用哪些宿主品系進(jìn)行人源化處理？
 
要將原代人組織植入小鼠中，作為宿主的小鼠需要有嚴(yán)重免疫缺陷，以避免其對非自身組織產(chǎn)生排斥反應(yīng)。JAX的NSG™小鼠免疫缺陷來自三方面：
▲ NOD近交背景削弱了其先天免疫功能，同時NOD小鼠具有獨特的Sirp α等位基因，與人HSC更具親和性。
▲ Prkdc^scid突變阻止了T細(xì)胞和B細(xì)胞的成熟，導(dǎo)致小鼠獲得性免疫系統(tǒng)喪失。
▲ Il2rgtm1Wjl突變阻斷了6種不同細(xì)胞因子的信號傳導(dǎo)，并導(dǎo)致小鼠缺乏功能成熟的 NK 細(xì)胞。而小鼠NK細(xì)胞的存在一直是 HSC 植入的關(guān)鍵屏障。
 
人源化NSG™小鼠是研究T細(xì)胞反應(yīng)的優(yōu)質(zhì)平臺，而攜帶有不同人細(xì)胞因子轉(zhuǎn)基因的 NSG™變異品系可用于促進(jìn)特定細(xì)胞群的分化。NOD.Cg-Prkdc^scid Il2rg^tm1WjlTg^{(CMV-IL3,CSF2,KITLG)1Eav/MloySzJNOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl} (NSG™-SGM3) 能夠增強(qiáng)髓系和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的植入。NOD.Cg-Prkdc^scid Il2rg^tm1Wjl Tg(IL15)1Sz/SzJ(NSG™-IL15) 更有利于人NK細(xì)胞的發(fā)育。
 
目前，JAX可提供40多種NSG™變異品系。其中大部分品系均可通過植入CD34+ HSC來支持特定的細(xì)胞群或相互作用，從而進(jìn)一步優(yōu)化實驗系統(tǒng)。這將幫助您實現(xiàn)無限可能！
 
 
04、如何管理人源化小鼠？人源化小鼠是否免疫功能正常？
 
盡管CD34+ HSC人源化小鼠確實已具備類人免疫系統(tǒng)，但這些免疫系統(tǒng)的功能并不完善。處理這些小鼠時要像對待重度免疫缺陷品系一樣非常謹(jǐn)慎。關(guān)于如何飼養(yǎng)重度免疫缺陷品系的小鼠，您可以通過文末的聯(lián)系方式咨詢JAX技術(shù)支持，我們很樂意為您提供相應(yīng)的資源和幫助。此外，也建議您深入了解所在機(jī)構(gòu)對飼養(yǎng)植入人組織的小鼠有何要求。
 
 
05、從何獲取小鼠“人源化”的方法？
 
以下列出了一些發(fā)表的文章，其中介紹了構(gòu)建人源化NSG™小鼠的研究方案和注意事項： 

◎ McDermott SP, et al.2010.Comparison of human cord blood engraftment between immunocompromised mouse strains.Blood.Jul 15;116(2):193-200 [PubMed ID: 20404133]

◎ Brehm MA, et al.2010.Parameters for establishing humanized mouse models to study human immunity: analysis of human hematopoietic stem cell engraftment in three immunodeficient strains of mice bearing the IL2rgamma(null) mutation.Clin Immunol.Apr;135(1):84-98.[PubMed ID: 20096637]

◎ Pearson T, et al.2008.Creation of "humanized" mice to study human immunity.Curr Protoc Immunol.May; Chapter 15:Unit 15.21.[PubMed: 18491294]
 
 
 
CD34人源化的小鼠的構(gòu)建周期通常在12周左右，在操作上也有一定的難度。在自行構(gòu)建時，往往為項目帶來風(fēng)險，同時也對研究人員在實驗規(guī)劃、流程管控上提出了更高的要求。

作為CD34人源化小鼠研究的先行者，JAX致力于為全世界的科研人員提供優(yōu)質(zhì)、穩(wěn)定的人源化小鼠模型。為了減少研究人員的等待期，JAX的體內(nèi)藥效服務(wù)團(tuán)隊一直持續(xù)構(gòu)建CD34+人源化小鼠，大部分時候我們的各類人源化模型都有現(xiàn)貨供應(yīng)，國內(nèi)訂購僅需運輸和隔離的時間。