Pippin Pulse脈沖場電泳系統(tǒng)在大分子DNA片段分離中的應(yīng)用
瀏覽次數(shù):1423 發(fā)布日期:2022-5-10
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Pippin Pulse脈沖場電泳系統(tǒng)
—高性價比的大分子DNA檢測設(shè)備
關(guān)于脈沖場電泳
長讀長測序(又稱三代測序)、合成生物等諸多技術(shù)應(yīng)用都涉及對超長DNA片段的分離與分析。普通的瓊脂糖凝膠電泳是借助瓊脂糖凝膠的分子篩作用,核酸片段因其分子量或分子形狀不同,電泳移動速度有差異而分離。然而這項技術(shù)一般只能分離10 kb以下的小分子DNA,更大的DNA分子用普通瓊脂糖凝膠電泳無法達(dá)到分離的目的,從而限制了染色體DNA的分離、大片段基因組文庫構(gòu)建、生物物種鑒定、病原微生物基因分型、人類染色體內(nèi)切酶物理圖譜分析等方面的研究。而脈沖電場技術(shù)通過切換凝膠內(nèi)的電場方向,能夠驅(qū)使DNA分子在凝膠內(nèi)前后方向來回運(yùn)動,有效地降低大分子核酸片段的遷移速率,同時由于小分子核酸片段改變方向的速率要比大分子核酸片段快,因此通過脈沖場電泳技術(shù),可以有效將大分子DNA片段進(jìn)行分離和分析。
Pippin Pulse脈沖場電泳系統(tǒng)
美國Sage Science公司的Pippin Pulse脈沖場電泳系統(tǒng)可對長達(dá)430kb的超長DNA片段進(jìn)行高效的電泳分離,而且儀器體積小巧不占空間。用戶可通過PC端選擇預(yù)設(shè)程序(如下圖)或自定義程序進(jìn)行大分子DNA片段的脈沖場凝膠電泳分離,程序可自定義使用戶的應(yīng)用更加廣泛和靈活。
使用Pippin Pulse對大分子DNA進(jìn)行電泳分離后的結(jié)果如下圖所示:
應(yīng)用案例1:
2020年發(fā)表在Nature Biotechnology上的一篇文獻(xiàn)中,研究人員對無角牛進(jìn)行基因組測序組裝和表型分析。其中Pippin Pulse用于牛肝臟基因組提取后的質(zhì)控以及打斷后(50kb)片段分布質(zhì)控,隨后聯(lián)合Nanopore測序平臺進(jìn)行文庫構(gòu)建和下游測序分析。
應(yīng)用案例2:
2022年發(fā)表在預(yù)印本網(wǎng)站BioRxiv Preprint上的另外一篇文獻(xiàn)中,研究人員對存在于牛蠅體內(nèi)的金黃色葡萄球菌引起牛皮膚病的致病機(jī)理進(jìn)行研究。其中Pippin Pulse用于細(xì)菌基因組提取后、文庫制備前的片段分布質(zhì)控,隨后聯(lián)合Illumina和Nanopore測序平臺進(jìn)行文庫構(gòu)建和下游測序分析。
文章鏈接:https://doi.org/10.1101/2022.03.11.483979
附:Pippin Pulse近三年部分發(fā)表文獻(xiàn)list
期刊 |
文獻(xiàn)名稱 |
合作平臺 |
物種類型 |
Nature Scientific Reports |
Epitachophoresis is a novel versatile total nucleic acid extraction method |
Roche illumina |
FFPE組織樣本肺癌細(xì)胞系 |
Nature Biotechnology |
Genomic and phenotypic analyses of six offspring of a genome-edited hornless bull |
Naonopore |
牛 |
Nature Communications Biology |
Telomere-to-telomere gapless chromosomes of banana using nanopore sequencing |
Naonopore |
香蕉 |
G3 Genes Genomes Genetics |
The Genome Sequence of the Octocoral Paramuriceaclavata – A Key Resource To Study the Impact of Climate Change in the Mediterranean |
Naonopore |
珊瑚 |
BioRxiv Preprint |
The role of Staphylococcus agnetis 1 and Staphylococcus hyicus in the pathogenesis of 2 buffalo fly skin lesions in cattle |
Naonopore illumina |
金黃色葡萄球菌 |
BioRxiv Preprint |
A compendium of novel genomics technologies provides a chromosome-scale 1 assembly and insights into the sex determining system of the Greenland Halibut |
PacBio |
比目魚 |
Giga Science |
Canfam GSD: De novo chromosome-length genome assembly of the German Shepherd Dog (Canis lupus familiaris) using a combination of long reads, optical mapping, and Hi-C |
PacBio |
牧羊犬 |
G3 Genes Genomes Genetics |
De novo whole-genome assembly and resequencing resources for the roan (Hippotragus equinus), an iconic African antelope |
10×Genomics |
羚羊 |
BioRxiv Preprint |
Genomic resolution of cryptic 1 species diversity in chipmunks |
10×Genomics |
金花鼠 |
Prenatal Diagnosis |
Rapid prenatal diagnosis of Facioscapulohumeral Muscular Dystrophy 1 by combined Bionano optical mapping and karyomapping |
illumina |
人產(chǎn)前篩查 |
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