我們在實(shí)驗(yàn)過程中，使用拉制儀時(shí)難免會(huì)遇到各種疑問：

水平拉制儀和垂直拉制儀有什么不同？哪個(gè)更好用呢？
玻璃微電極的阻抗如何保持穩(wěn)定？
使用到什么程度需要更換加熱片？……

別擔(dān)心，本期九大常見問題解答，讓你的困擾輕松解決！

Q1：拉制儀的拉制原理是什么？
依據(jù)加熱源而分，常見加熱源為鉑銥合金加熱片，較少為二氧化碳激光。固定玻璃管后，通過對鉑銥合金加熱片接通恒定電流產(chǎn)生高溫從而融化插入合金片中的毛細(xì)玻璃管；通過重力作用或者施加額外拉力將中間融化的毛細(xì)玻璃管向兩側(cè)分步拉斷成尖端對稱的兩個(gè)玻璃微電極；通過調(diào)節(jié)拉制參數(shù)（熱量、拉力、速度、定時(shí)/延時(shí)），拉制出不同尖端形狀的玻璃微電極。

Q2：可以在哪些實(shí)驗(yàn)場景中用到拉制儀？
場景一為電生理相關(guān)的刺激和記錄微電極的制備，主要是檢測離子通道微弱生物電信號的膜片鉗實(shí)驗(yàn)；場景二為顯微注射實(shí)驗(yàn)所用注射針的制備，包括細(xì)胞核注射、斑馬魚注射、線蟲注射、胞漿內(nèi)精子注射、病毒腦立體定位注射等；場景三為細(xì)胞選擇、采集、轉(zhuǎn)移及吸取所用微電極的制備；場景四為微流控芯片技術(shù)中液流管路及液流控制系統(tǒng)制備；場景五為新型印刷電路及3D打印技術(shù)中噴頭的制備等。

Q3：水平拉制儀和垂直拉制儀有什么區(qū)別？
垂直拉制儀，使用加熱絲并接通電流對玻璃管中部加熱并達(dá)到熔點(diǎn)，依靠重力的作用拉斷玻璃管。操作簡單，但拉制顯微注射用電極較為困難。

水平拉制儀，通常采用微控制器控制其拉制過程，將玻璃管兩端水平固定，加熱其中部，利用電動(dòng)力或彈力作單次或多次拉制，玻璃管兩端同時(shí)受力從而拉斷�？赏ㄟ^調(diào)節(jié)拉制參數(shù)（熱量、拉力、速度、定時(shí)/延時(shí)），拉制出滿足更多不同需求的玻璃微電極。總體來說，水平拉制儀優(yōu)于垂直拉制儀，控制比較精確，拉出的電極參數(shù)比較穩(wěn)定，而且電極尖端口徑及錐體形狀變化較小。

Q4：提供的注射類拉制模板沒有滿足需求，如何調(diào)試參數(shù)獲得目標(biāo)微電極？
主要方法是在使用拉制模板的基礎(chǔ)上對單個(gè)參數(shù)或多個(gè)參數(shù)進(jìn)行調(diào)整。一般拉制儀提供多個(gè)實(shí)驗(yàn)場景的拉制模板，涵蓋了膜片鉗實(shí)驗(yàn)及各類顯微注射實(shí)驗(yàn)。

變長調(diào)試：優(yōu)先增加速度、其次是熱量。注意觀察電極形態(tài)，當(dāng)達(dá)到某一值后，電極形態(tài)不再發(fā)生變化，此時(shí)可同時(shí)增加速度和熱量。

變長變硬：①先調(diào)整長度，然后修剪；②同時(shí)改成定時(shí)模式，設(shè)置為1，拉力最好為0。

變短調(diào)試：優(yōu)先降低速度、其次是熱量。注意觀察電極形態(tài)，當(dāng)達(dá)到某一值后，電極形態(tài)不再發(fā)生變化，此時(shí)可同時(shí)降低速度和熱量。

Q5：玻璃微電極的阻抗如何保持穩(wěn)定？
①儀器檢測：開機(jī)預(yù)熱十分鐘左右，檢查加熱片、玻璃管及噴氣孔的相對位置是否保持正確，測試軟化點(diǎn)后開啟夾鉗預(yù)熱模式。

②參數(shù)調(diào)試：首先膜片鉗微電極拉制一般是4步或5步循環(huán)；其次速度中值的調(diào)試能確保循環(huán)次數(shù)的穩(wěn)定，從而保證阻抗的穩(wěn)定。具體來說，以推薦參數(shù)為基礎(chǔ)，增加或減少速度，以得到不同的循環(huán)次數(shù)，找到循環(huán)4次和5次的速度區(qū)間，并得到對應(yīng)的速度中值，測試循環(huán)4次和循環(huán)5次的速度中值對應(yīng)的阻抗，并與目標(biāo)阻抗比較，選擇阻抗更接近目標(biāo)阻抗的速度中值進(jìn)行調(diào)試。
 

Q6：不同型號的加熱片應(yīng)該如何選擇呢？
以瑞沃德MP-500水平拉制儀為例，顯微注射類實(shí)驗(yàn)推薦使用2545B型號，該加熱片最寬，便于拉出較長的尖端；顯微注射實(shí)驗(yàn)與膜片鉗實(shí)驗(yàn)（＞5MΩ）推薦使用3030B型號；膜片鉗實(shí)驗(yàn)（1-10MΩ）推薦使用3025B型號，該加熱片最窄，便于拉出較短較硬的尖端。

Q7：使用到什么程度需要更換加熱片？
觀察到加熱片表面有明顯的變形，燒痕或劃痕等情況，可以考慮更換加熱片。根據(jù)使用頻繁程度，一般3-6個(gè)月亦可考慮更換。

Q8：什么時(shí)候需要測試軟化點(diǎn)呢？
軟化點(diǎn)的含義是能夠使加熱片產(chǎn)生足夠熱量從而軟化玻璃管的電流值。其中提及到兩個(gè)重要物件，加熱片及玻璃管。因此當(dāng)使用的加熱片或者玻璃管的型號發(fā)生改變時(shí)均需要重新測試對應(yīng)的軟化點(diǎn)。一般測試3次，取最大值即可。

Q9：干燥劑什么狀態(tài)下需要更換呢？
干燥劑干燥狀態(tài)下為藍(lán)色或者藍(lán)紫色，吸潮后變成粉紅色。當(dāng)干燥劑大部分為粉紅色時(shí)（一般2/3時(shí)），更換干燥劑。干燥劑較多使用無水硫酸鈣。

*下期內(nèi)容為拉制儀常見耗材選購小貼士，持續(xù)關(guān)注呦