細胞核、線粒體、細胞骨架的成像的熒光探針介紹
細胞核 (nucleus) 是真核細胞內(nèi)最大、最重要的細胞結(jié)構(gòu)，作為細胞遺傳與代謝的調(diào)控中心，是真核細胞區(qū)別于原核細胞最顯著的標志之一。MCE 提供的細胞核熒光探針可對細胞或組織直接染色，從而實現(xiàn)對細胞核的定位，確定細胞在組織中的分布，并追蹤細胞從有絲分裂到凋亡整個過程中細胞核的變化。
表 1. 用于細胞核熒光試劑
圖 1. HA-nsp4 載體轉(zhuǎn)染 PK-15CD163 細胞[1]
轉(zhuǎn)染 24 小時后進行細胞固定，用膽固醇染料 Filipin (藍色) 確定膽固醇含量。細胞核用碘化丙啶 (紅色) 復染。
鬼筆環(huán)肽 (Phalloidin) 是從鬼筆鵝膏中分離到的一種環(huán)狀七肽毒素，以極高的親和力和特異性結(jié)合肌動蛋白絲 F-actins。通常將鬼筆環(huán)肽與熒光染料偶聯(lián)來研究細胞中 F-actins 的分布。
熒光標記的鬼筆環(huán)肽極少會非特異性染色，染色和未染色區(qū)域之間的對比度非常大，可使 F-actins 高效染色。
表 2. MCE 細胞骨架熒光試劑
圖 2. MDA-MB-231 細胞、CTCF-in 細胞的細胞骨架[2]
共聚焦顯微鏡捕獲細胞。藍色通道，細胞核 Hoechst 染色；紅色通道，F(xiàn)-actins 被 Rhodamine Phalloidin 染色；以上通道的組合；白色循環(huán)和箭頭，擴散的細胞周肌動蛋白纖維。
ΔΨm 即線粒體膜電位 (mitochondrial membrane potential, MMP)，它的變化是反映線粒體活力的重要參數(shù)。線粒體膜電位越高，線粒體產(chǎn)生的能量越多，越能促進細胞能量轉(zhuǎn)換。線粒體膜電位下降是細胞凋亡早期的標志性事件。
MCE 線粒體膜電位熒光試劑，可以快速檢測線粒體膜電位下降，作為細胞凋亡早期的檢測指標。JC-1 線粒體膜電位試劑盒 (HY-K0601) 同時提供 CCCP 作為誘導線粒體膜電位下降的陽性對照，可用于細胞、組織或純化的線粒體等樣本的線粒體膜電位檢測。
表 3. 線粒體膜電位熒光試劑
細胞膜主要是由磷脂構(gòu)成的富有彈性的半透性膜，為細胞結(jié)構(gòu)中分隔細胞內(nèi)、外不同介質(zhì)和組成成分的界面。Di 系列熒光試劑可側(cè)向擴散染色整個細胞，是便捷的細胞輪廓標記物，DiO、DiI、DiD 被激發(fā)后分別發(fā)出綠色、橙紅色、紅色熒光。
細胞膜探針 DiI（紅色）、細胞核探針 DAPI（藍色）、FITC 偶聯(lián)的二抗（綠色）
細胞質(zhì)是細胞質(zhì)膜包圍的除核區(qū)外的一切半透明、膠狀、顆粒狀物質(zhì)的總稱。在細胞增殖與活性相關(guān)研究中，細胞質(zhì)染料可用于分析細胞活性、監(jiān)測細胞的形態(tài)和位置等。
圖 6. CFSE 染色
PC-3 細胞用載體或 MTX 處理 20 小時，收集細胞并用 CFSE 標記。與 CellTracker Deep Red 標記的 MoDCs 細胞共孵育 2 小時，流式細胞術(shù)分析細胞吞噬作用。
關(guān)于細胞染色，小 M 今天就介紹到這里了，小伙伴們有沒有 Get 到新技能呢？
參考文獻
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