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技術(shù)介紹 | 類黃酮廣靶代謝組學(xué)

瀏覽次數(shù):596 發(fā)布日期:2021-6-30  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
類黃酮化合物(Flavonoids)主要指具有2-苯基色原酮(2-Phenylchromone)母核結(jié)構(gòu)的一類化合物的總稱,是植物在長期自然選擇過程中產(chǎn)生的一些次級(jí)代謝產(chǎn)物,廣泛存在于高等植物的根、莖、葉、花及果實(shí)中。黃酮類化合物具有多種重要的生理、生化作用,對(duì)人類疾病有著重要防治價(jià)值,如減少癌癥、抗腫瘤、抗心血管疾病、抗衰老、抗骨質(zhì)疏松、抗病毒、抗炎癥等等。廣譜的藥理活性已使類黃酮物質(zhì)成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn),廣泛應(yīng)用在醫(yī)藥、食品、保健等領(lǐng)域。
類黃酮廣靶代謝組學(xué)數(shù)據(jù)庫

 
1.技術(shù)優(yōu)勢

 

  • 自建數(shù)據(jù)庫:自建類黃酮標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)庫,確保定性結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

 

  • 定性準(zhǔn):基于標(biāo)準(zhǔn)品開發(fā)方法,樣本中代謝物二級(jí)譜與標(biāo)準(zhǔn)品二級(jí)譜逐一核對(duì)。

 

  • 高特異性:優(yōu)化的類黃酮前處理方法;合適的色譜質(zhì)譜檢測條件;每個(gè)項(xiàng)目均進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品驗(yàn)證。

 

  • 高靈敏度:AB SCIEX 6500 Qtrap高靈敏度的質(zhì)譜系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)對(duì)極低含量的類黃酮準(zhǔn)確鑒定。

 

2.技術(shù)路線

3.技術(shù)參數(shù)
  • 樣本要求

植物組織 鮮樣 2g,干樣 1g,凍干粉:250 mg

 

  • 儲(chǔ)存和運(yùn)輸

液氮或-80℃保存;足量干冰運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融。

 

  • 檢測平臺(tái)

AB Sciex QTRAP®6500+

 

4.應(yīng)用方向
  • 非生物脅迫:抗氧化;延緩衰老。
  • 生物脅迫:植物抗蟲;植物抗病。
  • 疾病防治:抗癌;抗菌消炎;心腦血管疾病。
  • 生長發(fā)育:種子萌發(fā);營養(yǎng)色澤。

 

5.案例分析

 

廣泛靶向代謝組學(xué)研究兩種紅豆杉中黃酮類化合物的代謝變化

研究對(duì)象:紅豆杉

期刊Molecules

影響因子:3.267

時(shí)間:2019年

 

研究背景

紅豆杉是世界上公認(rèn)的瀕臨滅絕的天然珍稀抗癌植物。黃酮類化合物具有多種生物學(xué)功能,參與植物生長發(fā)育過程中的防御和抗性反應(yīng)、改善營養(yǎng)元素的利用與花粉萌發(fā)的關(guān)系,也顯示出廣泛藥理活性包括抗氧化、抗腫瘤、抗白血病、抗炎和免疫調(diào)節(jié)的影響,但在紅豆杉中作為主要生物活性成分的研究尚未廣泛開展。

結(jié)果展示

兩種紅豆杉中的總黃酮檢測發(fā)現(xiàn)T. media品種總黃酮含量較T. mairei中高。廣泛靶向代謝組分析共鑒定出197種黃酮代謝物,其中有37種黃酮類代謝物只存在于其中一個(gè)品種,紅色字母表示T. media主要積累代謝物;綠色字母表示T. mairei主要積累代謝物。
通過對(duì)差異黃酮代謝物進(jìn)行KEGG分類與富集分析,發(fā)現(xiàn)兩種紅豆杉中差異的類黃酮代謝產(chǎn)物參與花青素生物合成、黃酮和黃酮醇生物合成、異類黃酮生物合成和苯丙素類生物合成途徑。這可能是導(dǎo)致兩種紅豆杉總黃酮含量差異的原因。

思路總結(jié)

基于LC-MS/MS的廣泛靶向代謝組分析,系統(tǒng)地比較了紅豆杉品種間的類黃酮總含量及種類差異,提供了紅豆杉這一重要植物的黃酮類代謝物組成和豐度的全面信息。結(jié)果表明,兩種紅豆杉中黃酮類物質(zhì)的總量和種類存在差異,為了解兩個(gè)品種紅豆杉黃酮代謝產(chǎn)物的多樣性提供了新的思路,為紅豆杉物種的充分利用和新藥物的開發(fā)提供了理論依據(jù)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

作者對(duì)兩個(gè)品種紅豆杉進(jìn)行了基于LC-MS / MS的廣泛靶向代謝組分析。共鑒定出197種黃酮代謝物(包括70種黃酮,42種黃酮醇,26種黃酮糖苷,15種花青素和13種異黃酮等)。結(jié)果表明,有37種黃酮類代謝物只存在于其中一個(gè)品種,有42種黃酮類代謝物在兩個(gè)品種的紅豆杉中表現(xiàn)出特定的代謝模式。

 

 

來源:上海百趣生物醫(yī)學(xué)科技有限公司
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