科研一直以來都是燒錢的活動(dòng)，我想很多同學(xué)對(duì)此肯定深有體會(huì)。

以前我們老板買試劑

我買試劑

作為科研萌新，有時(shí)不僅得說服老板購買外包服務(wù)，同時(shí)還得與公司代理協(xié)商，真的是太難了。

比如說，我們要購買一個(gè)基因敲除細(xì)胞模型，公司提供了價(jià)格較低的雜合子與價(jià)格較高的純合子，我們?cè)撊绾芜x擇？

純合子與雜合子的區(qū)別

本著務(wù)實(shí)求真的科研精神，我們是不是需要先了解下純合子與雜合子的區(qū)別？

圖片來源：https://biologydictionary.net/homozygous/

在人和小鼠等二倍體生物的細(xì)胞中存在兩個(gè)染色體組，在兩個(gè)同源染色體相同位置出現(xiàn)的基因我們稱之為等位基因。當(dāng)這兩個(gè)等位基因完全相同時(shí)，我們就說這個(gè)細(xì)胞是純合子，而當(dāng)兩個(gè)等位基因不同時(shí)，這個(gè)細(xì)胞就是雜合子。也就是說，同一個(gè)細(xì)胞，在某對(duì)等位基因上是純合子，在另一對(duì)等位基因上也可以是雜合子。

具體到基因敲除的模型構(gòu)建上來說，單個(gè)基因的敲除，涉及到一對(duì)等位基因的敲除，和單個(gè)等位基因的敲除。自然而然的，敲除一對(duì)等位基因就比敲除單個(gè)等位基因的效率要低，因此工作量也就大很多，也就造成很多公司報(bào)價(jià)上的差異。

作為生命科學(xué)未來的“包工頭”，以后分分鐘要管理上千萬的項(xiàng)目資金，我們肯定得科學(xué)地省錢，破除封建迷信，當(dāng)然土豪隨意。

純合子、雜合子該如何選擇

在利用功能缺失策略對(duì)基因進(jìn)行研究時(shí)，也就是基因敲除啦，一般情況下我們都是需要純合子敲除細(xì)胞系的（除非純合致死）。這時(shí)候，我們要記住一點(diǎn)，在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的過程中需要結(jié)合我們的實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮拖掠螜z測(cè)手段，最終設(shè)計(jì)出合理的上游實(shí)驗(yàn)。也就說，對(duì)于基因敲除的下游驗(yàn)證，一般是Western Blot和免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)。在Western Blot的驗(yàn)證中，野生型和雜合子相比，理論上目的基因的表達(dá)量只是減少一半，甚至有些時(shí)候因?yàn)檫z傳補(bǔ)償效應(yīng)目的基因的表達(dá)量減少不了一半。毫無夸張地說，雜合子的敲除細(xì)胞系還不如做個(gè)敲低穩(wěn)定細(xì)胞系來得靠譜。因此，對(duì)于敲除細(xì)胞系，還是花點(diǎn)精力或費(fèi)點(diǎn)經(jīng)費(fèi)整純合子會(huì)靠譜點(diǎn)。

而在某些情況下，我們并不要求純合子，雜合子細(xì)胞模型就能出色解決問題了。比如，我們一位同學(xué)想要研究目的蛋白在胚胎干細(xì)胞分化過程中的動(dòng)態(tài)，這時(shí)就涉及到了蛋白體內(nèi)動(dòng)態(tài)模型的模擬和構(gòu)建。由于是個(gè)動(dòng)態(tài)過程，細(xì)胞需要進(jìn)行分化，而且目的蛋白的調(diào)控方式不能被改變，因此只能通過KI（knock in）的方法在目的基因的終止密碼子前插入熒光蛋白標(biāo)簽，而后續(xù)涉及到的是活細(xì)胞成像技術(shù)。在這種情況下，目的蛋白不需要做到蛋白定量，因此也就不需要要求純合子。

就是醬紫，可以說無論是站在科研投入還是實(shí)驗(yàn)可行性的層面，實(shí)驗(yàn)思路和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)將是決定研究是否能順利進(jìn)行的關(guān)鍵部分。在當(dāng)前各種實(shí)驗(yàn)均可外包的科研環(huán)境下，小編認(rèn)為科研人員更應(yīng)該在實(shí)驗(yàn)思路和課題方向預(yù)測(cè)的層面下功夫。同時(shí)，賽業(yè)生物為了更好地助力科研，我們擁有專業(yè)的技術(shù)支持團(tuán)隊(duì)和研發(fā)團(tuán)隊(duì)，從實(shí)驗(yàn)思路的探討到實(shí)驗(yàn)服務(wù)的定制交付，我們均能提供專業(yè)的技術(shù)支持和服務(wù)支持。如有需要，歡迎聯(lián)系我們咨詢。

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當(dāng)我們研究某個(gè)基因的調(diào)控功能時(shí)，如果能同時(shí)從動(dòng)物模型及細(xì)胞動(dòng)物得到驗(yàn)證，便可更加充分地證實(shí)其調(diào)控作用，提高實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的嚴(yán)謹(jǐn)性，特別對(duì)于高分文章的發(fā)表，更為重要，此外同時(shí)構(gòu)建細(xì)胞模型和動(dòng)物模型可節(jié)省時(shí)間，發(fā)文更快速。

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