重組抗體的優(yōu)勢(shì)及應(yīng)用
瀏覽次數(shù):6123 發(fā)布日期:2021-3-10
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重組抗體在實(shí)驗(yàn)中的優(yōu)勢(shì)可以說(shuō)是十分突出,也成為了越來(lái)越多科研人員的選擇。今天,就讓我們來(lái)深入了解一下重組抗體及其優(yōu)勢(shì)。
01什么是重組抗體?它們是如何產(chǎn)生的?
重組抗體的生產(chǎn)是在體外完成的,具體來(lái)講就是將免疫特異性重鏈和輕鏈抗體基因克隆到高效表達(dá)載體,再將這些載體引入表達(dá)宿主(例如細(xì)菌、酵母或哺乳動(dòng)物)中,用于生產(chǎn)重組抗體。通常使用傳統(tǒng)單克隆抗體的地方都可以使用重組抗體。
相比之下,單克隆抗體,通常是使用免疫動(dòng)物的 B 細(xì)胞制備永生雜交瘤細(xì)胞,分泌所需的抗體。雖然這項(xiàng)技術(shù)可大量生產(chǎn)一致性高、特異性強(qiáng)、靈敏度高的單克隆抗體,但是,隨著時(shí)間的推移,雜交瘤細(xì)胞系會(huì)出現(xiàn)遺傳漂變,導(dǎo)致生產(chǎn)的抗體出現(xiàn)輕微變化。目前,高難度靶點(diǎn),如毒素、核苷酸和膜結(jié)合蛋白的抗體很難用這種體外模型生產(chǎn)出來(lái)。
02重組抗體的優(yōu)點(diǎn)
重組抗體克服了傳統(tǒng)抗體生產(chǎn)的局限性,可實(shí)現(xiàn)最高水平的批間一致性、較高的可重復(fù)性,且特異性已經(jīng)確認(rèn),且可保證長(zhǎng)期供應(yīng)。
由于重組抗體是從一組獨(dú)特的基因表達(dá)形成的,所以重組抗體的生產(chǎn)是可控且可靠的?梢员苊怆s交瘤生產(chǎn)過(guò)程中的一些問(wèn)題,如基因丟失、基因突變及細(xì)胞系漂移。因此,抗體的批間一致性非常高,可以為您提供研究或藥物研發(fā)研究所需的高可重復(fù)性結(jié)果。
圖 1.在 western blot 中利用多個(gè)樣本類(lèi)型對(duì)我們的抗 Bcl-XL 重組兔單克隆抗體 — ☞
ab178844(左)和引用度較高的競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品 Bcl-XL 兔多克隆抗體進(jìn)行了對(duì)比檢測(cè)。看看我們的☞
蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)方案。
采用重組技術(shù),更容易通過(guò)抗體工程提高抗體靈敏度。所需克隆的選擇過(guò)程發(fā)生在雜交瘤和重組克隆階段,這樣我們能夠選擇最優(yōu)的抗體質(zhì)量。
為了確保特異性,我們進(jìn)行了基因敲除驗(yàn)證,提高您對(duì)結(jié)果的信任。以下案例證明,
基因敲除樣本沒(méi)有出現(xiàn)預(yù)期的分子量條帶,因此重組抗體與其他類(lèi)型抗體之間的特異性存在差異:
圖 2.我們利用基因敲除樣本和野生型樣本對(duì)我們的重組 TLE 1 抗體 [EPR9386(2)](左)和單克隆 TLE 1 [OTI1F5] 抗體進(jìn)行了測(cè)試。
圖 3.我們利用基因敲除樣本和野生型樣本對(duì)我們的重組 ☞
GRIM19 [EPR4471(2)]抗體(左)和單克隆 GRIM19 [6E1BH7] 抗體進(jìn)行了測(cè)試。
- 量產(chǎn)容易、可持續(xù)供應(yīng)
由于抗體基因是單獨(dú)分離的且序列已知,所以可以進(jìn)行任何規(guī)模的抗體表達(dá),并且,可以保證抗體長(zhǎng)期供應(yīng)。對(duì)長(zhǎng)期研究或者針對(duì)多個(gè)樣本使用同一抗體的研究而言,重組抗體會(huì)很棒。
- 無(wú)動(dòng)物成分高通量生產(chǎn)
一旦分離出產(chǎn)生抗體的基因,就可以實(shí)現(xiàn)無(wú)動(dòng)物成分體外生產(chǎn)。對(duì)于使用我們的噬菌體展示技術(shù)產(chǎn)生的抗體,其基因也可以用無(wú)動(dòng)物成分的程序分離。
03客戶(hù)為什么喜愛(ài)我們的重組抗體
50,000 多篇出版物刊載了我們的重組抗體。
- “在長(zhǎng)期研究或像我們這樣的服務(wù)實(shí)驗(yàn)室中,我們經(jīng)常對(duì)許多樣本使用同一抗體。這種情況下,批間一致性非常重要。每次收到新批次的抗體,我都會(huì)檢測(cè)我的實(shí)驗(yàn)方案。我喜歡 Abcam RabMAb® 的一個(gè)原因是,它們總能得出相同的結(jié)果,因此,幾乎不需要優(yōu)化。”
- “相較多克隆抗體而言,所有的重組抗體都可以得出漂亮的特異性條帶。它們的質(zhì)量和得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果始終一致,而且用到的蛋白量很少。”
- “之前,我們嘗試過(guò)多種 H3K27M 抗體,但有時(shí)很難區(qū)分表達(dá) H3K27M 的陽(yáng)性細(xì)胞和非特異性信號(hào)。這種抗體(H3K27M RabMAb®)檢測(cè) H3K27M 蛋白時(shí)的特異性更強(qiáng)、靈敏度更高,且背景非常低。”
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