磁珠法糞便提取試劑盒操作指南
常規(guī)樣本的核酸提取
想必已不再是實(shí)驗(yàn)黨們頭疼的對(duì)象了吧
然鵝，糞便基因組DNA提取步驟實(shí)在繁瑣
還可能遇到提取濃度低，純度差等問(wèn)題
簡(jiǎn)直天崩地裂啊
沒(méi)關(guān)系，這點(diǎn)小事MP幫你解決!
拿好這份指南
讓你的糞便DNA提取實(shí)驗(yàn)事半功倍
【 PART 01-預(yù)洗 】
預(yù)洗操作
1.向Lysing Matrix E管中加入樣本，再加入1mL Pre-wash Buffer，用渦旋震蕩儀渦旋至糞便樣本被完全重懸起來(lái)。
2.因糞便狀態(tài)而異，渦旋時(shí)間控制在1min以內(nèi)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致一部分細(xì)胞或菌體破裂，損失一部分DNA。
3.12000rpm，離心5min，棄去上清，保留沉淀。
除了按照預(yù)洗操作執(zhí)行以外，對(duì)于各類(lèi)型的樣本也會(huì)有不同注意事項(xiàng)：
【 PART 02-裂解與去雜 】
裂解：樣本預(yù)洗后，向Lysing Matrix E中依次加入裂解液的三種成分：Lysis Buffer F1、Lysis Buffer F2、RNase A，渦旋混勻。
使用FastPrep-24TM 5G研磨儀，5 m/s，研磨40s或用渦旋震蕩儀以最大速度渦旋10 min，離心后保留上清液，棄去沉淀。
去雜質(zhì)：將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中，添加去雜劑：PPS，主要用于去除蛋白等雜質(zhì)。在4℃放置5 min能提高效果，離心后，保留上清液，棄去沉淀。
【 PART 03-結(jié)合-漂洗-洗脫 】
圖 |磁珠法提取
這三個(gè)步驟可以手工操作，也可以配合自動(dòng)化核酸提取儀實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化批量操作。一般來(lái)說(shuō)，手工提取預(yù)計(jì)在40-45 min左右完成，采用MP公司的24孔磁力架（貨號(hào) 116570413），可以一次處理24個(gè)樣本。而采用自動(dòng)化儀器提取，隨著樣本數(shù)量的增加，操作時(shí)間并不延長(zhǎng)，樣品處理量成倍增加，效率大大提高，從此解放雙手。
圖 |24孔磁力架
手工操作
自動(dòng)化操作
1. 將400 µL上清液轉(zhuǎn)移至 96 孔板從左至右的第二列中，并按照下表在各添加其他試劑。
2. 按照下表設(shè)置程序，運(yùn)行自動(dòng)化核酸提取儀。
【 訂購(gòu)信息 】
如有任何技術(shù)問(wèn)題，歡迎來(lái)電咨詢400-1500-680或添加官方微信：MPBiomedicalsSH，
我們可以根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)需求，提供定制化解決方案~
- 放射性核素RDC在腫瘤診斷與治療中應(yīng)用和發(fā)展前景
- FITC-xtra 異硫氰酸熒光素的優(yōu)勢(shì)及實(shí)驗(yàn)方案步驟
- α-淀粉酶測(cè)定試劑盒 (Ceralpha Method)原理與使用
- 納米管介導(dǎo)的線粒體轉(zhuǎn)移在腫瘤免疫治療研究中的應(yīng)用
- 分子動(dòng)力學(xué)模擬技術(shù)在藥物研發(fā)領(lǐng)域的應(yīng)用前景及核心原理
- 紅霉素MTS藥敏紙條助力抗擊耐藥精準(zhǔn)檢測(cè)
- 大腸桿菌不耐熱腸毒素(LT)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
- 蛋白降解技術(shù)AUTOTAC、第一代和第二代AUTAC的作用機(jī)制
- 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)2025全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)招商函
- MCE推出生命科學(xué)文獻(xiàn)有投必獎(jiǎng)活動(dòng)(腫瘤與癌癥)
- 睿通生物推出新品ML19熔融石英折射率匹配液
- MCE直播：同位素標(biāo)記物示蹤劑與定量?jī)?nèi)標(biāo)品的探索
- MCE邀您參加2024年滿意度有獎(jiǎng)?wù){(diào)查&感恩節(jié)回饋活動(dòng)
- MCE暖冬鉅惠：染料、siRNA65折，享1.5倍牌價(jià)積分
- MCE中國(guó)11月展會(huì)預(yù)告: 蘇州生物藥創(chuàng)新開(kāi)發(fā)峰會(huì)等
- MCE直播：癌癥中的炎癥反應(yīng)&細(xì)胞焦亡的思路與方法
