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磁珠法提取核酸的操作技巧

瀏覽次數(shù):2498 發(fā)布日期:2020-9-22  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
最近有不少小伙伴問到磁力架,著實令我有點意外了,之前一直以為大家還是比較熱衷柱式提取法,畢竟小編之前讀研的時候,柱提法是我們實驗室歷代師兄師姐一路傳承下來的,我們壓根就沒想過還有更快更便捷的方法,今天我們就來聊一聊這個已經(jīng)開始流行的用于核酸(DNA&RNA)的純化、片段分選的磁珠法。
 
 
說到磁珠法,那我們首先當(dāng)然必須得了解磁珠,什么是磁珠呢?磁珠是利用一定的組織包被四氧化三鐵核心而形成的可以被磁鐵吸附的同時有能通過表面包被物吸附(結(jié)合)核酸的神奇的小珠子。之所以說他神奇,是因為他的用途很大!它可以實現(xiàn)核酸提取的自動化和高通量化。
 
磁珠結(jié)構(gòu)
 
 
磁珠一般分為三層結(jié)構(gòu):
 
最內(nèi)層:為支持結(jié)構(gòu),如聚苯乙烯做的內(nèi)核;
中間層:磁層,作用是與磁力架上的磁鐵相互吸附,從而分離核酸與反應(yīng)溶液,材料通常為Fe3O4;
最外層:修飾層,一般為帶負(fù)電的基團;
 
磁珠法核酸提取原理
 
在磁珠法的反應(yīng)體系中,核酸分子(DNA & RNA)會由線性壓縮成球狀,暴露出核酸骨架上大量的負(fù)電基團與反應(yīng)體系中的陽離子連接,在磁珠最外層負(fù)電基團的作用下,形成“陰離子-陽離子-陰離子”的鹽橋結(jié)構(gòu),使核酸分子被特異性地吸附到磁珠表面。而當(dāng)反應(yīng)緩沖液被棄除后,加入水性分子,會快速充分水化核酸分子,解除三者之間的離子相互作用,使吸附到磁珠上的核酸分子被純化出來。
 
 
磁珠法核酸提取的優(yōu)勢
 
磁珠法DNA提取是納米科技與生物技術(shù)的完美結(jié)合,具有其它DNA提取方法不可比擬的優(yōu)勢:
 
(1)樣本需求量低:微量的材料即可提到高濃度的核酸;
 
(2)操作簡單快速:整個操作流程基本分為五步(裂解、結(jié)合、洗滌、干燥、洗脫),全程無需離心操作,大多可在30~60分鐘內(nèi)完成;
 
(3)質(zhì)量穩(wěn)定可靠:游離的磁珠與核酸的結(jié)合量更大,特異性的結(jié)合使得核酸純度更高,且可通過控制磁珠表面基團來調(diào)節(jié)核酸回收量;
 
(4)全自動化操作:采用核酸提取儀可實現(xiàn)自動化、高通量操作,可實現(xiàn)幾十甚至幾百個樣品的提。
 
(5)安全無毒無害:試劑不含酚、氯仿等有毒化學(xué)試劑,完全符合現(xiàn)代化環(huán)保理念。
 
磁珠法——其他應(yīng)用領(lǐng)域
 
當(dāng)然,除了用作核酸提取,根據(jù)不同的表面處理與標(biāo)記,還可將磁珠應(yīng)用到其他的領(lǐng)域
 
①.細(xì)胞分離(CD4、CD8)
 
可進一步用于腫瘤檢測與診斷等
 
②.蛋白、抗體分離(氨基磁珠、羧基磁珠、環(huán)氧基磁珠)
 
可進一步用于疾病的檢測與診斷等
 
作為一家為生命科學(xué)研究領(lǐng)域的研究學(xué)者提供整體打包方案的專業(yè)化高科技公司,武漢艾美捷科技可以提供全套磁珠研究系列的產(chǎn)品,包括:磁珠、核酸提取試劑盒和磁力架
 
磁珠——根據(jù)不同的表面處理與標(biāo)記,可將磁珠分成各種不同的應(yīng)用類型
 
貨號 名稱 說明
U0001 Magnetic Bead Carboxyl 可與多肽、蛋白、抗體、氨基修飾的寡聚核苷酸等多種生物配體共價偶聯(lián)
U0084 MaxBead Protein A 免疫球蛋白IgG,特異性抗原的分離純化
U0380 CSV magnetic beads 細(xì)胞的分離純化
U0381 PSMA magnetic beads 細(xì)胞的分離純化
KA3267 MaxBead Carboxyl Labeling Kit 羧基磁珠偶聯(lián)試劑盒適用于將蛋白、抗體等生物配體共價偶聯(lián)到微球表面,用于進一步的蛋白純化、免疫檢測等
 
磁珠法核酸提取試劑盒
 
貨號 名稱 說明
62500 Cells and Tissue DNA Isolation Kit (Magnetic Bead System) 細(xì)胞、組織樣本DNA提取
62600 Blood DNA Isolation 96-Well Kit (Magnetic Bead System) 血液樣本DNA提取
P-1059 EpiNext DNA Size Selection Kit DNA片段分選
P-9108 EpiMag Viral RNA Isolation Kit 病毒RNA提取
P-2026 ChromaFlash One-Step Magnetic ChIP Kit 基于磁珠法的染色質(zhì)免疫沉淀
 
磁力架
 
貨號 名稱 說明
Q10002-1 EpiMag HT (96-Well) Magnetic Separator 用于磁珠法分離樣品,適用于基于磁珠法的細(xì)胞、蛋白或核酸等生物樣品分離純化。
兼容所有微孔板,包括標(biāo)準(zhǔn)96孔板(0.25至0.3ml/孔)和深孔離心管(1至2ml)以及各種孔形的平板(U形、V形和平底)
 

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