小鼠淋巴瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培育，而不適用于懸浮細(xì)胞培育，懸浮細(xì)胞可運(yùn)用滴片法； 

2．所運(yùn)用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制作，并通過鉻酸洗液處理； 

3．蓋玻片十分薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 

4．假如需要更多成長狀況共同的細(xì)胞，可以運(yùn)用較大的培育皿，但不宜過大，以避免培育液的浪
費(fèi)和添加污染機(jī)率； 

5．假如細(xì)胞貼壁成長才能較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然曬干。

小鼠淋巴瘤細(xì)胞操作步驟：

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

于細(xì)菌培養(yǎng) LB Broth LB肉湯    250
用于細(xì)菌培養(yǎng) LB Nutrient Agar LB營養(yǎng)瓊脂    250
用于苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn) Phenylalanine Deaminase  Medium 苯丙氨酸脫氨酶培養(yǎng)基    100
用于大腸桿菌的熒光檢測(cè)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Columbia- MUG Medium 哥倫比亞MUG培養(yǎng)基 250
用于海生細(xì)菌的培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 2216E　Agar 2216E瓊脂 250
用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法) Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar) 腸球菌瓊脂(膽鹽－七葉苷－疊氮鈉瓊脂) 250
用于培養(yǎng)擬桿菌 BDS Medium BDS培養(yǎng)基 250
用于細(xì)菌的綜合生化試驗(yàn) Dextrose Agar 葡萄糖瓊脂 250

2.加樣：分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40µl，然后再加待測(cè)樣品10µl(樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50µl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50µl，再加入顯色劑B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.

10.終止：每孔加終止液50µl，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。