無(wú)機(jī)陽(yáng)離子和陰離子濃度不成比例的穩(wěn)態(tài)維持是活細(xì)胞的特征，對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞功能而言，跨不同區(qū)室的這些離子梯度的穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)至關(guān)重要。以空間和時(shí)間分辨率來(lái)測(cè)量這些離子的濃度對(duì)于研究細(xì)胞的生理學(xué)已經(jīng)變得至關(guān)重要。離子探針提供了一種將離子通道激活與細(xì)胞內(nèi)離子濃度的后續(xù)變化測(cè)定相關(guān)的方法。用這些類型的探針測(cè)量的離子豐度變化同時(shí)也反映了細(xì)胞的膜電位的變化，我們提供許多離子探針，可有效地測(cè)量您感興趣的離子。

 

       鈣離子檢測(cè)

 

       鈣可作為多種細(xì)胞中的通用第二信使，Ca 2+調(diào)節(jié)所有類型細(xì)胞的許多功能，因此鈣測(cè)量對(duì)于各種生物學(xué)研究至關(guān)重要。在1980年代，Tsien及其同事生產(chǎn)了各種熒光指示劑。其中Indo-1，F(xiàn)ura-2，F(xiàn)luo-3和Rhod-2是測(cè)量Ca 2+濃度的最有價(jià)值的染料。近年來(lái)，我們陸續(xù)推出了更優(yōu)秀的鈣離子探針：Fluo-8 ®，Cal-520 ® 和Calbryte™520，這些為實(shí)現(xiàn)高通量監(jiān)測(cè)鈣濃度，篩選GPCR和鈣離子通道藥物篩選提供了有力的工具。

 

       熒光單波長(zhǎng)鈣指示劑

 

       最常見(jiàn)的可見(jiàn)光激發(fā)的鈣離子探針有Fluo-8 ®，的Fluo-4，F(xiàn)luo- 3，RHOD-2和RHOD-4。Fluo- 8®指示劑廣泛用于流式細(xì)胞術(shù)，共聚焦激光掃描顯微鏡以及高通量篩選GPCR靶標(biāo)。FLUO-8 ®是基本上無(wú)熒光的，除非與Ca2+結(jié)合至，此時(shí)量子產(chǎn)率為〜0.15以及在飽和Ca2+存在條件下Kd為的390nm。Cal-520®是迄今為止最佳的488 nm處激發(fā)綠色熒光鈣離子指示劑，具有顯著改善的信號(hào)/背景比和細(xì)胞內(nèi)保留的特征。

 

       長(zhǎng)波長(zhǎng)的Rhod-4™，Cal-590™和Cal-630™是綠色熒光Fluo-8®，F(xiàn)luo-4和Fluo-3的Ca 2+指示劑，可用于存在高水平的自體熒光的細(xì)胞和組織中進(jìn)行鈣定量。Rhod-5N對(duì)Ca 2+的結(jié)合親和力低于任何其他基于BAPTA的指示劑（Kd =〜320 µM），適用于10 µM至1 mM范圍內(nèi)的Ca 2+測(cè)量。像母體Rhod-2指示劑一樣，Rhod-5N在不存在二價(jià)陽(yáng)離子的情況下基本上是無(wú)熒光的，并且在結(jié)合Ca 2+時(shí)顯示出強(qiáng)的熒光增強(qiáng)，沒(méi)有光譜偏移。所有Fluo，Cal和Rhod指示劑均可作為不滲透細(xì)胞的鉀鹽或可滲透細(xì)胞的AM酯使用。

 

       優(yōu)秀的單波長(zhǎng)鈣指示劑
 

	Cal-500®, AM	Cal-520®, AM	Calbryte™ 520, AM	Cal-590™, AM	Calbryte™ 590, AM	Cal-630™, AM	Calbryte™ 630, AM
讀數(shù)	與鈣結(jié)合后發(fā)射熒光強(qiáng)度大幅度增加（鈣靜息狀態(tài)下熒光強(qiáng)度最�。�
Ex/Em (nm)	386/481	492/514	492/514	573/588	580/592	607/625	607/624
濾光片	DAPI	FITC		TRITC		Texas Red
Kd	303 nM	320 nM	1200 nM	561 nM	1400 nM	792 nM	1200 nM
滲透性	可滲透
染料加載	加載在細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)
規(guī)格	10x50 µg	1 mg	1 mg	1 mg	1 mg	1 mg	1 mg
貨號(hào)	20412	21131	20653	20512	20702	20532	20722
在線客服	雷雷				閃閃

 

       經(jīng)典的單波長(zhǎng)鈣指示劑
 

	Cal-Green™-1, AM	Fluo 3, AM	Fluo 4, AM	Rhod 2, AM	Rhod 5N, AM
檢測(cè)原理	與鈣結(jié)合后發(fā)射熒光強(qiáng)度大幅度增加（鈣靜息狀態(tài)下熒光強(qiáng)度最�。�
Ex/Em (nm)	506/531	506/526	494/516	549/578	551/577
濾光片	FITC			TRITC
Kd	190 nM	390 nM	345 nM	570 nM	0.3 mM
滲透性	可滲透
染料加載	加載在細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)
規(guī)格	1 mg	1 mg	1 mg	20x50 µg	1 mg
貨號(hào)	20502	21011	20550	21064	21070

 

       熒光比值型鈣指示劑

 

       比例離子探針或雙波長(zhǎng)離子指示劑是熒光染料的一個(gè)子類別，其用于定量測(cè)量細(xì)胞內(nèi)離子濃度。與單波長(zhǎng)指示器相比，雙波長(zhǎng)指示器具有獨(dú)特的光譜特性，這些光譜特性是由于結(jié)合其目標(biāo)離子而觸發(fā)的。在比例鈣指示劑的情況下，當(dāng)這些染料與游離的Ca 2+結(jié)合時(shí)，它們的最大吸收和發(fā)射波長(zhǎng)都會(huì)發(fā)生變化，例如，雙重激發(fā)的Ca2+指示劑在結(jié)合或不結(jié)合Ca 2+時(shí)會(huì)顯示不同的兩個(gè)最大激發(fā)波長(zhǎng)（Em），使用從收集的熒光數(shù)據(jù)得出的比率，研究人員可以準(zhǔn)確確定細(xì)胞內(nèi)Ca 2+的濃度。

 

       比值型熒光探針進(jìn)行定量，減少了染料負(fù)載導(dǎo)致的指示不均勻，不良的染料保留和光漂白的影響。自1985年Tsien及其合作者引入比例計(jì)量指標(biāo)以來(lái)，無(wú)數(shù)科學(xué)論文都引用了比例指標(biāo)，這些指標(biāo)有助于研究鈣在細(xì)胞調(diào)節(jié)中的作用（Grynkiewicz等人1985）。

 

       比值型鈣離子探針更多詳情點(diǎn)擊了解：http://www.bio-review.com/fura-2/

 

	Quin-2, AM	BTC, AM	Fura-2, AM	Fura-FF, AM	Fura-8™, AM	Fura Red, AM	Indo-1, AM	Cal Red™ R525/650, AM
檢測(cè)原理	鈣結(jié)合引起激發(fā)波長(zhǎng)比值變化						鈣結(jié)合引起的發(fā)射波長(zhǎng)比率變化
檢測(cè)方式	激發(fā)波長(zhǎng)變化						激發(fā)波長(zhǎng)變化
Zero Calcium Ex/Em (nm)	353/495	464/533	363/512	363/512	386/532	490/656	346/475	492/650
High Calcium Ex/Em (nm)	333/495	401/529	335/505	339/507	354/524	458/597	330/401	492/525
Kd	60 nM	7 µM	145 nM	5.5 µM	260 nM	400 nM	230 nM	330 nM
滲透性	細(xì)胞滲透
染料加載	加載到細(xì)胞培養(yǎng)基中
規(guī)格	1 mg	1 mg	1 mg	10x50 µg	1 mg	10x50 µg	1 mg	1 mg
貨號(hào)	21050	21054	21021	21027	21055	21048	21032	20590

 

       發(fā)光鈣檢測(cè)：腔腸素及其衍生物
 

       水母發(fā)光蛋白復(fù)合物由22,000Da的載水母發(fā)光蛋白，分子氧和發(fā)光體腔腸素組成。當(dāng)三個(gè)Ca 2+離子與該絡(luò)合物結(jié)合時(shí)，腔腸素被氧化為腔腸酰胺，并伴隨釋放出二氧化碳和藍(lán)光。水母發(fā)光蛋白的生物發(fā)光對(duì)Ca 2+濃度的依賴性使得可以在0.1 µM至> 100 µM的檢測(cè)范圍內(nèi)測(cè)量Ca 2+濃度。與熒光Ca 2+指示劑不同，檢測(cè)Ca 2+結(jié)合的水母發(fā)光蛋白，無(wú)需照亮樣品，從而消除了自發(fā)熒光的干擾。

 

       除了天然腔腸素，我們還提供了一些腔腸素的衍生物，這些衍生物賦予不同的Ca 2+水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的親和力和光譜性質(zhì)。據(jù)報(bào)道，腔腸素hcp重組載脂蛋白總體上具有最佳的發(fā)光，同時(shí)具有高量子產(chǎn)率和快速響應(yīng)時(shí)間。但是，腔腸素類似物在細(xì)胞內(nèi)重建水母發(fā)光蛋白可能相對(duì)較慢。含有腔腸素的cp，f或h形式的水母發(fā)光蛋白的發(fā)光強(qiáng)度比用天然腔腸素重構(gòu)的載脂蛋白的發(fā)光強(qiáng)度強(qiáng)10至20倍，腔腸素 h主要用于GPCR的HTS篩選測(cè)定中。

 

	腔腸素	腔腸素 cp	腔腸素 f	腔腸素 h	腔腸素 hcp	腔腸素 n
檢測(cè)原理	當(dāng)腔腸素與鈣結(jié)合時(shí)，被氧化為腔腸酰胺，導(dǎo)致釋放二氧化碳和“藍(lán)色”發(fā)光
Em (nm)	466	442	472	466	445	468
相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度	1	28	20	16	500	0.5
Half Rise Time (ms)	6-30	2-5	6-30	6-30	2-5	6-30
規(guī)格	1 mg	1 mg	1 mg	1 mg	250 µg	1 mg
貨號(hào)	21156	21157	21158	21159	21154	21161

 

 

       鋅離子檢測(cè)

 

       鋅是生物中含量第二高的過(guò)渡金屬（僅次于鐵), 大腦中大多數(shù)Zn 2+緊密結(jié)合，因此細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)的游離Zn 2+水平可能為pmol級(jí)，但一部分谷氨酸能神經(jīng)元在突觸前按鈕中具有弱結(jié)合的鋅，這部分的鋅會(huì)以u(píng) mol水平釋放，從而響應(yīng)各種刺激，在大多數(shù)細(xì)胞中，游離Zn 2+的細(xì)胞內(nèi)濃度極低（<1 nM），其余的則與蛋白質(zhì)或核酸結(jié)合。

 

       越來(lái)越多的證據(jù)表明，鋅在細(xì)胞生物學(xué)中具有多種作用，作為金屬酶催化位點(diǎn)的一部分，作為基因調(diào)節(jié)蛋白的結(jié)構(gòu)成分，以及作為自由信號(hào)離子，特別是在大腦皮層中, 這在基因表達(dá)的調(diào)節(jié)中特別重要，因?yàn)閆n 2+結(jié)合蛋白占人類基因組中轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白的近50％。Zn 2+在胰腺胰島素分泌中也具有功能活性，同時(shí)也是包括癲癇病和阿爾茨海默氏病在內(nèi)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病的一個(gè)促成因素, 氧化應(yīng)激期間，金屬蛋白復(fù)合物中會(huì)釋放出游離的Zn2 +。

 

       在了解了鋅的多種作用后，下面我們來(lái)看看熒光Zn 2+指示劑系統(tǒng)，該系統(tǒng)可使用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)對(duì)細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外的鋅通量和水平上的寬濃度范圍內(nèi)的鋅通量和水平進(jìn)行定量測(cè)定及成像。目前，我們提供經(jīng)典的TSQ，zinquin以及我們新開(kāi)發(fā)的靈敏的Metal Fluor™Zn 520，以幫助闡明胞內(nèi)Zn 2+釋放的作用以及游離或可螯合Zn 2+在細(xì)胞中的定位。

 

       鋅指標(biāo)選擇指南

	TSQ	Zinquin, AM	Metal Fluor™ Zn 520 AM	Metal Fluor™ Zn 520 K+
檢測(cè)原理	指示劑對(duì)鋅的飽和水平作出反應(yīng)，熒光發(fā)射隨鋅離子濃度顯著增加
Ex/Em (nm)	344/385	360/480	490/514	490/514
濾光片	DAPI		FITC
滲透性	可滲透	可滲透	可滲透	不可滲透
染料加載	加載到細(xì)胞培養(yǎng)基中			通過(guò)顯微注射，貼片移液器或松果體加載劑加載
規(guī)格	5 mg	1 mg	1 mg	1 mg
貨號(hào)	21254	21261	21263	21262

 

 

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       作為一家具有尖端的技術(shù)實(shí)力、一流的經(jīng)營(yíng)管理水平和完善的市場(chǎng)銷售體系的生物高科技企業(yè)，總部位于武漢光谷國(guó)家級(jí)高新技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)，服務(wù)面向全國(guó)。艾美捷科技是集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開(kāi)發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，為用戶提供最前沿的專業(yè)資訊、完備的產(chǎn)品、整合的解決方案，及優(yōu)質(zhì)的物流服務(wù)。為了更好的服務(wù)客戶，公司組建了一支經(jīng)驗(yàn)豐富的研發(fā)團(tuán)隊(duì)-艾美捷生物技術(shù)中心，進(jìn)入研發(fā)生產(chǎn)階段，將更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品推薦給國(guó)內(nèi)生物領(lǐng)域的同仁們!

 

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       三點(diǎn)：

       企業(yè)使命：激發(fā)我們內(nèi)在的創(chuàng)造力，提供有競(jìng)爭(zhēng)力的生物醫(yī)學(xué)產(chǎn)品和服務(wù)，持續(xù)為客戶創(chuàng)造最大價(jià)值。

       企業(yè)愿景：成為受人尊重、世界一流的生物醫(yī)學(xué)產(chǎn)品及服務(wù)供應(yīng)商。

       艾美捷定位：通過(guò)提供完整的產(chǎn)品和服務(wù)體系、便利的客戶關(guān)系和供應(yīng)鏈，為生命科學(xué)研究工作者提供整體打包方案。

 

       六觀：

       價(jià)值觀：激情、敬業(yè)、學(xué)習(xí)、創(chuàng)新、合作、卓越。