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Norgen試劑盒在總蛋白濃縮去污劑和內(nèi)毒素去除的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):685 發(fā)布日期:2020-5-15  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
蛋白質(zhì)濃縮技術(shù)屬于生物大分子的濃縮技術(shù),目的是利用物理或化學(xué)的方法,除去蛋白質(zhì)溶液中的水分、離子和其它小分子物質(zhì),使單位體積內(nèi)的蛋白質(zhì)濃度大幅度提高。蛋白質(zhì)樣品經(jīng)過(guò)一系列的分離提取和層析會(huì)導(dǎo)致樣品的稀釋,而許多分析和研究都需要高濃度或高純度的樣品,所以蛋白質(zhì)樣品的濃縮至關(guān)重要。蛋白質(zhì)濃縮技術(shù)主要有透析袋濃縮法、冷凍干燥濃縮法、吹干濃縮法、超濾膜濃縮法、凝膠濃縮法等。
 
 
去污劑是兩性分子,其長(zhǎng)親脂性烴基(尾部)末端連有極性或帶電荷的親水基團(tuán)(頭部)。它們能夠降低水的表面張力,因此也被稱為表面活性劑。去污劑被廣泛用于生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)研究。常見(jiàn)的應(yīng)用包括細(xì)胞裂解、膜蛋白和脂質(zhì)溶解、蛋白質(zhì)結(jié)晶以及減少印跡實(shí)驗(yàn)的背景染色。
 
 
內(nèi)毒素是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁中的一種成分,叫做脂多糖。脂多糖對(duì)宿主是有毒性的。內(nèi)毒素只有當(dāng)細(xì)菌死亡溶解或用人工方法破壞菌細(xì)胞后才釋放出來(lái),所以叫做內(nèi)毒素。內(nèi)毒素不是蛋白質(zhì),因此非常耐熱。在100℃的高溫下加熱1小時(shí)也不會(huì)被破壞,只有在160℃的溫度下加熱2到4個(gè)小時(shí),或用強(qiáng)堿、強(qiáng)酸或強(qiáng)氧化劑加溫煮沸30分鐘才能破壞它的生物活性。內(nèi)毒素脂多糖分子由菌體特異性多糖、非特異性核心多糖和脂質(zhì)A三部分構(gòu)成。脂質(zhì)A是內(nèi)毒素的主要毒性組分。不同革蘭氏陰性細(xì)菌的脂質(zhì)A結(jié)構(gòu)基本相似。因此,凡是由革蘭氏陰性菌引起的感染,雖菌種不一,其內(nèi)毒素導(dǎo)致的毒性效應(yīng)大致類同。
 
 
如何濃縮總蛋白,以及去除蛋白中的去污劑和內(nèi)毒素?艾美捷科技作為專業(yè)的生命科學(xué)領(lǐng)域解決方案供應(yīng)商,為您推薦獨(dú)代品牌Norgen Biotek的總蛋白濃縮,去污劑和內(nèi)毒素去除試劑盒。
 
 
產(chǎn)品名稱及描述 貨號(hào) 規(guī)格 最大上樣量 洗脫體積
ProteoSpin™ Total Protein Concentration, Detergent Clean-Up and Endotoxin Removal Mini Kit 22800 25次 200 μg 50 μL
ProteoSpin™ Total Protein Concentration, Detergent Clean-Up and Endotoxin Removal Maxi Kit 22200 4次 4 mg 2-4 mL

ProteoSpin™總蛋白濃縮,去污劑和內(nèi)毒素去除試劑盒可以高效去除實(shí)驗(yàn)室常用的多種鹽,包括MgCl2,NaCl,KCl,CaCl2,LiCl和CsCl等。在濃縮蛋白溶液的同時(shí)進(jìn)行鹽的去除,使該試劑盒成為在進(jìn)行許多下游應(yīng)用(如SDS-PAGE,等電聚焦,X射線晶體學(xué),核磁共振光譜,質(zhì)譜和其它應(yīng)用)之前制備蛋白的便捷方法。
 
ProteoSpin™總蛋白濃縮,去污劑和內(nèi)毒素去除試劑盒設(shè)計(jì)用于從先前提取的蛋白或多肽中快速去除內(nèi)毒素,實(shí)現(xiàn)了95%以上的蛋白回收率。內(nèi)毒素,也稱為脂多糖,是革蘭氏陰性細(xì)菌如大腸桿菌的細(xì)胞膜成分。革蘭氏陰性細(xì)菌釋放的內(nèi)毒素是生物過(guò)程中的產(chǎn)生的蛋白質(zhì)溶液的常見(jiàn)污染。由于內(nèi)毒素在體內(nèi)和體外都具有很高的毒性,因此,在將蛋白質(zhì)用于下游應(yīng)用之前,通常必須將其從蛋白制劑中除去。該試劑盒使用基于Norgen專利樹(shù)脂的旋轉(zhuǎn)柱色譜法作為分離基質(zhì),可有效地將內(nèi)毒素水平降低至≤0.01 EU/μg。純化的蛋白質(zhì)樣品可用于多種下游應(yīng)用,包括測(cè)序,克隆,以及在體內(nèi)和體外的細(xì)胞和生物中的引用。
 
總蛋白濃縮,去污劑和內(nèi)毒素去除試劑盒特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì):
 
1.內(nèi)毒素流過(guò)時(shí),色譜柱結(jié)合目標(biāo)蛋白質(zhì);
2.將內(nèi)毒素水平降低到小于1 EU / µg;
3.蛋白質(zhì)回收率超過(guò)95%;
4.濃縮蛋白質(zhì)樣品并同時(shí)去除去污劑,鹽和內(nèi)毒素;
5.有效去除各種去污劑,包括SDS,Triton®X-100,CHAPS,NP-40和Tween 20。
 
總蛋白濃縮,去污劑和內(nèi)毒素去除試劑盒,廠家測(cè)試:
 
處理前后內(nèi)毒素水平
蛋白回收率高
從樣本裂解物中有效去除SDS
蛋白質(zhì)高回收率和高除鹽率
 
產(chǎn)品引用精彩文章鑒賞:
 
1.Social learning and amygdala disruptions in Nf1 mice are rescued by blocking p21-activated kinase.Nature Neuroscience.2014.
2.The Toll-like receptor 5 ligand flagellin promotes asthma by priming allergic responses to indoor allergens.Nature Medicine.2012.
 
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