隨著益生菌相關(guān)前沿研究快速發(fā)展，人們生活水平顯著提升，益生菌消費市場發(fā)展速度極快。實現(xiàn)益生菌快速精準(zhǔn)計數(shù)，對于增長迅速的益生菌市場需求，嚴(yán)格監(jiān)控益生菌產(chǎn)品質(zhì)量，贏得消費者信任，至關(guān)重要。
 

近日杜邦美國威斯康星州的麥迪遜工廠營養(yǎng)與生物科技業(yè)務(wù)部發(fā)表益生菌精準(zhǔn)計數(shù)前沿技術(shù)研究成果[1]。

傳統(tǒng)益生菌計數(shù)方式為平板計數(shù)法。相對來說，該方法由于計數(shù)誤差大（CV：15-35%），培養(yǎng)周期長（2-3天），耗費人力多等問題，已很難滿足益生菌類產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)控等分析計數(shù)需求。益生菌全球標(biāo)桿企業(yè)—杜邦公司，近日發(fā)表的分析數(shù)據(jù)顯示，相對平板技術(shù)法，流式分析法和數(shù)字PCR法（ddPCR）可以更快更穩(wěn)定精準(zhǔn)地完成益生菌計數(shù)分析（包括總菌，活菌和死菌計數(shù)分析），這兩種方法均可在幾小時內(nèi)完成大量益生菌計數(shù)分析（圖1和2），并且計數(shù)穩(wěn)定性有顯著改善，針對不同菌種大量數(shù)據(jù)分析顯示，這兩種計數(shù)方法變異系數(shù)基本可控制在5%以內(nèi)。其中，分析單個樣品速度更快（<3min/樣品）的流式分析益生菌方案，采用英國Apogee Flow公司專注納米顆粒分析的Apogee納米流式來完成相關(guān)分析工作，已在杜邦公司全球?qū)嶒炇页墒爝\行多年，也為益生菌相關(guān)流式分析ISO標(biāo)準(zhǔn)建立做出了積極貢獻。而此次文章提出的ddPCR分析法，則進一步補充了益生菌精準(zhǔn)計數(shù)，特異菌種精準(zhǔn)分析的相關(guān)方案。

杜邦營養(yǎng)與健康事業(yè)部是全球益生菌科技、研究和生產(chǎn)的領(lǐng)導(dǎo)者，提供最廣泛的具有臨床文獻支持的菌株及益生菌菌產(chǎn)品組合。杜邦公司此次發(fā)表的益生菌前沿精準(zhǔn)分析相關(guān)方案，不僅再一次顯示出杜邦公司在益生菌生產(chǎn)研究方面的領(lǐng)導(dǎo)地位，更是為行業(yè)內(nèi)益生菌快速精準(zhǔn)計數(shù)分析提供了重要參考方案。
 

圖1，平板計數(shù)法，流式分析法，ddPCR法簡要分析流程


圖2，A平板計數(shù)法，B ddPCR法，C流式分析法代表數(shù)據(jù)



圖3，益生菌不同計數(shù)方法，變異系數(shù)對比數(shù)據(jù)

Apogee Flow納米流式專注納米顆粒精準(zhǔn)分析，憑借極佳的70nm散射光靈敏度，極高的10nm分辨率，精準(zhǔn)穩(wěn)定的絕對計數(shù)，多色熒光標(biāo)記以及高通量自動上樣等，在納米顆粒及益生菌等小顆粒分析方面處于領(lǐng)導(dǎo)地位。在微生物小顆粒分析方面，不僅為杜邦公司全球?qū)嶒炇姨峁┮嫔�菌快速精�?zhǔn)分析方案，同樣可為致病微生物，食品微生物，微生物菌群多樣性等微生物分析工作提供快速精準(zhǔn)分析方案，如美國FDA將其應(yīng)用于致病微生物快速精準(zhǔn)分析[2]，中國計量科學(xué)研究院將其應(yīng)用于奶制品致病菌快速精準(zhǔn)分析[3]。 

參考資料：

1，Hansen S J Z, Tang P, Kiefer A, et al. Droplet digital PCR is an improved alternative method for high-quality enumeration of viable probiotic strains[J]. Frontiers in Microbiology, 2020, 10: 3025.

2，Williams A J, Cooper W M, Ramsaroop S, et al. Rapid Flow Cytometry Detection of a Single Viable Escherichia coli O157: H7 Cell in Raw Spinach Using a Simplified Sample Preparation Technique[J]. Frontiers in Microbiology, 2017, 8: 1493

3，Wang B, Liu S, Sui Z, et al. Rapid Flow Cytometric Detection of Single Viable Salmonella Cells in Milk Powder[J]. Foodborne Pathogens and Disease, 2020.

4，http://www.bio-gene.com.cn/NewsView.asp?id=3016

 

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