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實驗中的氧化損傷-氧化應(yīng)激(Oxidative Stress,OS)

瀏覽次數(shù):9192 發(fā)布日期:2020-4-7  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負

氧化應(yīng)激(Oxidative Stress,OS)是機體活性氧成分與抗氧化系統(tǒng)之間平衡失調(diào)引起的一系列適應(yīng)性的反應(yīng)。干擾細胞正常的氧化還原狀態(tài),會制造出過氧化物與自由基導致毒性作用,因此損害細胞的蛋白質(zhì)、脂類和核酸。發(fā)生在人類的氧化壓力,被認為是造成亞斯伯格癥候群、自閉癥、阿茲海默癥、帕金森氏癥、注意力缺陷過動癥、動脈粥樣硬化、心臟衰竭及癌癥等的成因。然而活性氧也有它的益處,免疫系統(tǒng)可利用活性氧攻擊并殺死病原。短期的氧化應(yīng)激在防止老化上,也提供了重要的步驟,稱做毒物興奮效應(yīng)
。


 

氧化應(yīng)激可通過測量活性氧(ROS)來直接評估,或通過過度產(chǎn)生的ROS對脂質(zhì),蛋白質(zhì)和核酸造成的相關(guān)損害來間接評估。盡管直接測量ROS是理想的方法,但是與ROS的瞬時特性相比,通常更依賴于間接方法因為生物分子上的損傷標記相對穩(wěn)定。
 

為了幫助您確定在實驗系統(tǒng)中最適合使用的方法,艾美捷科技作為專業(yè)的生命科學領(lǐng)域解決方案供應(yīng)商,為您推薦開曼生物品牌的氧化損傷相關(guān)產(chǎn)品。以下是用于檢測最常見的氧化損傷生物標記物的分析技術(shù)的分類。
 


 

ROS:氧氣作為正常代謝的一部分被電子還原,導致形成各種ROS,包括過氧化氫(H2O2)和超氧化物(O2•-)。當不受控制的氧化對生物系統(tǒng)造成壓力時,會對細胞大分子造成損害。ROS的測定不能識別ROS產(chǎn)生的來源(即正常狀態(tài)與疾病狀態(tài)),但是如果實驗?zāi)P吞幱趬毫ο拢瑒tROS可能增加并且分子成分改變。
 

產(chǎn)品名稱及描述 貨號 指標 說明
Hydrogen Peroxide Cell-Based Assay Kit 600050 細胞外H2O2 利用ADHP(靈敏穩(wěn)定的H2O2探針),并包含過氧化氫酶以檢查試驗的特異性
Mitochondrial ROS Detection Assay Kit 701600 線粒體ROS 使用線粒體特異性熒光ROS檢測試劑在特定條件下測量ROS的產(chǎn)生;包括抗霉素A作為陽性對照
ROS Detection Cell-Based Assay Kit (DHE) 601290 ROS 將氧化還原敏感探針DHE用作O2•-和H2O2的底物;分別包括用于產(chǎn)生和清除ROS的陽性和陰性對照
Xanthine Oxidase Fluorometric Assay Kit 10010895 XO活性 基于多步酶促反應(yīng),其中XO氧化次黃嘌呤時產(chǎn)生的H2O2與ADHP反應(yīng)


RNS:在氧化應(yīng)激過程中也會產(chǎn)生活性氮(RNS)。由一氧化氮合酶(NOS)和O2•-合成的高含量一氧化氮(NO•)導致過氧亞硝酸鹽的形成。NO•本身也與硫醇和鐵硫酶反應(yīng),而過氧亞硝酸鹽與酪氨酸殘基反應(yīng)形成硝基酪氨酸。
 

產(chǎn)品名稱及描述 貨號 指標 說明
Nitrate/Nitrite Colorimetric Assay Kit 780001 NO•代謝物 將少量添加的NADPH與催化系統(tǒng)結(jié)合使用,將用過的NADP+循環(huán)回NADPH以避免NADPH干擾Griess試劑的化學性質(zhì);對于血漿和尿液等液體的分析非常有效,但不能通過體外NOS分析(添加了過量的NADPH)進行NO2-和NO3-分析
Nitrate/Nitrite Colorimetric Assay Kit (LDH method) 760871 體外NOS活性和NO•代謝物 用于從添加了過量NADPH的體外NOS分析中分析NO2-和NO3-;protocol中包括使用LDH移除多余的NADPH的額外步驟
Nitrate/Nitrite Fluorometric Assay Kit 780051 NO•代謝物 使用DAN代替Griess試劑,比色儀靈敏度提高20倍;允許檢測低濃度的NO2-和NO3-(最小可檢測NO2/NO3量約為50nM)
NOS Activity Assay Kit 781001 NOS活性 通過NOS監(jiān)測放射性標記的精氨酸向瓜氨酸的轉(zhuǎn)化


DNA/RNA損傷:鳥嘌呤是DNA和RNA損傷時最容易氧化的堿基。為糾正這種損傷而啟動的修復過程將下列氧化的鳥嘌呤類釋放到尿液中:


8-羥基鳥嘌呤——無核糖的堿

8-羥基鳥苷——RNA的核苷

8-羥基-2-脫氧鳥苷——DNA的脫氧核苷


可以檢測多種氧化鳥嘌呤種類的測定法比只限于分析一種(例如8-羥基-2-脫氧鳥苷)的測定法能捕獲更多的氧化損傷生物學相關(guān)產(chǎn)物。
 

產(chǎn)品名稱及描述 貨號 指標 說明
DNA/RNA Oxidative Damage (High Sensitivity) ELISA Kit 589320 8-羥基-2-脫氧鳥苷,8-羥基鳥苷和8-羥基鳥嘌呤 單克隆抗體能夠檢測8-羥基-2-脫氧鳥苷(DNA氧化損傷標記物),8-羥基鳥苷(RNA損傷標記物)和8-羥基鳥嘌呤(DNA/RNA損傷標記物),對8-羥基-2-脫氧鳥苷有最高的選擇性和靈敏度;盡管高斜率表明檢測到其他未知物質(zhì),但與LC/MS測量的8-羥基-2-脫氧鳥苷相關(guān)
DNA/RNA Oxidative Damage (Clone 7E6.9) ELISA Kit 501130 8-羥基-2-脫氧鳥苷和8-羥基鳥苷 單克隆抗體(克隆7E6.9)能夠以相同的選擇性和靈敏度檢測8-羥基-2-脫氧鳥苷(DNA氧化損傷標記)和8-羥基鳥苷(RNA損傷標記);與LC/MS測量8-羥基-2-脫氧鳥苷和8-羥基鳥苷的組合相關(guān)


蛋白質(zhì)氧化和硝化:蛋白質(zhì)氧化的最常見標志是蛋白質(zhì)羰基含量。氧化還原循環(huán)陽離子與蛋白質(zhì)結(jié)合,并與ROS的攻擊結(jié)合,導致形成含有羰基(酮,醛)的氨基酸衍生物。香煙煙霧和醛類也會將羰基引入蛋白質(zhì)中。另外,ROS暴露于蛋白質(zhì)的蛋氨酸殘基會產(chǎn)生蛋氨酸亞砜(MetO),這是一種氧化修飾,如果未被MetO還原酶逆轉(zhuǎn),則會進一步氧化為蛋氨酸砜,并可能導致蛋白質(zhì)功能障礙。


蛋白質(zhì)上硝基酪氨酸的存在用作NO•與 O2•−反應(yīng)時體內(nèi)形成的過氧亞硝酸鹽的標志物。當過氧亞硝酸鹽經(jīng)歷雜化裂解時,釋放出的硝化氮離子硝酸鹽蛋白酪氨酸殘基。NO•可以通過RNS介導的S-亞硝基化過程直接修飾蛋白質(zhì),其中NO•基團與蛋白質(zhì)半胱氨酸殘基的硫醇基結(jié)合,從而形成S-NO部分。
 

產(chǎn)品名稱及描述 貨號 指標 說明
Protein Carbonyl Colorimetric Assay Kit 10005020 蛋白質(zhì)羰基含量 利用DNPH和蛋白質(zhì)羰基之間的反應(yīng)作為蛋白質(zhì)氧化的讀數(shù)
Methionine Sulfoxide Immunoblotting Kit 600160 含有MetO殘基的蛋白質(zhì) 使用從兔血清中分離的MetO多克隆抗體,該抗體對MetO具有特異性,并且與蛋氨酸砜的交叉反應(yīng)性最小
Nitrotyrosine IP Kit 601220 硝酸酪氨酸含量 利用吸附劑與硝基酪氨酸單克隆抗體結(jié)合使用,以捕獲和提取硝化蛋白
S-Nitrosylated Protein Detection Kit (Biotin Switch) 10006518 S-NO蛋白 利用改良的生物素開關(guān)方法直接標記S-NO蛋白

 

 

S-Glutathionylated Protein Detection Kit 10010721 蛋白質(zhì)-PSSG加合物 利用改良的生物素開關(guān)方法直接標記蛋白質(zhì)-PSSG加合物


脂質(zhì)過氧化:脂質(zhì)過氧化導致不飽和脂質(zhì)的高反應(yīng)性和不穩(wěn)定的氫過氧化物的形成。 它們可以通過不穩(wěn)定的氫過氧化物的各種分解產(chǎn)物(例如烷烴,酮,醛)直接或間接評估。通過組織脂質(zhì)的隨機氧化產(chǎn)生的8-異前列腺烷目前被認為是體內(nèi)脂質(zhì)過氧化最可靠的生物標記之一。它是脂質(zhì)過氧化作用的特定產(chǎn)物,其穩(wěn)定且在所有正常生物體液和組織中的含量均可檢測到。磷脂中酯化水平的測量可用于確定目標靶位點脂質(zhì)過氧化的程度。
 

產(chǎn)品名稱及描述 貨號 指標 說明
DHN-MA EIA Kit 501140 DHN-MA, a4-HNE meta bolite 與人類,小鼠,大鼠,狗和豬的樣品兼容
8-Isoprostane ELISA Kit 516351 8-異前列腺素 使用AChE示蹤劑進行過夜檢測(孵育時間= 18小時);檢測范圍0.8-500 pg/ml;檢出限(80% B/B0)約3 pg / ml
8-Isoprostane Express ELISA Kit 516360 8-異前列腺素 使用AChE示蹤劑4小時測定;檢測范圍2.5-1500 pg/ml;檢出限(80% B/B0)約10pg / ml
STAT-8-Isoprostane ELISA Kit 500431 8-異前列腺素 使用AP示蹤劑檢測速度極快(約2小時)。檢測范圍23.4-3000 pg/ml;檢出限(80% B/B0)約45 pg/ml
Lipid Hydroperoxide (LPO) Assay Kit 705002 LPO 設(shè)計用于單管分光光度計以讀取結(jié)果
Lipid Hydroperoxide (LPO) Assay Kit (96 well) 705003 LPO 設(shè)計用于可重復使用的玻璃板
TBARS Assay Kit 10009055 MDA-TBA加合物 測定脂質(zhì)過氧化的標準方法;用熒光法測量時,反應(yīng)可產(chǎn)生更高的靈敏度,但可以選擇比色法
TBARS (TCA Method) Assay Kit 700870 MDA-TBA加合物 通過合并TCA沉淀程序,具有改進樣品處理和減少工作量的優(yōu)勢;保持與原始TBARS分析相同的可靠性和準確性;包括樣品酸沉淀方案以避免混淆可溶性TBARS


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