作為報(bào)告基因,熒光蛋白(如綠色熒光蛋白(GFP)及其變體紅色熒光蛋白(RFP)和黃色熒光蛋白(YFP)或者生物熒光素酶(如螢火蟲熒光素酶(Firefly luciferase,F(xiàn)luc)海參熒光素酶(Renilla luciferase,Rluc))已成為研究基因調(diào)控、抗癌藥物活性考察、基因突變分析、生物成像、DNA雜交分析及實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)腫瘤發(fā)生發(fā)展情況等生物過程的潛在有效分析工具。但GFP等熒光蛋白的靈敏性相比于熒光素酶要低很多,而且GFP在細(xì)胞內(nèi)容易累積,使其不適合實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),F(xiàn)有的生物熒光素酶中,F(xiàn)luc發(fā)光時(shí)需要輔助因子ATP和Mg2+,Rluc雖然不依賴于ATP和Mg2+等輔助因子,但光子產(chǎn)量較低,另外Fluc和Rluc均不能分泌表達(dá),監(jiān)測(cè)酶活性時(shí)需要裂解細(xì)胞,操作繁瑣且不能實(shí)現(xiàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的連續(xù)觀察。
近年,發(fā)現(xiàn)的一種來源于海洋橈腳類動(dòng)物Gaussia princeps的Gaussia 分泌型熒光素酶是體內(nèi)已知最小的可自然分泌的熒光素酶。因其可分泌、易于監(jiān)測(cè)、靈敏度過、半衰期短、可進(jìn)行活細(xì)胞或生物體實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)等特性,在研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用、蛋白定位、小干擾RNA(siRNA)沉默技術(shù)、腫瘤模型藥物治療評(píng)價(jià)、監(jiān)測(cè)啟動(dòng)子活性、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)腫瘤發(fā)生發(fā)展情況和高通量藥物篩選等中得到廣泛應(yīng)用。通過報(bào)告基因載體,Gaussia可用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)。表達(dá)后的Gaussia為單條肽鏈的單體酶,其分子較。185aa),且具有分泌性信號(hào)肽,因此可通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分泌到細(xì)胞外。該熒光素梅催化底物腔腸素的氧化反應(yīng)并且發(fā)光(480nm),該反應(yīng)無需ATP參與。
與其他熒光素酶相比,使用Gaussia 作為報(bào)告基因有更多的優(yōu)勢(shì):
分泌型堿性磷酸酶(secreted alkaline phos-phatase,SEAP)是人胎盤堿性磷酸酶的突變體,最大特點(diǎn)是能由表達(dá)細(xì)胞分泌到細(xì)胞外,檢測(cè)時(shí)可在不破壞細(xì)胞的情況下,任意時(shí)間點(diǎn)取細(xì)胞培養(yǎng)上清液進(jìn)行重復(fù)、動(dòng)態(tài)的檢測(cè),常作為熒光素酶檢測(cè)過程中信號(hào)標(biāo)準(zhǔn)化的內(nèi)參。
GeneCopoeia 提供預(yù)制和定制的 GLuc-ON™ 啟動(dòng)子克隆,包括單報(bào)告基因載體系統(tǒng)和雙報(bào)告基因載體系統(tǒng)。單報(bào)告基因載體系統(tǒng)以 Gluc 作為啟動(dòng)子的報(bào)告基因;雙報(bào)告基因載體系統(tǒng)以 Gluc 作為啟動(dòng)子報(bào)告基因,以SEAP作為信號(hào)標(biāo)準(zhǔn)化的內(nèi)參,可在活細(xì)胞中對(duì)超過 20,000 種人和 18,000 種小鼠啟動(dòng)子進(jìn)行實(shí)時(shí)活性分析。
分泌型雙熒光素酶檢測(cè)試劑盒
Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit用于檢測(cè)雙報(bào)告系統(tǒng)中 Gluc 和SEAP的活性。Gluc 和SEAP都是分泌型蛋白,無需裂解細(xì)胞就能從培養(yǎng)基中獲得實(shí)驗(yàn)樣本。
貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品特性 |
LF031 | Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit | 100rxns | 無需破碎細(xì)胞,吸取上清;檢測(cè)Gluc 和SEAP酶活性 |
LF032 | 300rxns |
分泌型單熒光素酶檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品特性 |
LF061 | Secrete-PairTM Gaussia Luciferase Assay Kit | 100rxns | 無需破碎細(xì)胞,吸取上清;檢測(cè)Gluc的酶活性 |
LF062 | 1000rxns |
熒光素酶報(bào)告基因載體:
貨號(hào) | 產(chǎn)品 | 描述 | 規(guī)格 |
ZX101 | pEZX-GN01 | pEZX-GN01 包含Gluc和SEAP的報(bào)告載體 | 10µg |
ZX102 | pEZX-GN03 | pEZX-GN03 包含Gluc和SEAP的報(bào)告載體 | 10µg |
ZX103 | pEZX-GA01 | pEZX-GA01 包含Gluc和SEAP的報(bào)告載體 | 10µg |
ZX104 | pEZX-GA02 | pEZX-GA02 包含Gluc和SEAP的報(bào)告載體 | 10µg |
ZX105 | pEZX-GA03 | pEZX-GA03 包含Gluc和SEAP的報(bào)告載體 | 10µg |
ZX106 | pEZX-LvGN01 | pEZX-LvGN01 包含Gluc和SEAP的報(bào)告載體 (lentiviral) | 10µg |
ZX107 | pEZX-LvGA01 | pEZX-LvGA01 包含Gluc和SEAP的報(bào)告載體 (lentiviral) | 10µg |
GeneCopoeia致力于為國內(nèi)生命科學(xué)工作者提供一流的產(chǎn)品和及時(shí)周到的服務(wù),通過豐富的基因、蛋白、抗體、分析試劑盒等產(chǎn)品線,加速您的研究進(jìn)程。作為GeneCopoeia在中國的區(qū)域一級(jí)代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的GeneCopoeia產(chǎn)品以及客戶訂制化服務(wù)。
作為GeneCopoeia在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的GeneCopoeia公司產(chǎn)品以及客戶訂制化服務(wù)。