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基礎(chǔ)研究中如果加入動物實驗部分則使得研究更加趨于完善,投稿時中稿率也相應(yīng)會增加。但將動物實驗做好卻不是一件容易的事情。
這篇文章主要講動物模型的構(gòu)建技術(shù),把骨科、糖尿病相關(guān)的動物模型構(gòu)建做了一個全面的技術(shù)匯總,建議先碼后讀,文章內(nèi)容有部分做了簡化,想看詳細講解可以在文末獲取課件!
一、骨科相關(guān)動物模型
1.骨關(guān)節(jié)炎
1)骨關(guān)節(jié)炎模型構(gòu)建方法(誘發(fā)性)-關(guān)節(jié)腔內(nèi)手術(shù)法、關(guān)節(jié)腔注射法。
2)模型評分標(biāo)準(zhǔn)
① Safranin O染色與OARSI評分(PMID:31046827、30942801)
② HE染色與OARSI評分(PMID:30609097)
③ Safranin O染色與Mankin評分(PMID:30609097)
2.骨質(zhì)疏松癥
1)骨關(guān)節(jié)炎模型構(gòu)建方法
去趨法模型
PMID:31037128
實驗動物:小鼠
方法:在戊巴比妥麻醉下進行雙側(cè)卵巢切除術(shù)以誘導(dǎo)骨質(zhì)疏松癥,同時對照組小鼠僅進行卵巢外置但未切除。
2)模型檢測指標(biāo)(PMID:31037128)
① HE染色
② Micro-CT
③ TRAcP染色
④ Micro-CT相關(guān)指標(biāo)檢測
3.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎
類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種慢性自身免疫性疾病狀態(tài),其特征是滑膜增生,軟骨退化和脊椎關(guān)節(jié)的骨侵蝕
4.強直性脊柱炎
1)強直性脊柱炎模型構(gòu)建方法
2)模型檢測指標(biāo) (PMID:15082495、7561688)
① HE染色
② 關(guān)節(jié)側(cè)視圖
③ PCR鑒定
、
二、糖尿病相關(guān)動物模型
1.糖尿病動脈粥樣硬化
1)模型構(gòu)建(PMID:30826357)
使 用 鏈 佐 星 (STZ) 注 射ApoE-/-小鼠,建立糖尿病 ApoE-/-小鼠模型,同時與 ApoE-/-小鼠采用高脂喂養(yǎng) 18 周
2)模型檢測指標(biāo)(PMID:29107826、28345659)
3)生化指標(biāo)檢測
4)超聲檢測
5)主動脈染色檢測
2.糖尿病心肌病
1)誘發(fā)性DCM模型
模型構(gòu)建(PMID:29732743)
實驗動物:大鼠
方法:各大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素150 mg·kg-1( STZ用0.1 mol·L-1,pH 4.2檸檬酸-枸櫞酸鈉溶液稀釋,現(xiàn)配現(xiàn)用),并給予高脂飼料進行喂養(yǎng)。
① 模型檢測指標(biāo)血糖檢測
② HE染色
③ 超聲心電圖
2)自發(fā)性1型DCM模型
3)自發(fā)性2型DCM模型
3.糖尿病視網(wǎng)膜病變
1)模型構(gòu)建PMID:30862093
實驗動物:小鼠
方法:糖尿病雄性db / db(BKS.Cg-Dock7m + / + Leprdb / J)小鼠。喂養(yǎng)至21周
2)模型檢測指標(biāo)
①膠質(zhì)原纖維酸性蛋白染色
②TUNEL和HE染色
DR組視網(wǎng)膜組織內(nèi)核層及外核層結(jié)構(gòu)松散,細胞排列紊亂
GCL,神經(jīng)節(jié)細胞層; INL,內(nèi)核層; ONL,外核層
三、動物模型構(gòu)建總結(jié)
1.臨床資料合理性
在納入臨床資料時,需關(guān)注特定疾病患者的流行病學(xué)趨勢,即疾病易發(fā)年齡,男女比例等,同時需考慮是否與體重、基因表達等具有相關(guān)性。
2.模型合理性
選擇合適,簡便,成模率高,重復(fù)性強的建模方法使實驗設(shè)計更合理。
3.檢測指標(biāo)的合理性
針對特定模型,特異性選擇檢測指標(biāo),如骨質(zhì)疏松主要在于骨密度相關(guān)指標(biāo)的檢測,而類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎主要在于滑膜增生、軟骨退化相關(guān)指標(biāo)的檢測。
4.建模時需遵守動物實驗倫理
對實驗動物產(chǎn)生疼痛的手術(shù)需進行麻醉且術(shù)后需鎮(zhèn)痛,動物模型構(gòu)建完成后需最大程度的利用動物模型。