本次文章內(nèi)容豐富全面,主要分為2部分,尾靜脈注射基本步驟和技術(shù)深度分析與拓展,涵蓋幾種小鼠品系的尾靜脈注射技巧,并附有專業(yè)視頻分析,非常值得大家閱讀哦!
Part Ⅰ 實驗基本步驟
1. 準備工作 (1ml注射器,酒精棉球,小鼠固定器)如下圖:
2. 小鼠的固定 (3種方式)
尾靜脈注射時需要把小鼠固定,前部有氣孔保證小鼠呼吸,后部可以將尾部拉出,露出尾巴即可。最好使用小鼠固定器,不要讓小鼠在固定器中有太多活動空間,防止注射時亂動。
然而我們卻總是面臨小鼠固定器損壞或丟失的情況,或者有的同學(xué)壓根嫌棄固定器,覺得安裝起來太麻煩,這里分享給大家2個替補的好方案,簡單快捷。
籠蓋壓尾法:動物籠蓋子露出尾巴,注射時最好讓人幫你扶住籠子,固定住小鼠。
離心管固鼠法: 用手邊50ml離心管,底部開若干小口便于小鼠呼吸,然后把蓋子戳一個洞,拉出鼠尾,為了讓小鼠順利進入離心管,可用黑布包裹試管,注射時用膠帶把離心管固定在實驗臺上。
3. 找準尾靜脈,并擴張血管
相信有一個困惑很多人的問題,尾靜脈到底是哪條?這么細小,能扎進去嗎?
首先,想找準小鼠靜脈血管,必須了解尾靜脈組成。結(jié)合下圖所示:
一般來講,小鼠尾部有3條靜脈,位于背側(cè)和左右兩側(cè),由于背部靜脈較深且細,一般選擇左右兩側(cè)尾靜脈進行注射;另外1條動脈,位于腹側(cè)。
第二步:擴張靜脈血管(3種途徑)
鑒于小鼠尾靜脈細小并且不明顯,所以在注射之前需要將血管擴張,便于注射。
① 可以將小鼠尾部在45~50℃左右溫水浸浴2min,以擴張靜脈;
② 用酒精擦拭血管,可使血管擴張,同時也可軟化表皮角質(zhì);
③ 利用紅外線烤燈加熱鼠尾3-5min,使靜脈充盈。
4. 注射(最關(guān)鍵最困難部分)
當(dāng)我們準備好注射藥物,找準尾靜脈固定后,就開始進行注射了。具體步驟如下:
①左手固定鼠尾,右手持注射器,第一次注射從距尾尖2~3cm處(1/3處)進針。在這進針的原因有2個:此處皮膚較薄,血管清晰,進針容易;而且一旦注射不成功,再次注射時有更多近端注射的余地;
②右手進針時針頭與桌面平行,一旦進入,將針頭稍稍上挑;
③待針頭進入血管后見回血,立即注射,注射時可明顯地感覺到針行通暢,毫無阻力,代表注射成功;若針頭不在靜脈血管中,手感針行有阻力,注射失;
④注射完畢后,為了避免藥物流出,針頭緩慢旋轉(zhuǎn)抽出;
⑤注射后小鼠傷口處理,用紗布或者酒精棉球按壓傷口,直到不出血為止,一般3-5min,這樣有利于創(chuàng)口盡快恢復(fù),以利于下次注射。
注意事項:
① 進針時不要太深,針頭入血管后馬上把針頭略往上,平行進針;
② 注射時如果阻力較大,甚至出現(xiàn)滲液,則說明不在靜脈內(nèi),需要拔出再次注射;
③注射時推液時不要過快,平緩注射;
④注射器吸入藥液后,務(wù)必一定要將空氣推出,防止因空氣進入心臟,造成小鼠死亡,切記:不可注射含有空氣的液體。
便于更好理解,以裸鼠和小白鼠為例,請大家花1min時間,觀看下面視頻:
https://v.qq.com/x/page/x0395gqs2tf.html
Part Ⅱ 技術(shù)深度分析與拓展
1. 注射成功案例分析
結(jié)合上面動圖,我們可以看到注射成功的特點:
① 進針時,針頭可見少量回血,代表注射到靜脈
② 注射到靜脈,推液幾乎沒有阻力
③ 隨著藥液推進,能清晰看到液體在血管流動
④ 拔針時,傷口處會有少量血液和藥液的混合物
如下圖為注射成功后的尾巴:傷口處會有少量血液和藥液的混合物
2. 注射失敗案例分析
結(jié)合上面動圖,我們可以看到注射失敗的特點:
① 如果注射到靜脈以外,強行推液,阻力較大
② 注射時,液體無法進入從而導(dǎo)致血管變白
③ 出針后,對于有大量血或者藥液大量滲出
④ 由于失敗后尾部會有淤血,尾巴顏色變暗并腫脹
如下圖為注射失敗的尾巴:有大量血液和藥液的混合液滲出
3. 不同品系的小鼠如何對待
不同品系的小鼠尾靜脈的組成幾乎是一樣的,只是不同品系和膚色的小鼠尾巴的識別度不一樣,所以我們需要區(qū)別對待。
① 裸鼠(注射最簡單)尾巴如下圖:
因為裸鼠的靜脈血管呈扁平狀且細小,但特別容易識別,因此在各類小鼠品系中注射最簡單;按上述操作即可。
② 小白鼠 (注射比較簡單)尾巴如下圖:
一般小白鼠的靜脈血管在酒精擦拭后,比較清晰可見,注射時比較簡單。
③ 小黑鼠(注射最難)尾巴如下圖:
小黑鼠的血管不易辨別,所以需要紅外燈等外界條件輔助下,充分刺激后使其血管盡量擴張,便于識別;另外尾巴皮膚較硬,適當(dāng)控制力度。
4. 靜脈注射物為:細胞系、病毒、細菌時等如何處理?
尾靜脈注射除了作為一種常見的給藥方式,也有很多其他應(yīng)用。如全身性的白血病模型、小鼠乳腺癌肺部轉(zhuǎn)移模型,均需要將腫瘤細胞利用尾靜脈方式注射。例如還有模擬其他細菌、病毒等感染模型,也常需要尾靜脈注射。
注射手法和藥物注射基本一樣,但還是需要注意一下幾點!
① 相比藥液,注射的細胞更加粘稠,所以一定要均勻稀釋后,吸入注射器;
②確認靜脈血管后,由于細胞,細菌及病毒等對小鼠身體傷害大,一定緩慢注射,過快會造成小鼠休克,嚴重的話會造成小鼠死亡;
③ 注射大量細胞或者病毒后,小鼠會變得虛弱,體溫變涼,需放置于37℃的恒溫平臺上;
④ 腫瘤細胞、病毒及細菌等注射時,一定要做好防護工作,避免液體濺出,造成自身傷害。
5. 對于SD大鼠的注射
基本操作步驟和小鼠差不多,重點是在于:
① 老鼠個體大,一定要固定好保證一定不能亂動;
② 充分暴露尾靜脈,可以拿溫水多泡或者酒精多擦試幾次。
看了咱們這篇圖文并茂的文章,有沒有覺得尾靜脈注射并不難呢,牢記文章所說的幾點實驗技巧,并且心平氣和地地多加練習(xí),相信你一定可以完成。當(dāng)然了,如果你的實踐操作中有任何難題,可以給我們留言,我們盡力幫你解答。