中國(guó)和美國(guó)的實(shí)驗(yàn)室也許能夠找到幾乎一樣的SPF小鼠，卻沒(méi)人敢保證可以在上海和紐約的寵物店買(mǎi)到同樣的“臟鼠”？似乎干凈的小鼠都是一致的，而污染的小鼠卻各有各的疾病。試想如果將這些“臟鼠”作為模式生物，不穩(wěn)定的性狀和難以重復(fù)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的定會(huì)令人頭疼。因此穩(wěn)定的---SPF小鼠對(duì)于科研筒子們來(lái)說(shuō)至關(guān)重要。

很多人肯定有這樣的疑問(wèn)，面對(duì)美國(guó)jax或者其他動(dòng)物房來(lái)源的小鼠，路途跋涉，如何保證小鼠干凈并順利進(jìn)入SPF動(dòng)物房呢？照個(gè)紫外，滅滅菌傳遞進(jìn)去就好了？然而事情似乎遠(yuǎn)遠(yuǎn)比我們想象的要復(fù)雜，下面就一起跟隨著小鼠感受一下它所經(jīng)歷的考驗(yàn)吧。

SPF級(jí)動(dòng)物房系統(tǒng)

為了保證小鼠的健康和疾病預(yù)防，一般外來(lái)小鼠必須經(jīng)過(guò)隔離和凈化才能進(jìn)入如上圖所示的SPF級(jí)動(dòng)物房?jī)?nèi)生活。原來(lái)小鼠過(guò)上養(yǎng)尊處優(yōu)的生活也是蠻不容易的呢！

隔離和凈化目的：疾病防疫，防止鼠群感染

作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，實(shí)驗(yàn)前必須要確定健康無(wú)病，一般國(guó)內(nèi)外最廣泛使用的即SPF級(jí)，指體內(nèi)無(wú)特定的微生物和寄生蟲(chóng)存在的動(dòng)物，實(shí)際上在指無(wú)傳染病的健康動(dòng)物。為了避免實(shí)驗(yàn)小鼠群體被感染疾病，保持鼠群的健康，必須對(duì)外來(lái)小鼠做好疾病預(yù)防工作。

1、什么是隔離？

將進(jìn)出境或國(guó)內(nèi)調(diào)運(yùn)的有關(guān)動(dòng)物在檢疫機(jī)關(guān)指定的場(chǎng)所內(nèi)，于隔離條件下進(jìn)行飼養(yǎng)，并在其生長(zhǎng)期間進(jìn)行檢驗(yàn)、檢測(cè)和處理的一項(xiàng)措施，通過(guò)隔離檢疫可以避免或減少前期微生物風(fēng)險(xiǎn)預(yù)評(píng)中的漏檢問(wèn)題，更為有效的控制有害生物的輸入或輸出。

隔離環(huán)境：以隔離器為主體及其它附屬裝置組成的飼養(yǎng)系統(tǒng)，是獨(dú)立通風(fēng)飼養(yǎng)系統(tǒng)、進(jìn)入的全新風(fēng)潔凈度達(dá)100級(jí)，無(wú)菌并維持正壓狀態(tài)，一切物品都要嚴(yán)格滅菌后經(jīng)傳遞窗送入，操作時(shí)，工作人員只能通過(guò)隔離器上的橡膠手套來(lái)進(jìn)行飼養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。

隔離器系統(tǒng)

隔離的步驟：

按規(guī)定，凡進(jìn)口小鼠，必須在隔離室進(jìn)行檢疫觀察飼養(yǎng)1個(gè)月，隔離結(jié)束后，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求繼續(xù)國(guó)內(nèi)配送小鼠或轉(zhuǎn)入凈化、代繁部門(mén)。

隔離分為兩種：

① 輸入隔離：進(jìn)口小鼠

如直接引進(jìn)JAX來(lái)源小鼠，必須隔離器滿1個(gè)月，并提供相應(yīng)的隔離檢疫報(bào)

② 輸出隔離：出口小鼠

小鼠進(jìn)入隔離器隔離，一個(gè)月內(nèi)，按照出入境及外方檢疫要求安排微生物檢測(cè)，出具檢測(cè)報(bào)告，以備出口單證使用

2、什么是凈化？

針對(duì)于外來(lái)小鼠需要進(jìn)入無(wú)菌動(dòng)物房，由于各種原因如接觸到外界環(huán)境，小鼠可能被病原體感染，為了保證小鼠健康，干凈凈地順利進(jìn)入動(dòng)物房，必須經(jīng)過(guò)凈化這一步。如下：

 

 

 凈化目前的技術(shù)主要是：體外受精--胚胎移植(IVF-ET)技術(shù)

體外受精（In Vitro Fertilization, IVF）和胚胎移植（Embryo Transfer,ET）

IVF-ET技術(shù)基本原理：小鼠自身雖然可能被感染，但是小鼠的精子或卵細(xì)胞在體內(nèi)是干凈無(wú)菌，借用體外受精這項(xiàng)輔助生殖技術(shù)，將雄性小鼠精子和雌鼠的卵細(xì)胞交配得到受精卵后，再“借腹生子”移植到代孕小鼠，得到您需要更多的SPF級(jí)小鼠。

隨著基因修飾的小鼠大量涌現(xiàn)，我們卻經(jīng)常面臨著小鼠數(shù)目不夠，如從國(guó)外代購(gòu)的小鼠只有4-5只，或者友情贈(zèng)送2只轉(zhuǎn)基因小鼠，這樣的數(shù)量很多時(shí)候無(wú)法滿足我們實(shí)驗(yàn)的需求，IVF技術(shù)既可以滿足小鼠凈化，又可以獲得更多轉(zhuǎn)基因小鼠。

下面我們以這類(lèi)基因修飾的小鼠為例，假設(shè)只提供雄鼠為例，介紹凈化步驟：

（IVF-ET技術(shù)具體步驟可參考我們往期的實(shí)驗(yàn)技巧文章2.4和2.8）

 

注意，凈化基因修飾小鼠有幾種情況：

① 如果提供的是雄性小鼠，一般2-3只，一般得到的是雜合子，周期：2-3個(gè)月，

如果還需要得到純合子，周期更長(zhǎng)，大概5-6個(gè)月

② 如果提供雄性（2-3只）和雌性小鼠（10只以上），獲得純合子，周期：2-3個(gè)月

體外受精技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：

目前小鼠體外受精、胚胎移植技術(shù)已經(jīng)是相當(dāng)成熟, 有時(shí)只需要一只雄鼠，超排技術(shù)獲得大量的卵后,就能進(jìn)行體外受精和胚胎移植, 既可節(jié)省動(dòng)物, 也可加速生物凈化節(jié)奏。

特別是針對(duì)基因編輯小鼠：大多數(shù)的轉(zhuǎn)基因、敲除或者單基因突變的品系多半呈現(xiàn)生育和哺育幼仔能力低下，IVF-ET技術(shù)既可達(dá)到凈化目的, 又加速種群的繁殖。

鑒于此，您完全不用再擔(dān)憂您的小鼠不夠干凈或者數(shù)目不夠，只要經(jīng)過(guò)了隔離或者凈化，您的小鼠就有資格進(jìn)入動(dòng)物房進(jìn)行試驗(yàn)了，就不怕得不到可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)了。

真開(kāi)心，終于到動(dòng)物房里的小哥哥手上啦

最后，請(qǐng)容許小編給大家介紹一下，我們邦耀實(shí)驗(yàn)室的動(dòng)物房的資質(zhì)。它是上海出入境檢驗(yàn)檢疫局指定的實(shí)驗(yàn)大小鼠隔離檢疫場(chǎng)所，擁有多年的進(jìn)出口實(shí)驗(yàn)動(dòng)物經(jīng)驗(yàn)，具有進(jìn)出口代理大小鼠的資質(zhì)�？梢宰羁焖俣葹槟�提供代購(gòu)、進(jìn)出口、隔離檢疫、生物凈化、人工輔助生殖等一站式服務(wù)，所以如果您的實(shí)驗(yàn)需要代購(gòu)大小鼠，或是生物凈化，可以隨時(shí)與我們聯(lián)系，高效溫馨的服務(wù)是我們的宗旨。