流式細(xì)胞儀已被廣泛應(yīng)用于從基礎(chǔ)生命科學(xué)研究到臨床醫(yī)學(xué)研究,涵蓋了細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)、藥理學(xué)、微生物學(xué)、遺傳學(xué)等領(lǐng)域在各學(xué)科中發(fā)揮重要作用。傳統(tǒng)鞘液流系統(tǒng)儀器體積較大,復(fù)雜的軟件系統(tǒng)需要專人操作和維護(hù),大大限制了流式細(xì)胞儀在普通實(shí)驗(yàn)的使用。默克生命科學(xué)秉承一貫的創(chuàng)新理念,突破流式研發(fā)的思維定式,帶來了革命性創(chuàng)新一代Muse™全能細(xì)胞質(zhì)控儀。摒棄鞘液流的微毛細(xì)管上樣系統(tǒng)可進(jìn)行精確的細(xì)胞計(jì)數(shù)并分析細(xì)胞活力,同時具備基礎(chǔ)流式功能,無需專人維護(hù),可直接放置在細(xì)胞房甚至超凈臺中。配備全面的預(yù)置實(shí)驗(yàn)方案以及高品質(zhì)預(yù)包裝試劑盒,無需復(fù)雜操作及實(shí)驗(yàn)參數(shù)設(shè)定。內(nèi)置Pad版觸屏式電腦,引導(dǎo)式軟件設(shè)計(jì),半小時學(xué)會流式,告別復(fù)雜流式實(shí)驗(yàn)。
Muse™全能細(xì)胞質(zhì)控儀從細(xì)胞活力、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等各個方面綜合評估細(xì)胞狀態(tài),大大提升后續(xù)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,同時具備流式檢測其他方面應(yīng)用,如信號通路分析、免疫表型分析等,多方面的應(yīng)用滿足日常實(shí)驗(yàn)需要,流式檢測不再費(fèi)時費(fèi)力。
應(yīng)用:
一、細(xì)胞絕對活力計(jì)數(shù)檢測:
在體外細(xì)胞培養(yǎng)的過程中,群體中總有一些因各種原因而死亡的細(xì)胞,總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比,即是我們常說的細(xì)胞活力!凹(xì)胞質(zhì)控”中最基礎(chǔ)的指標(biāo)便是細(xì)胞活力。MuseTM全能細(xì)胞質(zhì)控儀不僅可以對細(xì)胞進(jìn)行絕對計(jì)數(shù),還可以提供準(zhǔn)確、客觀的細(xì)胞活力數(shù)據(jù),為“細(xì)胞質(zhì)控”提供準(zhǔn)確、客觀的統(tǒng)計(jì)學(xué)依據(jù)。
MuseTM細(xì)胞計(jì)數(shù)與活力檢測試劑盒,采用專利復(fù)合雙熒光標(biāo)記染料,兩種染料分別是細(xì)胞核染料和細(xì)胞活力染料。細(xì)胞核染料是具有膜透性染料,區(qū)分細(xì)胞和細(xì)胞碎片。細(xì)胞活力染料是非透性染料,會進(jìn)入細(xì)胞膜損傷的死細(xì)胞或處于凋亡狀態(tài)的細(xì)胞內(nèi)與核DNA進(jìn)行結(jié)合顯色。通過這兩種染料的組合,可以精確區(qū)分活細(xì)胞、凋亡細(xì)胞、死細(xì)胞和細(xì)胞碎片,同時量化評估細(xì)胞活力狀態(tài)。
二、細(xì)胞周期檢測
細(xì)胞周期是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂完成所經(jīng)歷的全過程。一個細(xì)胞周期包括兩個階段:分裂間期和分裂期。間期又分為三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。細(xì)胞分裂期:M期。細(xì)胞內(nèi)的DNA含量隨細(xì)胞周期進(jìn)程發(fā)生周期性變化。
DNA 含量:
分裂間期:
G1(DNA 合成前期, 2C)、
S (DNA 合成期,2C-4C)、
G2(DNA 合成后期,4C) 。
分裂期:
M期(DNA 為 4C)。
三、細(xì)胞凋亡檢測
細(xì)胞凋亡是檢測細(xì)胞活力及生長狀態(tài)的重要指標(biāo),是細(xì)胞死亡程序中的重要的環(huán)節(jié),也是科研工作者們在基礎(chǔ)和臨床科研中常用的診斷標(biāo)準(zhǔn)。傳統(tǒng)檢測方法中,最經(jīng)典的檢測就是Annexin V & Dead Cell檢測法。
在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),細(xì)胞發(fā)生凋亡早期,PS由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V作為一種磷脂結(jié)合蛋白,與PS有高度親和力,它通過細(xì)胞外側(cè)暴露的PS與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V是檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)。7-AAD是一種核酸染料,它不能透過完整的細(xì)胞膜,但在凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞,7-ADD能夠透過細(xì)胞膜與細(xì)胞核結(jié)合。正常細(xì)胞和早期凋亡細(xì)胞的細(xì)胞膜是完整的不能結(jié)合7-AAD。將Annexin V與7-AAD匹配使用,可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞以及死細(xì)胞區(qū)分開來。基于此原理,Muse全能細(xì)胞質(zhì)控儀提供優(yōu)化預(yù)混試劑盒Muse Annexin V & Dead Cell Kit ,可以簡單、快速對細(xì)胞凋亡狀態(tài)進(jìn)行評估。
四、Muse多色DNA損傷檢測
Muse全能細(xì)胞質(zhì)控儀除了通過表觀特征和遺傳改變對細(xì)胞的存活質(zhì)量全面控制外,設(shè)計(jì)了一系列的信號通路試劑盒,方便科研工作者對“細(xì)胞質(zhì)控”過程中發(fā)生改變的誘因進(jìn)行全面研究。
DNA損傷應(yīng)答是細(xì)胞內(nèi)一種非常保守的抵御外界及內(nèi)在因素誘導(dǎo)的DNA 損傷的機(jī)制。由多條信號傳導(dǎo)通路構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)來監(jiān)測和傳遞損傷信號,并形成一個適當(dāng)?shù)膽?yīng)答機(jī)制。包括細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)及基因表達(dá)的調(diào)控等效應(yīng)。應(yīng)用于DNA損傷應(yīng)答,腫瘤研究,遺傳學(xué)研究等領(lǐng)域。Muse多色DNA損傷檢測試劑盒利用磷酸化的ATM(Ser1981)和H2A.X (Ser139)的抗體,可以快速而簡便地檢測細(xì)胞內(nèi)ATM和H2A.X的活化并獲取活化百分比結(jié)果。
五、Muse 人類CD4 T細(xì)胞檢測
T淋巴細(xì)胞亞群在許多臨床疾病中可發(fā)生異常改變,特別是免疫功能受損的病人。測定T淋巴細(xì)胞亞群改變對了解疾病的發(fā)病機(jī)制,指導(dǎo)臨床治療、控制疾病的發(fā)生發(fā)展均有重要意義。如細(xì)胞免疫缺陷病患者,CD4+顯著減少,常出現(xiàn)CD4+/CD8+比值倒置。此項(xiàng)指標(biāo)現(xiàn)常用于HIV感染者的監(jiān)測。Muse人類CD4 T細(xì)胞檢測試劑盒檢測CD4 T淋巴細(xì)胞數(shù)目及百分比。簡單便捷的操作可快速獲得準(zhǔn)確檢測結(jié)果。
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